本文關鍵詞：人源抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒-Gn蛋白重組抗體的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為研制人源抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)Gn蛋白重組抗體,本研究利用噬菌體表面展示技術,以SFTSV全病毒顆粒和重組表達SFTSV-Gn蛋白為抗原,從人源抗SFTSV Fab噬菌體抗體庫中篩選抗SFTSV-Gn蛋白的重組Fab抗體,通過ELISA對Fab抗體的結合特異性進行檢測。將Fab抗體基因克隆入哺乳動物細胞表達載體HL51-14,瞬時轉染293T細胞獲得分泌表達的IgG抗體。通過ELISA、IFA和Western-blotting檢測IgG抗體的結合特異性。采用親和層析純化IgG抗體,并用微量中和試驗檢測IgG抗體的中和活性。結果表明經(jīng)過三輪富集篩選,以SFTSV病毒顆粒為抗原篩選出364株針對SFTS病毒核蛋白Fab抗體,沒有篩選出特異性結合Gn蛋白的陽性克隆,而通過Gn蛋白篩選得到8株特異結合Gn蛋白的Fab抗體,其中5株來自Lambda庫,3株來自Kappa庫。ELISA、IFA和Western-blotting檢測證實這8株IgG抗體均能特異性結合Gn蛋白。微量中和試驗顯示8株新篩抗體沒有中和活性,但仍可為后續(xù)SFTSV人源單克隆抗體的研究提供借鑒和參考。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學;中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所;
【關鍵詞】： 噬菌體抗體庫 重組抗體 發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒
【基金】：重大新藥創(chuàng)制(2013ZX09304103001006)
【分類號】：R373
【正文快照】： 自2007年以來,中國多個省市出現(xiàn)高度散發(fā)發(fā)熱伴血小板減少綜合征病例,通過解析全基因序列,確定為布尼亞病毒科白嶺病毒屬的一種新病毒,命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒[1]。長期以來對同屬白蛉病毒屬(Phlebovirus)的裂谷熱病毒(RVFv)研究表明,糖蛋白對布尼亞病毒在高

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  本文關鍵詞：人源抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒-Gn蛋白重組抗體的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：442954