【摘要】：成熟于生發(fā)中心（GerminalCenter,GC）的高親和力抗體是機體長效抵抗微生物感染、維持自身健康的關(guān)鍵因素之一。雖然GC區(qū)域主要由活化B細胞組成，但是正常的GC反應(yīng)還需要一部分CD4+T細胞遷移到濾泡區(qū)內(nèi)與B細胞接觸，進而輔助GC B細胞的存活與克隆增殖。由于這群具有很強輔助能力的T細胞特異性的在濾泡區(qū)發(fā)揮功能，因此被命名為濾泡性輔助T細胞（FollicularhelperTcells,Tfh cells）。目前，關(guān)于T如何進入濾泡區(qū)分化成為Tfh細胞以及Tfh細胞調(diào)節(jié)GC反應(yīng)的機制還有諸多亟待解決的問題。 ICOS是Tfh細胞高表達的CD28家族的協(xié)同刺激信號分子。通過體外逆轉(zhuǎn)錄病毒表達系統(tǒng)和抗原特異型淋巴細胞轉(zhuǎn)移動物模型，我們發(fā)現(xiàn)ICOS能夠在趨化因子受體表達量之外，直接調(diào)節(jié)濾泡區(qū)招募輔助T細胞的過程。利用μMT:Icosl-/-骨髓重建動物模型為基礎(chǔ)的研究表明濾泡區(qū)靜息狀態(tài)B細胞上的ICOSL是ICOS依賴型招募過程的必要條件。在磷脂雙分子層膜上利用TIRF顯微鏡觀測T細胞的運動，發(fā)現(xiàn)ICOS的刺激能夠通過PI3K通路增強細胞的隨機運動能力；進一步利用活體雙光子顯微鏡觀測發(fā)現(xiàn)ICOS在體內(nèi)也直接促進了T細胞的偽足形成以及運動能力，并且該過程依賴于靜息狀態(tài)B細胞上ICOSL分子的表達。 T細胞與抗原特異B細胞的共定位接觸是Tfh細胞輔助GC反應(yīng)的主要方式。本文對Icosl+/+: Icosl-/-骨髓嵌合體小鼠的免疫反應(yīng)分析表明ICOSL在GC B細胞上存在內(nèi)在作用。通過在活體內(nèi)分析胞內(nèi)鈣信號強度與細胞間的接觸狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)ICOSL能夠通過ICOS增加T細胞內(nèi)鈣信號，進而促進T細胞緊密地纏繞在B細胞上。對GC B細胞的轉(zhuǎn)錄組的比較發(fā)現(xiàn)野生型B細胞通過ICOSL誘導(dǎo)的“纏繞”狀態(tài)獲得了更強的CD40信號；而GCB細胞被CD40抗體刺激后又能促進ICOSL的表達。進一步分析嵌合體小鼠中漿細胞比例和B6小鼠GC B細胞的親和力，發(fā)現(xiàn)ICOSL對于漿細胞的形成和親和力成熟都具有非常直接的調(diào)節(jié)作用。因此，ICOS-ICOSL與CD40L-CD40這兩對配體-受體的相互作用能夠組成Tfh細胞輔助GC反應(yīng)和親和力成熟的正反饋循環(huán)網(wǎng)絡(luò)。 縱上所述，，本論文在發(fā)現(xiàn)ICOS和ICOSL分子新功能的基礎(chǔ)上，闡明了持續(xù)性隨機運動能力與Tfh細胞分化的關(guān)系；明確了Tfh細胞如何通過一個正反饋循環(huán)網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)GC B細胞的親和力篩選過程。
【圖文】：

與并不能形成正常 GC 反應(yīng)。如圖 1.1 所以，GC 在胞分裂的“暗區(qū)（DarkZone,DZ）”和與其對應(yīng)存在的“明區(qū)中的濾泡性樹突狀細胞（Follicular DC, FDC）為是為 GC B 細胞提供抗原的細胞[29]，并且成為了區(qū)中還有部分 T 細胞存在，目前已知這部分 T 細胞力的成熟都是必不可少的。

1.2 TCR與攜帶抗原的MHC分子結(jié)合結(jié)構(gòu)示意圖（綠色與藍色分別為TCR α和β鏈；綠色和黃色分別為MHC的α和β鏈；紅色為抗原肽斷）[64]2.3 抗原特異性相互作用是 T 細胞輔助 B 細胞的重要機制在體外細胞培養(yǎng)體系中缺少T細胞或者利用抗體中和T細胞表面分子后，B細
【學(xué)位授予單位】：清華大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R392

【引證文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李明明;表達鼠CXCL13重組狂犬病病毒的構(gòu)建及免疫原性的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

本文編號：2590364