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乳鼠心肌細胞和心肌成纖維細胞體外分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化

發(fā)布時間:2018-07-24 15:40
【摘要】:目的優(yōu)化SD乳鼠心肌細胞和心肌成纖維細胞的體外分離培養(yǎng)的條件和方法。方法分別用胰酶、Ⅱ型膠原酶依次消化分離心肌組織,再通過兩次差速貼壁分離法分別收集、培養(yǎng)乳鼠心肌細胞和心肌成纖維細胞。光學顯微鏡下分別觀察心肌細胞和心肌成纖維細胞的基本形態(tài)特征的變化,原代心肌細胞行心肌肌鈣蛋白免疫熒光鑒定,而心肌成纖維細胞則用第2代行波形蛋白免疫熒光鑒定。結果心肌細胞在2~4 h開始貼壁生長,12~24 h貼壁速率大幅增加,并出現(xiàn)自發(fā)性搏動,48~72 h心肌細胞粘合成簇,細胞成活率,純度均達95%以上;心肌成纖維細胞第2~4代細胞生長良好,純度高達98%以上。結論此種方法可得到產(chǎn)量大,純度高,活力好的心肌細胞和心肌成纖維細胞,為心血管疾病的基礎與臨床研究提供了理想的實驗模型。
[Abstract]:Objective to optimize the conditions and methods of isolation and culture of neonatal SD rat cardiomyocytes and cardiac fibroblasts in vitro. Methods Myocardial tissues were digested and separated by trypsin and collagenase 鈪,

本文編號:2141851

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