【摘要】：誘導多能干細胞(IPS)是近年來研究的熱門,而IPS細胞體外培養(yǎng)需要飼養(yǎng)層細胞。小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)可分泌白血病抑制因子,作為IPS細胞的飼養(yǎng)層細胞。目的建立分離培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細胞的體系,制作高質量的IPS飼養(yǎng)層細胞。方法選妊娠11.5~15.5d的昆明小鼠制作MEF細胞,選擇第三代MEF細胞用不同濃度絲裂霉素C處理,制作飼養(yǎng)層細胞,在飼養(yǎng)層細胞上接種IPS細胞,觀察各組IPS細胞生長狀態(tài)并計算克隆數(shù)目。結果妊娠第13.5天的胚胎制作的MEF,經(jīng)10μg/ml的絲裂霉素C處理3h的飼養(yǎng)層細胞狀態(tài)較好,其IPS生長狀況最好,克隆數(shù)目和質量最佳。結論不同胎齡胚胎分離的MEF可用做IPS飼養(yǎng)層,第13.5d的胚胎分離的MEF細胞經(jīng)10μg/ml的絲裂霉素C處理3h制成的飼養(yǎng)層細胞最適于IPS細胞生長。

【共引文獻】

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