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人細(xì)支氣管上皮細(xì)胞的ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴(kuò)增及氣液相模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-06-06 21:04

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【摘要】:背景:人類原代肺臟上皮細(xì)胞在體外難以分離培養(yǎng),表現(xiàn)為組織來(lái)源有限、細(xì)胞存活率低、增殖速度慢,缺乏上皮細(xì)胞表型分化能力等。目的:體外擴(kuò)增人細(xì)支氣管上皮細(xì)胞,建立其氣液相分化模型,用于肺臟上皮細(xì)胞功能研究。方法:采用Pronase和DnaseⅠ聯(lián)合消化法分離人細(xì)支氣管上皮細(xì)胞。利用ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增,免疫熒光染色鑒定細(xì)胞類型。建立氣液相培養(yǎng)模型,掃描電鏡、相差顯微鏡和免疫熒光染色鑒定細(xì)胞分化類型。結(jié)果與結(jié)論:通過(guò)ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系,體外成功培養(yǎng)擴(kuò)增了人細(xì)支氣管上皮細(xì)胞。擴(kuò)增細(xì)胞經(jīng)免疫熒光染色鑒定絕大部分都表達(dá)基底細(xì)胞標(biāo)記角質(zhì)蛋白14,提示人細(xì)支氣管的基底細(xì)胞可能是肺臟上皮干細(xì)胞的主要亞群。同時(shí),擴(kuò)增細(xì)胞在氣液相培養(yǎng)條件下分化成纖毛細(xì)胞和無(wú)纖毛柱狀細(xì)胞,表明ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴(kuò)增的上皮細(xì)胞仍然保持干細(xì)胞的增殖分化能力,體外氣液相培養(yǎng)模型可以促進(jìn)人細(xì)支氣管上皮細(xì)胞分化。
【作者單位】: 西部生物資源保護(hù)與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】 細(xì)支氣管 上皮細(xì)胞 干細(xì)胞 培養(yǎng) 人細(xì)支氣管上皮細(xì)胞 肺臟 ROCK激酶抑制劑 氣液相培養(yǎng) 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31172278)~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction鏡、相差顯微鏡和免疫熒光染色鑒定細(xì)胞分化類型,從而為肺臟上皮細(xì)胞不但是抵抗外來(lái)物入侵的第一道防線,人類肺臟干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和功能特性研究奠定基礎(chǔ)。而且具備先天免疫調(diào)控功能,在肺臟免疫中擔(dān)負(fù)著由先天免疫到獲得性免疫的橋梁作用[1-2]。整個(gè)肺臟組

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 高元妹;徐軍;;小鼠氣管上皮細(xì)胞的氣液相界面培養(yǎng)[J];廣東醫(yī)學(xué);2008年02期

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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【相似文獻(xiàn)】

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2 歐維琳;;白介素-4對(duì)支氣管上皮細(xì)胞表達(dá)嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-3的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 賓曉農(nóng);譚敏;呂嘉春;蔣義國(guó);陳家X;;基因芯片篩選二羥環(huán)氧苯并芘轉(zhuǎn)化支氣管上皮細(xì)胞相關(guān)基因的研究[A];中國(guó)環(huán)境誘變劑學(xué)會(huì)抗誘變劑和抗癌劑專業(yè)委員會(huì)第三次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議、中國(guó)毒理學(xué)會(huì)生化與分子毒理專業(yè)委員會(huì)第五屆學(xué)術(shù)交流會(huì)、貴州省環(huán)境誘變劑學(xué)會(huì)成立大會(huì)暨首屆學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2004年

4 T3芝Z,

本文編號(hào):427477


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