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伯氏瘧原蟲推測分泌動合子蛋白7截短片段傳播阻斷功能的研究

發(fā)布時間:2023-03-11 17:39
  目的通過體外阻斷實(shí)驗(yàn)與蚊蟲直接喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)對截短的重組伯氏瘧原蟲推測分泌動合子蛋白7(r Pb PSOP7) 31~210氨基酸(aa)片段的傳播阻斷能力進(jìn)行研究。方法體外阻斷實(shí)驗(yàn),雌性BALB/c小鼠經(jīng)腹腔注射5×106伯氏瘧原蟲感染紅細(xì)胞(Pb RBC),感染后第3天,尾靜脈收集血液,與r Pb PSOP7免疫小鼠血清(大腸埃希菌表達(dá)并純化,與弗氏佐劑混合后免疫BALB/c小鼠)進(jìn)行混合培養(yǎng),觀察不同稀釋倍數(shù)(1∶5、 1∶10、1∶50)免疫血清培養(yǎng)15 min后瘧原蟲配子體出絲數(shù)及培養(yǎng)24 h后動合子形成數(shù)的變化,以同樣稀釋倍數(shù)的His標(biāo)簽蛋白免疫血清為對照。蚊蟲直接喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn),r Pb PSOP7 (實(shí)驗(yàn)組)或His標(biāo)簽蛋白(對照組)與弗氏佐劑混合后各免疫5只雌性BALB/c小鼠,于末次免疫后第10天,用苯肼處理并經(jīng)腹腔注射5×106Pb RBC,感染后第3天,每組小鼠用至少50只雌性按蚊直接吸食小鼠血液,吸血后第10天解剖按蚊,計數(shù)蚊胃壁上的囊合子數(shù),計算蚊蟲感染率。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。結(jié)果體外阻斷實(shí)驗(yàn)中,與His標(biāo)簽蛋白免疫血清對照組相比,...

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動物及瘧原蟲蟲株
    1.2 主要試劑
    1.3 r Pb PSOP7重組蛋白的表達(dá)與純化
    1.4 實(shí)驗(yàn)動物免疫及血清采集
    1.5 體外瘧原蟲配子體出絲數(shù)檢測
    1.6 體外動合子形成數(shù)檢測
    1.7 按蚊體內(nèi)囊合子形成數(shù)及蚊蟲感染率檢測
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    1.9 倫理批準(zhǔn)和患者知情同意
2 結(jié)果
    2.1 r Pb PSOP7免疫血清對配子體出絲的影響
    2.2 r Pb PSOP7免疫血清對動合子形成的影響
    2.3 r Pb PSOP7免疫血清對囊合子形成的影響
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