重組人血管內(nèi)皮細胞因子VEGF183刺激HUVEC體外增殖
發(fā)布時間:2023-11-25 01:03
VEGF183為VEGF-A基因一個拼接異構體,因其蛋白序列與VEGF189高度同源,導致其功能研究被忽視,所以目前VEGF183功能仍需進一步研究。本研究通過畢赤酵母表達并用瓊脂糖肝素親和層析方法獲得重組人VEGF183蛋白,MTT法研究VEGF183蛋白在體外對HUVEC增殖刺激能力,并分別與VEGF165、VEGF189的相應活性作對比。Transwell與劃痕實驗分別研究其對HUVEC的遷移能力,Miles assay研究其對大鼠血管通透能力,并與VEGF189的相應活性作對比。結(jié)果發(fā)現(xiàn),VEGF183仍保留對HUVEC增殖和遷移的刺激能力,但弱于VEGF165,強于VEGF189。此外,VEGF183擁有強于VEGF189的刺激血管通透能力。本研究結(jié)果提示VEGF183可能為實現(xiàn)血管生成過程中精確調(diào)控的一個異構體。
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 結(jié)果與分析
1.1 純化蛋白VEGF183的SDS-PAGE和Western blotting鑒定
1.2 VEGF183蛋白可增加血管的通透性
1.3 VEGF183純化蛋白及VEGF165、VEGF189促進血管內(nèi)皮細胞增殖作用
1.4 Transwell實驗
2 討論
3 材料與方法
3.1 實驗材料
3.2 pPIC9K-VEGF183重組質(zhì)粒的構建
3.3 pPIC9K-VEGF183高拷貝酵母表達克隆的篩選
3.4 VEGF183蛋白的表達與純化
3.5 血管通透性實驗
3.6 MTT實驗
3.7 Transwell實驗
本文編號:3866960
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1 結(jié)果與分析
1.1 純化蛋白VEGF183的SDS-PAGE和Western blotting鑒定
1.2 VEGF183蛋白可增加血管的通透性
1.3 VEGF183純化蛋白及VEGF165、VEGF189促進血管內(nèi)皮細胞增殖作用
1.4 Transwell實驗
2 討論
3 材料與方法
3.1 實驗材料
3.2 pPIC9K-VEGF183重組質(zhì)粒的構建
3.3 pPIC9K-VEGF183高拷貝酵母表達克隆的篩選
3.4 VEGF183蛋白的表達與純化
3.5 血管通透性實驗
3.6 MTT實驗
3.7 Transwell實驗
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