目的探討神經(jīng)鞘內(nèi)注射P300小分子干擾RNA（siRNA-P300）對(duì)神經(jīng)病理性疼痛（NP）大鼠模型低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）/血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）及細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）通路的影響。方法 32只鞘內(nèi)置管成功的雄性SD大鼠,隨機(jī)平均分為假手術(shù)組、模型組、陰性對(duì)照組（加入陰性對(duì)照質(zhì)粒）、siRNA-P300組（加入siRNA-P300）,每組各8只。坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷法（CCI）構(gòu)建NP大鼠模型。于術(shù)前1 d及術(shù)后1 d、3 d、5 d、7 d、9 d、14 d檢測各組大鼠機(jī)械痛閾與熱痛閾;qRT-PCR檢測P300 mRNA水平;Western blot檢測P300、Ac-H3、HIF-1α、VEGF及ERK通路相關(guān)蛋白表達(dá);ELISA法檢測脊髓液中疼痛介質(zhì)及神經(jīng)炎性因子水平。結(jié)果與術(shù)前相比,術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)各組大鼠機(jī)械痛閾、熱痛閾降低（P<0.05）。與假手術(shù)組相比,模型組、陰性對(duì)照組、siR NA-P300組大鼠IL-4及IL-10水平顯著降低（P<0.05）,P300 mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白、疼痛介質(zhì)5-HT、SP、GABA、炎性因子IF... 

【文章來源】：中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2019,57(20)

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【部分圖文】：

各組NP大鼠P300、Ac-H3蛋白表達(dá)表3各組NP大鼠P300mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白相對(duì)表達(dá)水平

中國現(xiàn)代醫(yī)生2019年7月第57卷第20期CHINAMODERNDOCTORVol.57No.20July2019·基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)·圖2各組NP大鼠HIF-1α/VEGF、ERK通路相關(guān)蛋白表達(dá)中樞敏化，并可采用機(jī)械痛閾、熱痛閾檢測疼痛行為，且具有操作簡單、創(chuàng)傷性小等優(yōu)點(diǎn)[10]。因此，本研究通過構(gòu)建CCI模型進(jìn)一步探究NP有效治療方法及其可能作用機(jī)制，為提高NP治療效果提供一定理論依據(jù)。P300屬于組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶且具有輔助激活因子作用，組蛋白去乙�；缚蓪�(duì)NP發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，進(jìn)一步研究顯示大鼠脊髓中P300表達(dá)水平升高并可促進(jìn)NP發(fā)生[11-12]，但關(guān)于其具體作用機(jī)制及可能作用通路尚未解釋清楚。研究顯示在SNL大鼠模型鞘內(nèi)注射P300抑制劑可能通過抑制P300介導(dǎo)p65乙�；⒋偈购艘蜃应蔅（NF-κB）表達(dá)水平降低，這可為神經(jīng)疼痛的治療提供靶點(diǎn)[13]。本研究構(gòu)建CCI模型并采用siRNA-P300鞘內(nèi)注射觀察大鼠機(jī)械痛閾及熱痛閾變化，結(jié)果顯示術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)各組NP大鼠機(jī)械痛閾及熱痛閾均明顯降低，提示NP模型大鼠造模成功。術(shù)后5d、14dsiRNA-P300組NP大鼠機(jī)械痛閾及熱痛閾均明顯高于模型組、陰性對(duì)照組，說明鞘內(nèi)注射P300的siRNA可有效提高NP大鼠痛閾，提示P300在NP發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果顯示模型組、陰性對(duì)照組及siRNA-P300組NP大鼠P300mRNA、蛋白及Ac-H3蛋白表達(dá)水平均顯著高于假手術(shù)組，siRNA-P300組顯著低于模型組，其中組蛋白Ac-H3屬于P300乙�；饔玫孜颷14]，分析原因可能為siRNA-P300可通過抑制脊髓P300表達(dá)并減弱P300介導(dǎo)的組蛋白乙�；饔眠M(jìn)而抑制下游疼痛基因表達(dá)。提示siRNA-P300鞘內(nèi)注射可提高NP大鼠痛閾。神經(jīng)免疫系統(tǒng)紊亂及炎癥介質(zhì)異常分泌可引發(fā)NP，因而探討siRNA-P300鞘內(nèi)注射對(duì)NP大鼠體內(nèi)炎性介質(zhì)的影響具有重要意義[15]。?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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