【摘要】： 目的:利用肝癌細(xì)胞(Bel-7404)、大腸癌細(xì)胞(Caco-2)和宮頸癌細(xì)胞(Hela)及其培養(yǎng)上述三種細(xì)胞的上清液,在體外對(duì)泡球蚴進(jìn)行培養(yǎng),建立穩(wěn)定的體外培養(yǎng)模型,觀察泡球蚴的在體外的細(xì)胞親和性及生長(zhǎng)、發(fā)育過程。方法:培養(yǎng)肝癌細(xì)胞(Bel-7404)、大腸癌細(xì)胞(Caco-2)和宮頸癌細(xì)胞(Hela),留取細(xì)胞上清液。取泡球蚴組織,分別與上述三種細(xì)胞及含三種細(xì)胞培養(yǎng)上清的DMEM完全培養(yǎng)基于37℃5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)38d。實(shí)驗(yàn)期間對(duì)囊泡進(jìn)行計(jì)數(shù),觀察囊泡生長(zhǎng)情況,記錄囊泡最大、最小直徑,繪制生長(zhǎng)曲線。培養(yǎng)結(jié)束后,取培養(yǎng)囊泡囊液進(jìn)行蛋白定量。利用SDS-PAGE技術(shù)觀察囊液中蛋白條帶特征。結(jié)果:泡球蚴與三種細(xì)胞及其上清液中均能共同生長(zhǎng),呈出芽生殖方式,囊泡直徑0.5～5.0 mm;囊液蛋白含量分別為:肝癌細(xì)胞,3.8mg/ml;肝癌細(xì)胞上清液,1.1mg/ml;大腸癌細(xì)胞,3.2mg/ml;大腸癌細(xì)胞上清液,1.2mg/ml;宮頸癌細(xì)胞,2.5mg/ml;宮頸癌細(xì)胞上清液,3.8mg/ml。泡球蚴在體外與不同的細(xì)胞共培養(yǎng)的初期生長(zhǎng)特點(diǎn)基本相似:均在培養(yǎng)初期呈較快速性生長(zhǎng)(1～15d);生長(zhǎng)中期可見一平臺(tái)期(15～26d);但后期肝癌細(xì)胞及其上清液內(nèi)培養(yǎng)泡球蚴囊泡保持一個(gè)較穩(wěn)定囊泡數(shù)量,而其他結(jié)果則表現(xiàn)為逐漸減少。并對(duì)肝癌細(xì)胞上清液所培養(yǎng)的泡球蚴囊壁DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增出Em特異性200bp條帶。SDS-PAGE觀察體內(nèi)外培養(yǎng)囊液中蛋白在14、47-66kd處有相似條帶。結(jié)論:1)泡球蚴體外生長(zhǎng)因素可不依賴培養(yǎng)細(xì)胞本身;2)由于體外與動(dòng)物體內(nèi)的培養(yǎng)環(huán)境的不同,及不同的共培養(yǎng)細(xì)胞可能引起囊泡內(nèi)囊液的蛋白含量有所差異;3)泡球蚴在體外與肝癌細(xì)胞及其上清液的親和性與其它二種細(xì)胞略有不同;4)體內(nèi)、外培養(yǎng)的囊泡含有相似蛋白;5)利用肝癌細(xì)胞、大腸癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞及其上清液建立泡球蚴體外培養(yǎng)模型具有一定的可行性,但可能存在一定的差異性。
[Abstract]:Aim: to establish a stable culture model of alveolar cercariae in vitro by using liver cancer cell (Bel-7404), colorectal cancer cell (Caco-2) and cervical cancer cell line (Hela) and the culture medium of these three kinds of cells in vitro, and to observe the cell affinity, growth and development of alveolar cercaria in vitro. Methods: liver cancer cells (Bel-7404), colorectal cancer cells (Caco-2) and cervical cancer cells (Hela), were cultured. The tissue of Echinococcus follicularis was completely cultured with the above three kinds of cells and DMEM containing three kinds of cell culture respectively, based on the culture in 37 鈩，

本文編號(hào)：2504724