阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是進行性神經(jīng)降解性疾病，通常表現(xiàn)為記憶喪失。其基本病理表現(xiàn)為APP在腦部的異常代謝產(chǎn)生的38-42個氨基酸的有神經(jīng)毒性的多肽(Aβ，β／A4)沉積在大腦皮層和海馬結(jié)構(gòu)，形成β-淀粉樣斑塊。斑塊的主要成分是由β-淀粉樣前體蛋白(β-Amyloid Precursor Protein，β-APP)衍生的38-42個氨基酸的有神經(jīng)毒性的多肽(Aβ，β／A4)。APP在體內(nèi)有多種剪接形式，其中695、751、770為主要形式。APP751和APP770均含有蛋白酶抑制子編碼區(qū)KPI，APP695主要在腦組織表達。在家族性阿爾茨海默病患者(FAD)中已鑒別出多個APP基因的突變位點�，F(xiàn)有的研究結(jié)果證明，APP基因的突變及異常表達可以部分解釋多肽的降解及AD的發(fā)病機制。 動物模型的缺少已經(jīng)成為AD發(fā)病機理研究及藥物篩選的主要障礙。雖然化學(xué)方法，免疫方法甚至將多肽直接注入嚙齒類動物腦內(nèi)的努力都已嘗試，但都不是很理想。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)復(fù)制阿爾茨海默病動物模型，已成為一個主要發(fā)展方向。 本論文共分為兩個部分，第一部分：建立阿爾茨海默病的轉(zhuǎn)基因動物模型；第二部分：利用轉(zhuǎn)基因動物模型進行APP代謝的研究與發(fā)病機理的探討。 第一部分我們進行了轉(zhuǎn)基因構(gòu)建與表達檢測，并通過顯微注射的方法，制備攜帶有突變的人APP基因的轉(zhuǎn)基因小鼠。選擇具有神經(jīng)組織特異性的PDGF啟動子調(diào)控717位點突變的全長APP cDNA。在分別獨立的反應(yīng)中，啟動子、APP cDNA、載體依摩爾比3:3:1及1:1:1同時連接。重組體經(jīng)酶切鑒定后，用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染SY5Y神經(jīng)母細胞瘤細胞，Northen blot雜交檢測到外源基因的表達。
【學(xué)位單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2000
【中圖分類】：R-332
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文名詞及縮寫
第一部分 阿爾茨海默病轉(zhuǎn)基因動物模型的建立
    一 前言
    二 材料與方法
    三 結(jié)果
    四 討論
第二部分 利用轉(zhuǎn)基因動物模型進行阿爾茨海默病發(fā)病機理研究
    一 前言
    二 材料與方法
    三 結(jié)果
    四 討論
小結(jié)
綜述
發(fā)表論文
致謝

【引證文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 杜靜;全雄志;趙海平;董偉;張連峰;秦川;;腦組織特異表達膽囊收縮素轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2007年11期

本文編號：2847796