發(fā)布時(shí)間：2020-11-08 17:40

　　 目的探討糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體(GITR)在銅綠假單胞菌(PA)感染中的作用。方法在小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞中過表達(dá)PSG5-GITR,PA感染、異硫氰酸熒光素標(biāo)記的葡聚糖(FITC-Dextran)或Alexa Fluor 488熒光素標(biāo)記的酵母多糖生物微粒處理。免疫熒光和蛋白印跡檢測(cè)PA感染細(xì)胞中自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)的表達(dá),免疫熒光、平板計(jì)數(shù)試驗(yàn)或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞吞噬能力。結(jié)果過表達(dá)PSG5-GITR促進(jìn)PA感染后RAW264.7細(xì)胞LC3Ⅱ的表達(dá),上調(diào)LC3斑點(diǎn)數(shù)量;抑制細(xì)胞對(duì)PA和FITC-Dextran的吞噬作用,下調(diào)吞噬溶酶體的數(shù)量;3-甲基腺嘌呤抑制自噬后,GITR抑制的RAW264.7細(xì)胞吞噬作用被有效回復(fù)。結(jié)論 GITR通過促進(jìn)PA誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7自噬,從而抑制其吞噬功能。
【部分圖文】：

過表達(dá)GITR促進(jìn)PA誘導(dǎo)的LC3Ⅱ表達(dá)Fig.1OverexpressionofGITRpromotedLC3ⅡproteinlevelsinmacrophagesafterPAinfection00102103104PEGITR

過表達(dá)GITR抑制巨噬細(xì)胞吞噬功能Fig.3OverexpressionofGITRinhibitedmacrophagemediatedphagocytosisPSG5GITR10ZymDQRed200PSG5PSG5GITRPSG5PSG5GITR注：aP<0.05

過表達(dá)GITR促進(jìn)PA誘導(dǎo)的LC3斑點(diǎn)聚集Fig.2OverexpressionofGITRpromotedtheformationofLC3punctainPAinfectedmacrophagesLC3puncPSG5GITR
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