【摘要】： 目的: 脂肪干細胞是否可以在特定的誘導環(huán)境下分化形成血管平滑肌細胞,為構建組織工程化血管的血管平滑肌細胞尋找新的種子細胞來源。 方法: 應用酶消化法消化人脂肪組織獲取原代脂肪干細胞,待原代細胞生長至融合后,采用免疫磁珠法分選CD34+的細胞以取得較高純化的脂肪干細胞,分選的細胞生長24小時后采用酶消化法收獲細胞用于實驗。實驗分實驗組和對照組兩組,對照組培養(yǎng)液為5%M199培養(yǎng)液,實驗組培養(yǎng)液為5%M199培養(yǎng)液內添加生長因子PDGF-BB(50ng/ml)、TGF-β1(2.5ng/ml),誘導14天,每日觀察誘導組細胞形態(tài)學的變化;14天后分別采用免疫熒光、RT-PCR的方法檢測血管平滑肌細胞特異性標記α-SMA、Calponin、SM22α、SM-MHC的表達情況;流式細胞術檢測實驗組細胞在誘導14天前后α-SMA、Calponin、SM-MHC的陽性表達率。 結果: 脂肪干細胞在特定的誘導環(huán)境下誘導14天后,細胞生長呈現血管平滑肌細胞所特有的峰-谷樣生長;免疫熒光、RT-PCR檢測細胞:α-SMA、Calponin、SM22α、SM-MHC呈陽性表達;實驗組細胞誘導14天后,α-SMA、Calponin、SM-MHC的陽性表達率為50.58±2.71%,42.94±2.76%,49.31±0.67%,誘導前為5.11±0.44%,5.73±0.54%,8.42±0.47%;誘導后較誘導前陽性表達率明顯增加,有非常顯著性差異(P＜0.01)。 結論: 脂肪干細胞在體外特定的誘導環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后,呈現明顯的血管平滑肌細胞的特性,有可能成為構建組織工程化血管新的種子細胞來源。
【圖文】：

生長至融合狀態(tài)(圖 1.B)，收集細胞進行MACS分選，分選獲得的CD34+細胞，生長呈紡錘形(圖1.C)，加入誘導液48h后，實驗組細胞形態(tài)較對照組有所增大并有一定方向性(圖1.D)，7天后呈現血管平滑肌細胞所特有的“谷-

呈紡錘形或梭形，類成纖維細胞樣生長(圖1.A);原代細胞生長5一6天后，生長至融合狀態(tài)(圖 1.B)，，收集細胞進行MACS分選，分選獲得的CD34+細胞，生長呈紡錘形(圖1.C)，加入誘導液48h后，實驗組細胞形態(tài)較對照組有所增大并有一定方向性(圖1.D)，7天后呈現血管平滑肌細胞所特有的“谷-
【學位授予單位】：昆明醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R329

【共引文獻】

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本文編號：2575334