【摘要】： 研究背景與目的:高糖高脂血癥是臨床上十分常見的代謝疾病。以往有高脂血癥或高糖血癥對(duì)男性生殖功能影響的研究,認(rèn)為高脂或高糖血癥可能影響睪丸和附睪組織結(jié)構(gòu),損害精子發(fā)生,降低睪酮水平,引起生育力下降甚至不育。這些研究一方面多研究的是高脂或高糖血癥對(duì)男性生殖功能的影響,另一方面缺乏對(duì)睪丸內(nèi)各種細(xì)胞數(shù)量等的體視學(xué)定量研究,因此難以解釋高糖或高脂血癥對(duì)男性生殖功能影響的途徑或機(jī)理。為此,本文擬創(chuàng)建嚴(yán)重高血糖并高血脂大鼠模型,研究嚴(yán)重高糖高脂血癥對(duì)睪丸和附睪組織結(jié)構(gòu)的影響,尤其是采用體視學(xué)方法定量研究其對(duì)精子發(fā)生的影響。 材料和方法:56只正常雄性SD大鼠(10-11周齡),隨機(jī)分為對(duì)照組(n=12)和實(shí)驗(yàn)組(n=44)。對(duì)照組動(dòng)物腹腔內(nèi)注射賦形劑;實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素(STZ,60mg/kg體重),1周后同時(shí)喂以高脂飼料。STZ注射40天后實(shí)驗(yàn)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)期間測(cè)量4次空腹血糖,實(shí)驗(yàn)?zāi)y(cè)量空腹血脂水平。實(shí)驗(yàn)?zāi)?對(duì)照組死亡2只動(dòng)物,從余下的10只動(dòng)物中隨機(jī)抽選6只用于研究;實(shí)驗(yàn)組有8只動(dòng)物未致高血糖,28只高血糖動(dòng)物已相繼死亡,余下的8只高血糖動(dòng)物用于研究。 取睪丸、附睪用Bouin液浸潤(rùn)固定,切取組織塊用甲基丙烯酸樹脂包埋,切25μm厚的切片。睪丸切片用PAS加蘇木精染色,附睪切片僅用蘇木精染色。光鏡下觀察睪丸和附睪的組織結(jié)構(gòu)。用點(diǎn)計(jì)數(shù)等體視學(xué)方法估計(jì)睪丸或附睪內(nèi)各種結(jié)構(gòu)的體積以及睪丸內(nèi)生精小管的直徑,并用體視學(xué)新技術(shù)——光學(xué)體視框估計(jì)睪丸內(nèi)各種細(xì)胞以及附睪內(nèi)精子的數(shù)量。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)期間對(duì)照組6只動(dòng)物的血糖范圍為4.2-6.5 mmol/L,實(shí)驗(yàn)組8只動(dòng)物的血糖都大于14.3 mmol/L。實(shí)驗(yàn)?zāi)⿲?shí)驗(yàn)組的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL)分別超過(guò)對(duì)照組的14、10和4倍。 實(shí)驗(yàn)組睪丸和附睪的總體積較正常對(duì)照組顯著(P0.05,t檢驗(yàn))減少了22%和43%。光鏡下定性觀察,可見實(shí)驗(yàn)組的部分生精小管內(nèi)有晚期的長(zhǎng)形精子細(xì)胞滯留,其它形態(tài)學(xué)改變不明顯;附睪的形態(tài)改變也不明顯。睪丸的形態(tài)定量研究顯示,實(shí)驗(yàn)組睪丸內(nèi)生精小管的平均直徑以及生精小管及間質(zhì)的總體積,與對(duì)照組相比分別減少了14%、19%、28%;除細(xì)線前期精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞、中期精子細(xì)胞、晚期長(zhǎng)形精子細(xì)胞、Sertoli細(xì)胞和血管腔內(nèi)白細(xì)胞,睪丸以下各種細(xì)胞的數(shù)量也顯著減少:A型精原細(xì)胞(與對(duì)照組相比顯著減少27%)、B型精原細(xì)胞(33%)、細(xì)線期和偶線期精母細(xì)胞(22%),粗線期精母細(xì)(24%)、肌樣細(xì)胞(35%)和Leydig細(xì)胞(32%);附睪形態(tài)定量研究顯示,實(shí)驗(yàn)組附睪內(nèi)附睪管、間質(zhì)和精子團(tuán)的總體積較對(duì)照組分別顯著減少50%,40%和61%,附睪內(nèi)的精子總數(shù)顯著減少60%。 結(jié)論:短期(6周內(nèi))高糖高脂血癥沒(méi)有嚴(yán)重?fù)p害睪丸內(nèi)的精子發(fā)生,精子發(fā)生仍在進(jìn)行,但生精細(xì)胞和Leydig細(xì)胞數(shù)量減少20%-30%,精子釋放明顯障礙,由此導(dǎo)致附睪內(nèi)精子大量減少。生精細(xì)胞減少可能主要是因?yàn)閲?yán)重代謝障礙所致生精細(xì)胞增殖減緩或障礙,精子釋放障礙可能主要與嚴(yán)重代謝障礙可能導(dǎo)致的睪丸液(Sertoli細(xì)胞分泌的液體,精子運(yùn)輸?shù)妮d體)減少和肌樣細(xì)胞(精子運(yùn)輸?shù)膭?dòng)力源)收縮減弱有關(guān)。Leydig細(xì)胞的數(shù)量減少甚至分泌(睪酮)功能減弱,可能不是高糖高脂血癥損害精子發(fā)生的主要因素。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R363

【引證文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2412092