發(fā)布時間：2021-04-19 17:19

　　目的探討Talin1在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cell,MSC）成骨分化中的作用及其調(diào)控機(jī)制。方法誘導(dǎo)MSC成骨分化后通過qRT-PCR及Western blot檢測TLN1的表達(dá)變化,在MSC中敲低TLN1后采用CCK-8檢測細(xì)胞增殖能力改變,利用ALP活性檢測及茜素紅染色觀察成骨分化變化情況。通過Western blot實驗研究TLN1在MSC成骨分化過程中參與的分子機(jī)制。結(jié)果 qPCR及Western blot結(jié)果提示,TLN1在成骨分化過程中表達(dá)上升;siRNA敲低TLN1表達(dá)后,MSC增殖無明顯差異,ALP活性及礦化結(jié)節(jié)定量較對照組下降（P<0.05）。Western blot結(jié)果顯示敲低TLN1表達(dá)后p-AKT表達(dá)下降,回補(bǔ)實驗證明激活PI3K-AKT表達(dá)可回復(fù)MSC的成骨分化能力。結(jié)論誘導(dǎo)MSC成骨分化后TLN1表達(dá)逐漸上調(diào),敲低TLN1后通過PI3K-AKT通路抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化。 

【文章來源】：嶺南現(xiàn)代臨床外科. 2019,19(04)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 MSC的分離與培養(yǎng)
        1.2.2 成骨分化誘導(dǎo)
        1.2.3 茜素紅染色及定量
        1.2.4 堿性磷酸酶（ALP）活性檢測
        1.2.5 siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞
        1.2.6 細(xì)胞增殖試驗
        1.2.7 實時熒光定量PCR
        1.2.8 Western blot檢測
        1.2.9 PI3K/AKT通路激活劑SC-79回補(bǔ)實驗
        1.2.1 0 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 TLN1與MSC成骨分化功能呈正性相關(guān)
    2.2 敲低TLN1后抑制MSC成骨分化功能
    2.3 敲低TLN1后抑制PI3K/AKT通路
    2.4 激活PI3K/AKT通路可回復(fù)成骨分化功能
3 討論



本文編號：3147977