目的:觀察內(nèi)毒素(LPS)和過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞損傷的影響。方法:紫外分光光度法檢測(cè)乳酸脫氫酶(LDH)釋放率;原位末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;RT-PCR檢測(cè)Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表達(dá);Western blotting檢測(cè)Bcl-2、Bax、Caspase-3、細(xì)胞色素C(Cyt-C)及CLIC4的蛋白水平。結(jié)果:與對(duì)照組相比,LPS組C6細(xì)胞凋亡率及LDH釋放率增加(p﹤0.05);Bcl-2、Bax表達(dá)未見明顯差異,Caspase-3表達(dá)增強(qiáng),CLIC4蛋白水平及胞漿Cyt-C未見明顯變化。H2O2組C6細(xì)胞凋亡率及LDH釋放率增加(p﹤0.05);Bcl-2表達(dá)下降,Bax、Caspase-3、CLIC4蛋白水平明顯增強(qiáng)。與H2O2組相比,LPS與H2O2聯(lián)合作用于C6細(xì)胞,細(xì)胞凋亡率及LDH釋放率明顯增加(p﹤0.05);Bcl-2表達(dá)下降,Bax、Caspase-3、胞漿細(xì)胞色素C表達(dá)增強(qiáng),CLIC4蛋白水平變化不明顯。結(jié)論:LPS和H2O2能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,其效果具有相加作用,提示LPS和H2O2能夠增強(qiáng)細(xì)胞的損傷,其機(jī)制與Bcl-2表達(dá)下降,Bax、Caspase-3表達(dá)上調(diào)有關(guān)。CLIC4主要參與了細(xì)胞氧化損傷的過程,可能未參與內(nèi)毒素引起細(xì)胞損傷機(jī)制。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R363
【文章目錄】：
提要
英文縮寫詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. 內(nèi)毒素的生物學(xué)功能
    2. 過氧化氫與細(xì)胞凋亡
    3. 氯通道家族及CLIC4
第二章 材料與方法
    第一節(jié) 主要材料
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        一、神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞培養(yǎng)
        二、乳酸脫氫酶（Lactate dehydrogenase,LDH）活性測(cè)定
        三、原位末端標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        四、RT-PCR 檢測(cè) Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表達(dá)
        五、RT-PCR 檢測(cè) Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表達(dá) 1.細(xì)胞總蛋白的提 取
        六、Weaternblot 檢測(cè)胞漿蛋白 Cyt-C 蛋白的表達(dá)
        七、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
2O₂ 對(duì) C6 細(xì)胞的 LDH 釋放率的影響'>    1. LPS 和H₂O₂ 對(duì) C6 細(xì)胞的 LDH 釋放率的影響
2O₂ 作用的 C6 細(xì)胞凋亡率'>    2. TUNEL 法檢測(cè) LPS 和 H₂O₂ 作用的 C6 細(xì)胞凋亡率
2O₂對(duì)C6 細(xì)胞Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表達(dá)的影響'>    3. LPS 和H₂O₂對(duì)C6 細(xì)胞Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表達(dá)的影響
2O₂ 對(duì)C6 細(xì)胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、CLIC4 及胞漿蛋白 Cyt-C 蛋白表達(dá)的影響'>    4. 4LPS 和H₂O₂ 對(duì)C6 細(xì)胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、CLIC4 及胞漿蛋白 Cyt-C 蛋白表達(dá)的影響
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
中文摘要
Abstract
致謝
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【共引文獻(xiàn)】

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