炎癥失控是感染性疾病并發(fā)多器官功能障礙的主要發(fā)病機(jī)制，單核-巨噬細(xì)胞的活化在誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。在脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)或其它致炎因素作用下，巨噬細(xì)胞生成并釋放大量的促炎細(xì)胞因子，包括TNT-α、IL-1β、IL-6等，這些細(xì)胞因子的過量釋放可引起機(jī)體自身組織損傷，導(dǎo)致過度的全身性炎癥反應(yīng)，最終導(dǎo)致多器官功能障礙以至死亡。肺臟是公認(rèn)的較早發(fā)生功能障礙的器官。肺巨噬細(xì)胞包括分布在肺泡腔表面及肺泡腔內(nèi)的肺泡巨噬細(xì)胞(alveolar macrophages，AMs)，分布在肺泡隔、支氣管及血管旁的肺間質(zhì)巨噬細(xì)胞(pulmonary interstitial macrophages，PIMs)和肺血管內(nèi)的巨噬細(xì)胞。近來對PIMs研究的不斷深入表明，在內(nèi)毒素血癥時(shí)PIMs較AMs更早受到LPS攻擊，其吞噬功能、對補(bǔ)體的趨化作用及產(chǎn)生氧自由基的能力明顯強(qiáng)于AMs，在肺組織炎癥反應(yīng)中起重要作用。因此，有效控制肺PIMs的過度激活將對減輕肺組織炎癥反應(yīng)起到積極的保護(hù)作用。 體內(nèi)一些神經(jīng)肽／激素如生長激素、生長抑素、血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)、降鈣素基因相關(guān)肽、八肽膽囊收縮素(cholecystokinin octapeptide，CCK-8)、神經(jīng)肽Y、神經(jīng)加壓素等具有一定的抗炎及抗休克作用，構(gòu)成了神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。本室一直致力于研究CCK-8的抗內(nèi)毒素休克(endotoxin shock，ES)及抗炎作用，用CCK-8預(yù)處理ES大鼠可使平均動(dòng)脈壓回升而肺動(dòng)脈壓降低，并明顯減輕ES時(shí)肺臟、肝臟、脾臟、腎臟間質(zhì)水腫及白細(xì)胞浸潤等炎性病理損傷，降低死亡率。CCK-8緩解ES大鼠早期肺動(dòng)脈高壓的作用與其減輕肺臟炎癥反應(yīng)有關(guān)。但有關(guān)CCK-8的抗炎作用及其機(jī)制尚未完全闡明，仍存在許多問題亟待解決。我們的新近研究表明肺巨噬細(xì)胞存在CCK受體基因表達(dá)，并可被LPS誘導(dǎo)表達(dá) 中文摘要 增加，提示CCK七可能通過與其受體相互作用而干預(yù)LPS激活巨噬細(xì) 胞的過程，從而調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。 LPS介導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化的信號通路錯(cuò)綜復(fù)雜，但目前認(rèn)為LPS一 CD14TLR4一IRAKIKKIKB－－am＊x－h(huán)了rolnfiammatory cytoklnes 是其中一條關(guān)鍵的信號通路，即LPS與巨噬細(xì)胞膜表面LPS受體CD14 結(jié)合后，激活 Toll樣受體 4（TOll like receptor 4，TLR4）并與之結(jié)合形 成受體復(fù)合物，募集適配分子 MyD88，MyD88的死亡結(jié)構(gòu)域再募集下 游的L－l受體相關(guān)激酶（IL－lreceptor－associated kinase，I肌）到受體 復(fù)合物。IRAK隨后發(fā)生自磷酸化，從受體復(fù)合物解離，募集’－’v－’受 體相關(guān)因子 6（1’i－ receptor－associated factor 6，T附6），］順次激活 下游激酶，包括 W－h(huán)誘導(dǎo)激酶（W－h(huán)－inducing kinase NIK）和絲裂 素活化蛋白激酶a皿激酶激酶（mitogen－activated Protein klnase億RK kinase kinase，MEKKI）。激活的MK或MEKKI 都能獨(dú)自激活I(lǐng)皿 復(fù)合物，導(dǎo)致Ich磷酸化降解，NF－h(huán)移位入核，啟動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄。 因此本實(shí)驗(yàn)以體外培養(yǎng)的大鼠PIMS為對象，系統(tǒng)研究CCK8對 LPS作用下細(xì)胞內(nèi) LPS——CD14——TLR4－I－I皿一Ith一h一 prolnflammatory cytokines s條信號通路的影響，探討 CCK七對 LPS誘 導(dǎo)PIMS活化的作用及其信號通路，以揭示CCK七抑制LPS致肺組織 炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制。 ICCK－呂對LPS誘導(dǎo)大鼠肺間質(zhì)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生促炎因子及基因表 達(dá)的影響 應(yīng)用膠原酶消化法結(jié)合肺泡耗竭灌洗和肺循環(huán)灌洗技術(shù)分離純化 SD大鼠PIMS，在加入或不加人CCK七的情況下，用LPS刺激細(xì)胞一 定時(shí)間，用ELISA7L檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF咀的含量，用RTPCR。” 技術(shù)分析細(xì)胞中 ’vmv咀及 ILl InRNA的表達(dá)。數(shù)據(jù)用王土s表示，用 SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組均數(shù)的比較行單因素方差分 析（ANOVA人用最小顯著差法 （leastsignifican differenCe，LSD）作 兩兩比較，P＜O刀5為有顯著性差異。結(jié)果顯示：（）NMs自發(fā)性產(chǎn)生 IN17億的量非常少，低于我們檢測的下限。LPS lm叭孵育 PIMs 12 h 時(shí)，細(xì)胞上清中的 TNF心含量明顯增多 門66．61土 124．40 pg／ml， P＜0刀1）；CCK．8（10｛ mol／L－10－‘mol／L）可劑量依賴性地抑制 LPS誘 2 中文摘要 導(dǎo)的 INF叱生成增多，10－‘mol／L CCK七輕微降低 LPS誘生的 INI7咀， 但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（497＊ 1士 132．25 pg／ffil， P＞0＊5），而 10－’mol幾 CCK－8 抑制LPS誘導(dǎo)的T’i－－Q生成達(dá)44％（3 19＊ 士62．ZI pg／ffil，P＜0＊1）， 10“mol幾 CCK－8抑鎬率達(dá)刀％ （16．99士63．49 p吻l，P＜0＊1），但仍 明顯高于對照組（P＜0刀5人＊＊卜8單獨(dú)孵育對TNF心的生成無明顯影 響（P＞0刀5）。（2）LPS叭孵育 PIMs 3 h可導(dǎo)致細(xì)胞 1’i－’－a mRNA 表達(dá)明顯增高（P＜O．01人而＊陀與＊＊義8共同孵育的NMs，其TNF咀 ＜ RNRNA表達(dá)水平明顯低于＊＊S組，并呈劑量依
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2002
【中圖分類】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 呂長俊,李明娥,劉俊英,劉花香;大鼠肺間質(zhì)巨噬細(xì)胞的分離及有關(guān)特征[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1998年01期

2 劉軒,魏育林;LPS受體CD14的最新研究進(jìn)展[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;1999年02期

3 趙虎,周庭銀,孔憲濤;CD14的結(jié)構(gòu)和功能[J];免疫學(xué)雜志;2000年01期

4 谷振勇;過氧亞硝基陰離子介導(dǎo)內(nèi)毒素致肺血管損傷及膽囊收縮素的保護(hù)作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2001年02期

5 朱文玉,金雨蓀;八肽膽囊收縮素對鏈佐霉素引起的小鼠糖尿病的保護(hù)作用[J];生理學(xué)報(bào);1985年06期

6 孟愛宏,凌亦凌,王殿華,谷振勇,李淑瑾,朱鐵年;八肽膽囊收縮素減輕腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的離體兔肺動(dòng)脈反應(yīng)性變化及內(nèi)皮細(xì)胞損傷[J];生理學(xué)報(bào);2000年06期

7 孟愛宏,凌亦凌,王殿華,谷振勇,李淑瑾,朱鐵年;NO在CCK-8減輕腫瘤壞死因子誘導(dǎo)兔肺動(dòng)脈反應(yīng)性變化中的作用[J];生理學(xué)報(bào);2001年06期

8 凌亦凌，黃善生，王樂豐，張君嵐，萬梅，郝榮利;八肽膽囊收縮素抗內(nèi)毒素休克的實(shí)驗(yàn)研究[J];生理學(xué)報(bào);1996年04期

9 叢斌,凌亦凌,谷振勇,王俊霞,姚玉霞;八肽膽囊收縮素對脂多糖誘導(dǎo)大鼠肺組織NF-κB活性增高的抑制作用[J];中國病理生理雜志;2000年10期

10 李淑瑾,凌亦凌,王殿華,谷振勇,孟愛宏,朱鐵年,賀穎;八肽膽囊收縮素對脂多糖誘導(dǎo)離體兔胸主動(dòng)脈反應(yīng)性改變的影響[J];中國病理生理雜志;2001年11期

本文編號：2824901