目的利用Affymetric Human gene1.0基因表達譜芯片對COX-2選擇性抑制劑塞來昔布對關(guān)節(jié)軟骨細胞在炎性狀態(tài)下PGE2合成相關(guān)基因表達譜的改變進行研究,為塞來昔布的作用機制提供基因?qū)W數(shù)據(jù),并驗證基因表達譜芯片篩選COX-2及PGE2相關(guān)基因表達差異的可靠性。方法收集3例關(guān)節(jié)軟骨組織標本,其中2例來源于全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)、1例來源于正常關(guān)節(jié)軟骨,分離培養(yǎng)軟骨細胞。將每株細胞分為陰性對照組、陽性對照組（IL.1β刺激）、藥物干預(yù)組（塞來昔布+IL-1β刺激）。低溫保存后提取總RNA,分別標記熒光探針后與Affymeitric Human gene1.0基因表達譜芯片雜交。雜交后進行圖像掃描和數(shù)據(jù)分析,分別比較陽性對照組與陰性對照組、藥物干預(yù)組與陽性對照組,篩查出軟骨細胞中與COX-2及PGE2代謝相關(guān)的差異表達基因,并使用Real-time PCR及ELISA技術(shù)對COX-2及PGE2相關(guān)基因篩查結(jié)果進行驗證。結(jié)果第一部分：芯片篩查結(jié)果1)3株細胞的陽性對照組與陰性對照組篩選出共同差異表達基因212條,這些基因涉及細胞外基質(zhì)合成與降解基因、免疫與炎癥反應(yīng)基因、細胞增殖與凋亡基... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻
第一部分：基因表達譜芯片篩查炎癥狀態(tài)下塞來昔布對關(guān)節(jié)軟骨細胞PGE2相關(guān)基因表達譜的改變
    材料與方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分 塞來昔布對關(guān)節(jié)軟骨細胞COX-1、COX-2、mPGE-1、mPGE-2、MMP1、MMP3、MMP13、EP2、EP4表達的影響
    材料與方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻
全文總結(jié)
英文名詞及縮寫
綜述
    參考文獻
致謝
發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]特異性環(huán)氧合酶-2抑制劑西樂葆胃黏膜安全性實驗研究[J]. 李軍婷,李兆申,湛先保,崔忠敏,聶時南.  中華消化雜志. 2002(01)



本文編號：2927036