目的通過檢測失血性休克家兔腸系膜微循環(huán)、肝腎組織中IL-6表達、CD68巨噬細胞浸潤情況以及血清中IL-6,IL-8含量的變化,探討雌激素對失血性休克家兔腸系膜微循環(huán)的影響以及對肝、腎重要器官的保護作用機制.方法將家兔隨機分為5組,即模型組(MD組)、生理鹽水治療組(NC組)、雌二醇治療組(ET組)、山莨菪堿治療組(AN組)和雌二醇預防組(EP組).采用Chaudry方法復制家兔失血性休克模型,并記錄腸系膜微循環(huán)變化,分別于休克前、休克Ⅱ期1 h、治療后2 h采血,分離血清,備用.在預定時間段取肝、腎組織,石蠟包埋,HE切片,行光學顯微鏡觀察,通過免疫組化法檢測家兔肝、腎組織中IL-6,CD68的表達情況,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清中IL-6,IL-8濃度的變化.結果休克治療2 h后,雌二醇預防組、山莨菪堿治療組的微循環(huán)明顯優(yōu)于其他組; HE染色發(fā)現(xiàn)雌二醇預防組、山莨菪堿治療組肝、腎組織損傷程度較生理鹽水治療組、模型組損傷程度輕;雌二醇預防組和山莨菪堿治療組肝、腎組織IL-6陽性表達率和CD68陽性巨噬細胞浸潤程度低于其他組;血清學檢查休克Ⅱ期1 h、雌二醇預防組血清IL-6,IL-8濃度低于其他組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);治療后2 h,雌二醇預防組和山莨菪堿治療組血清中IL-6和IL-8濃度低于其他組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05).結論雌激素可改善失血性休克家兔腸系膜的微循環(huán),對肝、腎具有一定的保護作用.
【部分圖文】：

，通過回輸和抽血維持血壓在40mmHg上下，即休克Ⅱ期．維持1h后，分別從頸靜脈輸血、輸液進行治療．雌二醇預防組:血液回輸+補液(失血量的2倍);山莨菪堿治療組:血液回輸+山莨菪堿2．5mg/kg+補液(失血量的2倍);雌二醇治療組:雌二醇(500μg，皮下注射)+血液回輸+補液(失血量的2倍);生理鹽水治療組:血液回輸+補液(失血量的2倍);模型組，不進行治療．見圖1．實驗各時間段頸動脈留存休克前、休克Ⅱ期1h、治療后2h的血液樣本．圖1家兔飼養(yǎng)及造模過程Fig．1Theprocessoffeedingandmodeling1．4微循環(huán)觀察應用BI-2000微循環(huán)儀觀察家兔腸黏膜血管數(shù)量、血管壁變化、血流流態(tài)及血細胞聚集情況．1．5HE染色在預定時間段給家兔放血，取肝、腎，肝葉、腎均沿矢狀面剖開，4%甲醛固定，石蠟包埋，切片厚5μm，HE染色，光學顯微鏡對比觀察各組器官的組織變化．1．6免疫組織化學染色檢測各器官組織內IL-6表達及巨噬細胞浸潤采用雙盲法閱片，由兩個病理醫(yī)師獨立完成．結果判定IL-6和CD68胞漿表達黃色或棕褐色顆粒為陽性表達．評分標準:選擇染色均勻的區(qū)域，每張切片中隨機選取高倍視野(×400)10個，每個視野計數(shù)100個細胞，記錄陽染細胞的數(shù)量，累計相加各個視野的陽性細胞總數(shù)，再計算細胞的陽性率．陽性細胞數(shù)≥10%為(+)，陽性細胞數(shù)＜25%判定為1分，26%～50%為2分，51%～74%為3分，＞75%為4分．細胞染色強度(根據(jù)著色細胞占視野細胞的百分率)分為4個等級:無染色0分，淡黃色1分，棕黃色2分，深褐色3?

呈缺氧狀態(tài)，并黏附聚集在血管壁上，鏡下可見血管壁增厚、變形，終末小血管徹底斷流．見圖2C．雌二醇預防組家兔血液流態(tài)及血管變化總體要優(yōu)于其他組別，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0．05)．見圖2D．治療2h后，各組家兔腸系膜微循環(huán)逐漸恢復，治療過程中可見血液再灌注，淤積在血管內及血管壁上的血液團塊逐漸被沖走，血管充盈，血液流態(tài)逐漸恢復到線粒流，終末小血管逐漸恢復，血液充盈，雌二醇預防組和山莨菪堿治療組家兔血液流態(tài)明顯優(yōu)于其他組別(P＜0．05)．見圖2E，2F．圖2家兔腸系膜微循環(huán)各時間節(jié)點狀態(tài)Fig．2Thetimenodesofmesentericmicrocirculationinrabbits2．2病理學觀察2．2．1肝組織病理學觀察HE染色后，光學顯微鏡下觀察各組家兔肝組織的病理學改變:模型組肝組織內有大量中性粒細胞浸潤，肝索崩解，肝細胞壞死，肝竇內充滿血漿樣物質．見圖3A．生理鹽水治療組和雌二醇治療組有大量的炎細胞浸潤，肝細胞水腫、變性，肝索崩解，生理鹽水治療組較雌二醇治療組病變程度重，其肝細胞出現(xiàn)水樣變．見圖3B、3C．山莨菪堿治療組和雌二醇預防組肝細胞深染、水腫，有少量的炎細胞浸潤，肝索形態(tài)稍有改變．見圖3D，3E．圖3家兔肝組織HE染色(×400)Fig．3HEstainingofrabbitlivertissue2．2．2腎組織病理學觀察HE染色后，光學顯微鏡下觀察各組家兔腎組織的病理學改變:模型組腎小管上皮細胞水腫、變性壞死，腎小管腔內有大量物質滲出．見圖4A．生理鹽水治療組及雌二醇治療組腎小管上皮細胞排列紊亂，管腔內有血漿樣云絮狀物質滲出．見圖4B，4C．山莨菪堿治療組和雌二醇預防組腎小管上皮細胞?

ationinrabbits2．2病理學觀察2．2．1肝組織病理學觀察HE染色后，光學顯微鏡下觀察各組家兔肝組織的病理學改變:模型組肝組織內有大量中性粒細胞浸潤，肝索崩解，肝細胞壞死，肝竇內充滿血漿樣物質．見圖3A．生理鹽水治療組和雌二醇治療組有大量的炎細胞浸潤，肝細胞水腫、變性，肝索崩解，生理鹽水治療組較雌二醇治療組病變程度重，其肝細胞出現(xiàn)水樣變．見圖3B、3C．山莨菪堿治療組和雌二醇預防組肝細胞深染、水腫，有少量的炎細胞浸潤，肝索形態(tài)稍有改變．見圖3D，3E．圖3家兔肝組織HE染色(×400)Fig．3HEstainingofrabbitlivertissue2．2．2腎組織病理學觀察HE染色后，光學顯微鏡下觀察各組家兔腎組織的病理學改變:模型組腎小管上皮細胞水腫、變性壞死，腎小管腔內有大量物質滲出．見圖4A．生理鹽水治療組及雌二醇治療組腎小管上皮細胞排列紊亂，管腔內有血漿樣云絮狀物質滲出．見圖4B，4C．山莨菪堿治療組和雌二醇預防組腎小管上皮細胞排列較整齊，管腔內滲出物少，雌二醇預防組腎小管上皮細胞部分深染．見圖4D，4E．圖4家兔腎組織HE染色(×40)Fig．4HEstainingofrabbitkidneytissue2．3肝、腎組織內IL-6表達及巨噬細胞的浸潤情況2．3．1IL-6在肝組織內表達情況免疫組織化學染色顯示:胞質表達棕黃色或棕846北華大學學報(自然科學版)第20卷
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本文編號：2861802