【摘要】： Toll樣受體作為一種重要的模式識別受體,能夠識別病源微生物的結(jié)構(gòu)組分和代謝產(chǎn)物。Toll樣受體信號的活化,在調(diào)動機體的免疫系統(tǒng)抗感染、抗腫瘤等過程中發(fā)揮了重要作用,但是也參與造成自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展。盡管TLRs配體臨床上作為免疫佐劑,已被廣泛用于多種腫瘤的免疫治療,但TLRs及其信號通路參與打破腫瘤免疫耐受的機制仍不是十分清楚。另一方面,作為機體最大的解毒器官,肝臟長期接觸來自腸道的病原體成分。而Toll樣受體及其下游信號與肝臟耐受自穩(wěn)平衡的打破,炎癥反應(yīng)的爆發(fā)以及炎癥所致的病理損傷有著密切關(guān)系,這其中的具體機制也有待進一步研究。本課題旨在利用小鼠模型進一步探討Toll樣受體及其信號通路活化后,在打破腫瘤免疫耐受和肝臟自穩(wěn)平衡方面的機制。本研究獲得的主要結(jié)果可以分成以下三部分: 1.TLR3配體poly I∶C誘導(dǎo)NK細(xì)胞亞群IKDC參與的抗腫瘤效應(yīng): TLR3激動劑poly I∶C作為有效的免疫佐劑被廣泛的用于腫瘤的免疫治療。在該研究中,通過給荷瘤小鼠腹腔注射poly I∶C,我們證實了poly I∶C處理可以明顯抑制B16黑色素瘤向肺臟和肝臟的轉(zhuǎn)移,并相應(yīng)延長荷瘤小鼠的生存時間。我們發(fā)現(xiàn)poly I∶C的這種抗腫瘤效應(yīng)是依賴于NK細(xì)胞和IFN-γ的。與PBS處理對照組相比,B220~+ CD11c~+ NK1.1~+細(xì)胞,即IKDCs在poly I∶C處理的荷瘤小鼠的脾臟、肝臟和肺臟中,比例和絕對數(shù)均有明顯上升。poly I∶C能在內(nèi)體誘導(dǎo)這群獨特的NK細(xì)胞亞群分泌IFN-γ,暗示它是這一模型中主要的抗瘤效應(yīng)細(xì)胞之一。我們還發(fā)現(xiàn),poly I∶C聯(lián)合B16細(xì)胞體外刺激脾臟、肺臟和肝臟來源的淋巴細(xì)胞,可以明顯誘導(dǎo)出IFN-γ的分泌和IKDCs的擴增。比較體外誘導(dǎo)的IKDCs(B220~+ CD11c~+ NK1.1~+)與普通NK細(xì)胞(B220~- CD11c~+ NK1.1~+)的細(xì)胞毒活性,發(fā)現(xiàn)雖然其活性稍弱,但同樣可以對靶細(xì)胞B16及YAC-1進行殺傷。本研究的結(jié)果揭示了IFN-γ及其主要來源之一的IKDC在poly I∶C誘導(dǎo)的抗腫瘤效應(yīng)中所發(fā)揮的重要作用,并為進一步研究這種獨特的NK細(xì)胞亞群提供了資料。 2.TLR3信號通路活化促進腫瘤細(xì)胞的凋亡: TLR3是機體識別病毒的雙鏈RNA啟動天然免疫的重要受體,以往認(rèn)為其主要表達于免疫細(xì)胞和一些內(nèi)皮細(xì)胞中。我們的研究主要探索了腫瘤細(xì)胞表達的TLR3及其促凋亡活性。我們發(fā)現(xiàn)TLR3在人和小鼠各種組織來源的腫瘤細(xì)胞中都有廣泛的表達。poly I∶C刺激人宮頸癌Hela細(xì)胞以及小鼠的結(jié)腸癌MCA38cells,可以導(dǎo)致這兩種細(xì)胞對化學(xué)藥物cycloheximide(CHX)所誘導(dǎo)的凋亡的敏感性。而這種促細(xì)胞亞凋亡的程度呈poly I∶C劑量依賴性。預(yù)先用抗體阻斷腫瘤細(xì)胞的TLR3,能使poly I∶C/CHX誘導(dǎo)的凋亡率降低,證實其是識別poly I∶C啟動凋亡信號的主要受體。此外,我們還發(fā)現(xiàn)poly I∶C/CHX可以誘導(dǎo)IFN-β的產(chǎn)生,用抗體中和IFN-β可以部分減輕poly I∶C/CHX誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的凋亡。我們的研究證明了腫瘤細(xì)胞表達的TLR3可以參與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞處于亞凋亡狀態(tài),為臨床用免疫佐劑poly I∶C與化療藥物聯(lián)合治療腫瘤提供了新思路。 3.TLR11配體profilin在D-GalN致敏小鼠中引發(fā)細(xì)胞因子介導(dǎo)的肝臟損傷:作為機體重要的生合器官,肝臟是多種寄生蟲最常侵犯的臟器之一。本研究旨在探討在肝臟高表達的寄生蟲profilin蛋白的模式識別受體TLR11及其信號通路的活化,參與肝臟抗寄生蟲感染的炎癥反應(yīng)及其所致?lián)p傷的可能機制。我們發(fā)現(xiàn),在D-GalN致敏小鼠中,profilin可以明顯引發(fā)肝臟的淋巴細(xì)胞浸潤和病理損傷。profilin/GalN處理組小鼠血清中細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-12水平都大幅上升,抗體中和這些細(xì)胞因子可以消除profilin/GalN引發(fā)的肝損傷。檢測TLR11分布的結(jié)果顯示其主要表達于肝臟的巨噬細(xì)胞和DCs上。而profilin/GalN處理組小鼠的肝臟和脾臟中,DC更加成熟,NK細(xì)胞比例和活化程度都有所上升。清除了Kupffer細(xì)胞和NK細(xì)胞后,也能很好的保護profilin/GalN所導(dǎo)致的肝損傷,暗示這些固有免疫細(xì)胞是致?lián)p傷細(xì)胞因子的主要來源。本研究首次初探了TLR11信號通路的活化對肝臟免疫系統(tǒng)的影響及其參與肝臟病理損傷的可能機制,為進一步研究肝臟寄生蟲病提供了新的資料。 綜上所述,我們的研究揭示了(1)在腫瘤微環(huán)境中,poly I∶C的刺激既可以使免疫細(xì)胞的TLR3信號通路的活化,也可以使腫瘤細(xì)胞中的TLR3通路活化。所以其抗腫瘤機制包括兩個方面:促使包括NK細(xì)胞亞群IKDCs在內(nèi)的免疫細(xì)胞的活化和增強腫瘤細(xì)胞對壓力的敏感性;(2)TLR11信號通路參與抗寄生蟲感染所致的肝臟病理損傷,機制包括引起寄生蟲感染過程中包括DCs、kupffer和NK細(xì)胞等多種固有免疫細(xì)胞的成熟和活化,以及TNF-α、IFN-γ和IL-12等細(xì)胞因子的分泌。本課題研究將有利于從細(xì)胞及分子水平上研究腫瘤免疫和肝臟自身免疫性肝損傷的機制,從而更好地為臨床治療和藥物開發(fā)提供理論依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R392;R730.5

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉季芳;劉楓;祁巖超;楊波;盧敏瑩;潘東曉;;免疫編輯前后細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平及細(xì)胞毒活性的比較[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2010年08期

2 廖書杰;王世宣;馬丁;;子宮頸癌疫苗制備的歷史及現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學(xué)(婦產(chǎn)科學(xué)分冊);2007年04期

3 沈亮;張輝;;子宮頸癌疫苗的研究進展[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2009年02期

4 程春來;艾立清;;干擾素聯(lián)合化療治療原發(fā)性肝癌50例療效分析[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2012年02期

5 朱鵬飛;于建武;劉偉;顏炳柱;孫麗杰;康鵬;趙勇華;;漢坦病毒通過線粒體途徑誘導(dǎo)Vero E6細(xì)胞凋亡[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年06期

6 李祥引;蔣波;趙晉湘;王文龍;鐘俊;;α-干擾素聯(lián)合5-氟尿嘧啶治療肝細(xì)胞癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的臨床研究[J];中外醫(yī)療;2010年26期

7 師雷鋒;高春芳;徐迪輝;王繼德;;腫瘤抑制基因XAF1啟動子序列中活性IRF-1作用元件的鑒定[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年04期

8 徐迪暉;王繼德;程天明;姜泊;楊洲;張宇生;;α干擾素對結(jié)腸癌細(xì)胞株lovo和sw1116中X染色體連鎖凋亡抑制相關(guān)因子1表達調(diào)節(jié)作用[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2007年12期

9 趙鑫;齊義新;趙丹娜;楊正梅;卜友泉;魏林;李全海;胡潔;;干擾素λ誘導(dǎo)人食管癌YES5和T.Tn細(xì)胞抗增殖機制的研究[J];軍事醫(yī)學(xué);2011年06期

10 申加英,楊萍,劉志梅;干擾素α對U937細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡及其作用機制探討[J];臨床血液學(xué)雜志;2005年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王鶴;HPV58mE6E7融合基因疫苗構(gòu)建及其免疫效果的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 戴文娟;機械性創(chuàng)傷誘發(fā)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡機制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 董立厚;新型HPV治療性疫苗抗腫瘤作用及機理研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

4 宋改環(huán);TRAIL及其受體在宮頸癌細(xì)胞凋亡中的作用[D];吉林大學(xué);2006年

5 劉穎;轉(zhuǎn)染mIFNγ的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠膠質(zhì)瘤的實驗研究[D];吉林大學(xué);2006年

6 張汝鋼;hTERT干擾對TRAIL誘導(dǎo)消化道腫瘤細(xì)胞凋亡的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

7 高德宗;γ-干擾素與他莫昔芬聯(lián)合抗乳腺癌作用及其機制的實驗研究[D];山東大學(xué);2006年

8 陳明泉;HBV DNA載量、Toll樣受體3的表達變化與慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞表型、功能的相關(guān)性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

9 王莉;β-谷甾醇對子宮頸癌細(xì)胞株SiHa的生長抑制作用及其機制探討[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

10 楊楊;DC固有膽堿能系統(tǒng)和LTB4-BLT2表達及其在JIA炎癥反應(yīng)中的作用研究[D];華中科技大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 謝正南;塞來昔布提高k562細(xì)胞對干擾素-α敏感性的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 王茜;調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞對CD8~+T細(xì)胞的負(fù)向調(diào)節(jié)作用[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2010年

3 林燕;腸源性內(nèi)毒素在ConA誘導(dǎo)的小鼠肝炎模型中的作用及機制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

4 達澤蛟;DDA為基礎(chǔ)的不同免疫佐劑對結(jié)核亞單位疫苗AMM免疫保護效果的影響[D];蘭州大學(xué);2011年

5 遲永輝;N-（1-苯乙基）-3-（2-呋喃基）丙烯酰胺對巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響[D];上海交通大學(xué);2011年

6 蘭琴;Tim-3表達于人外周血單個核細(xì)胞的多個細(xì)胞亞群且在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者Th1細(xì)胞表達升高[D];華中科技大學(xué);2009年

7 劉永良;IFN-αR及PCNA在顱咽管瘤中的表達與意義[D];青島大學(xué);2006年

8 匡玉吉;重組人Beta-干擾素的CHO表達和無血清細(xì)胞培養(yǎng)的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

9 張雷;干擾素-γ與三氧化二砷聯(lián)合對大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞株的體外研究[D];吉林大學(xué);2007年

10 胥瑜;腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體與順鉑和干擾素-α聯(lián)合應(yīng)用對人肝癌細(xì)胞株SMMC7721凋亡的影響及其機制的研究[D];四川大學(xué);2007年

，

本文編號：2460519