抗輻射菌Deinoeoccus radiodurans(Dr)是一種對電離輻射，紫外線及其他一些DNA損傷劑具有顯著抗性的微球菌。該菌能在輻照后幾小時內(nèi)準確無誤地修復(fù)每條染色體上至少150多個DNA雙鏈斷裂(DSB)。已有的研究表明該獨特抗性歸功于其高效精確的DNA損傷修復(fù)能力。然而，對其修復(fù)路徑及機制知之甚少。D.radiodurans中是否存在SOS修復(fù)路徑，及在E.coli等菌中廣泛存在的LexA修復(fù)蛋白在D.radiodurans 中的功能特性如何均是未解之迷。本研究利用已克隆構(gòu)建的D.radiodurans lexA基因重組質(zhì)粒pZA172，轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109并在IPTG誘導下獲得了高效表達，Dr LexA分子量約25.4KDa。實驗表明IPTG濃度為0.1 mM，誘導時間為24 h時LexA蛋白表達效果最佳。大體積培養(yǎng)表達菌時，氨芐青霉素濃度為25 μg／ml及IPTG誘導濃度為0.1mM時，LexA表達量較高。 我們對表達產(chǎn)物進行了純化并進一步研究了純化LexA的功能特性。培養(yǎng)細胞經(jīng)溶菌酶，反復(fù)凍融，超聲等裂解破膜后，再通過高速離心，層析，超濾濃縮等技術(shù)使Le...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：博士

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英文摘要
前言（研究背景）
第一部分 D．radiodurans lexA的表達及其表達產(chǎn)物的純化
第二部分 D．radiodurans LexA蛋白DNA結(jié)合位點分析
第三部分 電離輻射對D．radiodurans LexA蛋白表達水平的影響
第四部分 RecA激活的D．radiodurans LexA蛋白降解及其自動降解
第五部分 D．radiodurans pprA,orf144c,lexA基因突變株的構(gòu)建
第六部分 D．radiodurans LexA基因突變體的性質(zhì)
結(jié)論
圖表
參考文獻
附錄1 致謝
附錄2 博士期間發(fā)表論文目錄



本文編號：3884232