微小RNA-608在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨與成脂肪分化動(dòng)態(tài)平衡中的作用
發(fā)布時(shí)間:2021-01-18 03:53
目的 檢測(cè)微小RNA(miRNA,miR)-608在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)向成骨細(xì)胞和成脂肪細(xì)胞分化過程中的表達(dá)變化以及對(duì)hBMSCs向成骨細(xì)胞和成脂肪細(xì)胞分化的調(diào)控作用機(jī)制。方法 利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)分別檢測(cè)hBMSCs向成骨細(xì)胞以及成脂肪細(xì)胞分化過程中miR-608的表達(dá)變化。細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8)和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-608對(duì)hBMSCs增殖的影響。利用生物信息學(xué)軟件分析miR-608的靶基因。利用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)miR-608與靶基因的結(jié)合。利用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)miR-608對(duì)靶基因蛋白水平的表達(dá)變化。利用茜素紅染色和油紅O染色檢測(cè)miR-608對(duì)hBMSCs向成骨細(xì)胞和成脂肪細(xì)胞分化的功能的影響。應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示。兩樣本均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析。結(jié)果 FQ-PCR檢測(cè)顯示在hBMSCs向成骨細(xì)胞分化第3天miR-608表達(dá)量下降,與對(duì)照組(1.00±0.11)比較,成骨誘導(dǎo)分化組(0.20±0.09)中...
【文章來源】:中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2019,(08)
【文章頁數(shù)】:4 頁
本文編號(hào):2984221
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