【摘要】：研究目的： 探究激素刺激下,單核細(xì)胞所釋放的膜微粒和組織因子(TF)陽性膜微粒的數(shù)量、促凝血功能。組織因子的表達(dá)和作用,以及激素對單核細(xì)胞內(nèi)組織因子表達(dá)的影響。內(nèi)毒素對單核細(xì)胞的作用是否能被激素促進(jìn)或者抑制。 研究方法： 選用人單核細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系THP-1為研究對象。用地塞米松0.1mM、0.01mM、0.001mM三種不同濃度分別刺激4h、12h、24h后,用流式細(xì)胞儀檢測上清液中組織因子陽性膜微粒和總膜微粒的數(shù)量,以及TF陽性膜微粒所占比例。用一期法凝血時間測定細(xì)胞上清液的促凝血活性。用CD14抗體捕獲膜微粒,測定膜微粒相關(guān)的組織因子活性。用熒光實(shí)時定量PCR測定細(xì)胞中組織因子的mRNA水平。研究結(jié)果： 除4h-0.001mM組外,激素刺激組釋放的TF陽性膜微粒數(shù)量比基礎(chǔ)值高出1.5-3倍,總膜微粒高出基礎(chǔ)值1.3-2.5倍。地塞米松的劑量與TF陽性膜微粒數(shù)量正相關(guān)(r=0.673,p0.001),與總膜微粒數(shù)量正相關(guān)(r=0.804,p=0.001)。激素對LPS刺激THP-1細(xì)胞釋放TF陽性膜微粒沒有促進(jìn)作用。地塞米松刺激THP-1細(xì)胞后釋放的TF陽性膜微粒表面的TF具有活性。 地塞米松刺激THP-1細(xì)胞的上清液的凝血時間比陰性對照縮短(p0.05),4h組和24h組的凝血時間與同一樣本的上清液中TF陽性膜微粒數(shù)量負(fù)相關(guān)(4h r=-0.762p=0.028；12h r=-0.833p=0.010).地塞米松刺激4h時顯著減少了TF-mRNA的水平(p0.01),0.01mM濃度在12h和24h刺激時間能增加TF-mRNA (p0.01)。TF-mRNA水平與凝血時間沒有相關(guān)性。 結(jié)論： 地塞米松刺激THP-1細(xì)胞釋放高于基礎(chǔ)量的TF陽性膜微粒,這些膜微粒具有TF活性,其數(shù)量與地塞米松劑量正相關(guān),與促凝血作用強(qiáng)度存在一定的相關(guān)性。地塞米松的這種作用不是來源于轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控。
[Abstract]:Aim: to investigate the number of membrane particles and tissue factor (TF) positive membrane particles released by monocytes stimulated by hormones, and to investigate the coagulation function. The expression and function of tissue factor and the effect of hormone on the expression of tissue factor in monocytes. Whether the action of endotoxin on monocytes can be promoted or inhibited by hormones. Methods: human monocyte tumor cell line THP-1 was selected as the research object. Three different concentrations of dexamethasone 0.1 mMN 0.01mMN 0.001mm were used to stimulate 4 h and 12 h respectively for 24 h. Flow cytometry was used to detect the number of tissue factor positive membrane particles and the total membrane particles in the supernatant and the proportion of TF positive membrane particles in the supernatant. The procoagulant activity of supernatant was measured by one-stage coagulation time. CD14 antibody was used to capture the membrane particles and the tissue factor activity related to the membrane particles was determined. The mRNA level of tissue factor in cells was measured by fluorescence real-time quantitative PCR. Results: except for 4h-0.001mM group, the number of TF positive membrane particles released by hormone stimulation group was 1.5-3 times higher than the base value, and the total membrane particles was 1.3-2.5 times higher than the base value. The dose of dexamethasone was positively correlated with the number of TF positive membrane particles (r = 0.673, p0.001), and with the number of total membrane particles (r = 0.804, p0. 001). Hormones did not promote the release of TF positive membrane particles from THP-1 cells stimulated by LPS. TF on the surface of TF positive membrane particles released by dexamethasone stimulated THP-1 cells was active. The coagulation time of the supernatant stimulated by dexamethasone in THP-1 cells was significantly shorter than that in the negative control group (p0.05) and the coagulation time was negatively correlated with the number of TF positive membrane particles in the supernatant of the same sample (4h r-0.762pt0. 028 h r=-0.833p=0.010). Dexamethasone significantly decreased the level of TF-mRNA (p0.01) 0.01 mm at 12 h and 24 h after stimulation, and increased the level of TF-mRNA (p0.01). TF-mRNA was not correlated with coagulation time. Conclusion: Dexamethasone stimulated THP-1 cells to release more TF positive membrane particles than the basic amount. These membrane particles have TF activity. The number of these particles is positively correlated with the dose of dexamethasone and has a certain correlation with the blood coagulation intensity. This effect of dexamethasone is not derived from the regulation of transcriptional levels.
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R363

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李鴻帥;張長青;;股骨頭壞死動物模型研究進(jìn)展[J];國際骨科學(xué)雜志;2006年03期

2 關(guān)俊杰;張長青;;股骨頭壞死動物模型研究進(jìn)展[J];國際骨科學(xué)雜志;2012年01期

3 尹晴;屠偉峰;馬亞平;聶濤;;依替巴肽用于急性冠脈綜合征經(jīng)皮冠脈介入治療的療效和安全性[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年15期

4 Ryan E.Tomlinson;Matthew J.Silva;;Skeletal Blood Flow in Bone Repair and Maintenance[J];Bone Research;2013年04期

5 馬坤;顧建平;蘇浩波;樓文勝;何旭;陳亮;陳國平;毛存南;宋進(jìn)華;汪濤;;介入法犬股骨頭壞死模型制作[J];介入放射學(xué)雜志;2009年06期

6 牛敬才;尚希福;孔榮;黃炎;姚剛;;一種新型的股骨頭壞死動物模型[J];中國臨床保健雜志;2006年02期

7 王峻;牛金亮;;骨壞死的發(fā)病機(jī)制及影像學(xué)表現(xiàn)[J];山西醫(yī)藥雜志;2010年05期

8 田琨;童培建;肖魯偉;;激素性股骨頭缺血性壞死動物模型研究進(jìn)展[J];江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年01期

9 崔燎,陳槐卿;心血管藥物與骨質(zhì)疏松[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2004年04期

10 李立東;白俊清;;創(chuàng)傷性股骨頭壞死的研究進(jìn)展[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李雄;生脈成骨膠囊促進(jìn)壞死股骨頭內(nèi)血管再生的機(jī)理研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2002年

2 崔燎;丹參水提取物（DS）和丹參素（DSU）對實(shí)驗(yàn)性糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松的作用及機(jī)制研究[D];四川大學(xué);2004年

3 牛金亮;股骨骨髓的MRI研究[D];華中科技大學(xué);2006年

4 李德魁;中藥配合髓芯減壓術(shù)治療激素性股骨頭壞死的臨床及實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2008年

5 雷新瑋;非創(chuàng)傷性股骨頭缺血性壞死塌陷預(yù)測的生物力學(xué)及影像學(xué)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

6 周密;肝細(xì)胞生長因子修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療兔股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2009年

7 李顯澎;生脈成骨膠囊配合髖外展支架治療兒童股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)與臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

8 迮仁浩;VEGF轉(zhuǎn)染MSCs結(jié)合PLA/HA多孔支架治療兔早期股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2010年

9 孔祥騫;高遷移率族蛋白B1（HMGB1）與血栓閉塞性脈管炎的相關(guān)性及HMGB1 A Box對其保護(hù)機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2013年

10 張磊;DMOG對鼠BMSCs凋亡與成骨分化影響及在兔激素性股骨頭壞死修復(fù)中作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 馬坤;介入法犬股骨頭壞死模型制作研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

2 楊立峰;股骨頭內(nèi)撐器的三維有限元分析[D];南華大學(xué);2011年

3 劉德寶;聯(lián)合應(yīng)用普羅布考、阿司匹林預(yù)防兔激素性股骨頭缺血性壞死的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

4 牛敬才;一種新型的股骨頭壞死動物模型[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

5 劉國柱;改良式液氮冷凍法制備犬股骨頭壞死動物模型的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

6 朱明;糖皮質(zhì)激素受體在Perthes病股骨頭軟骨及髖關(guān)節(jié)滑膜中的表達(dá)及意義[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2009年

7 鄭文錦;辛伐他汀對激素性股骨頭壞死兔的脂代謝影響[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2010年

8 王俊鋒;股骨頭韌帶結(jié)扎誘發(fā)家兔股骨頭結(jié)構(gòu)變化的形態(tài)學(xué)觀察[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

9 陳玉林;高糖刺激足細(xì)胞產(chǎn)生微囊泡及其機(jī)制的初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

，

本文編號：2206413