【摘要】： 目的:研究氯化鈷、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)對巨噬細胞缺氧誘導因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)與轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor -β1,TGF-β1)表達的影響及機制。 方法:將巨噬細胞RAW264.7分為LPS(1μg/ml)刺激組、CoCl2(100μmol/L)刺激組、CoCl2作用(100μmol/L)后LPS(1μg/ml)刺激組、正常對照組(給予等量PBS)。采用RT-PCR法檢測各組HIF-1α、VEGF和TGF-β1 mRNA的表達水平,免疫細胞化學染色檢測各組HIF-1α、VEGF和TGF-β1蛋白的表達水平。 結(jié)果: (1)與正常對照組細胞相比,CoCl2組及CoCl2作用后LPS刺激組細胞HIF-1αmRNA表達水平增加(P0.05),LPS刺激組、CoCl2組、CoCl2作用后LPS刺激組細胞VEGF mRNA及蛋白、HIF-1α蛋白表達水平均增加(P0.05);與LPS刺激組比較,CoCl2組細胞HIF-1αmRNA表達水平增加(P0.05),CoCl2作用后LPS刺激組細胞HIF-1α、VEGF的mRNA與蛋白表達水平增加(P0.05);與CoCl2組比較,CoCl2作用后LPS刺激組細胞VEGF mRNA及蛋白、HIF-1α蛋白表達水平增加(P0.05)。(2)與正常對照組細胞比較,LPS刺激組細胞TGF-β1 mRNA與蛋白表達水平均減少(P0.05),CoCl2組細胞TGF-β1 mRNA與蛋白表達水平均增加(P0.05),而CoCl2作用后LPS刺激組細胞TGF-β1 mRNA與蛋白表達水平未見明顯改變(P0.05)。 結(jié)論:常氧條件下,LPS可在轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)巨噬細胞TGF-β1的表達; CoCl2誘導的低氧條件可使巨噬細胞HIF-1α、VEGF及TGF-β1 mRNA與蛋白的表達水平均增加,低氧誘導合并LPS刺激可使巨噬細胞表達HIF-1α及VEGF的mRNA與蛋白的水平均顯著增加,而TGF-β1的表達水平無明顯變化。提示巨噬細胞在常氧與低氧環(huán)境下對LPS刺激的反應(yīng)存在一定的差異,這種差異可能影響相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:AIM: To study the effects of cobalt chloride and lipopolysaccharide (LPS) on the expression of hypoxia inducible factor-1 alpha (HIF-1 alpha) and transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) in macrophages.
METHODS: Macrophages RAW264.7 were divided into LPS (1 ug/ml) stimulation group, CoCl 2 (100 ugol/L) stimulation group, LPS (1 ug/ml) stimulation group after CoCl 2 (100 ugol/L) stimulation, and normal control group (given the same amount of PBS). The expression level of white.
Results: (1) Compared with the normal control group, the expression of HIF-1 alpha mRNA increased (P 0.05) in LPS-stimulated group, LPS-stimulated group, CoCl2-stimulated group, and LPS-stimulated group (P 0.05), and the expression of VEGF mRNA and protein, HIF-1 alpha protein in LPS-stimulated group increased (P 0.05). In addition (P 0.05), the expression levels of HIF-1a, VEGF mRNA and protein in LPS-stimulated cells were increased (P 0.05) and that in LPS-stimulated cells were increased (P 0.05). Compared with CoCl2 group, the expression levels of VEGF mRNA and protein and HIF-1a protein in LPS-stimulated cells were increased (P 0.05). (2) Compared with normal control cells, the expression levels of TGF-beta 1 mRNA and protein in LPS-stimulated cells were decreased. (P 0.05), the expression of TGF-beta 1 mRNA and protein increased in CoCl2 group (P 0.05), but the expression of TGF-beta 1 mRNA and protein did not change significantly in LPS-stimulated group (P 0.05).
CONCLUSION: LPS can down-regulate the expression of TGF-beta 1 in macrophages at transcriptional level under normoxic conditions; CoCl2-induced hypoxia can increase the expression levels of HIF-1a, VEGF and TGF-beta 1 mRNA and protein in macrophages. Hypoxia-induced combined with LPS stimulation can significantly increase the expression levels of HIF-1a and VEGF mRNA and protein in macrophages, while TGF-beta can increase significantly. There was no significant change in the expression of beta-1, suggesting that there was a certain difference in the response of macrophages to LPS stimulation in normoxic and hypoxic environments, which may affect the occurrence and development of related diseases.
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R364.5

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本文編號：2181606