本文選題：內(nèi)源性危險信號 + 佐劑��； 參考：《中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】： 感染性疾病如HBV,HCV,HIV以及腫瘤是全球波及范圍最廣,受染人群最多,嚴(yán)重危害人類健康的重要疾病。預(yù)防和治療感染性疾病及腫瘤最有效且最經(jīng)濟的手段是接種疫苗。疫苗包括在預(yù)防性疫苗和治療性疫苗。目前研究的基因工程疫苗,亞單位疫苗,合成肽抗原疫苗其主要問題為免疫原性差,且疫苗提呈的靶向性差。這就需要給疫苗特別是治療性疫苗添加佐劑以增強疫苗抗原的特異性體液免疫應(yīng)答和CTL(cytotoxic T lymphocyte)細(xì)胞免疫應(yīng)答,從而起到既預(yù)防又治療病毒感染、腫瘤性疾病的作用。疫苗佐劑能夠選擇性的刺激免疫應(yīng)答而提高免疫效果。但是目前大多數(shù)疫苗佐劑只能誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答,而產(chǎn)生的細(xì)胞免疫效應(yīng)較弱甚至沒有。因此,迫切需要開發(fā)新型人用疫苗佐劑,使其能夠有效提高抗原免疫原性,且通過交叉遞呈途徑將外源性抗原加工處理增強細(xì)胞免疫應(yīng)答。 為了更好地解釋免疫識別機制,Polly Matzinger于1994年提出危險信號模式理論,在該模式中,免疫系統(tǒng)的功能是參與識別危險信號分子與非危險信號分子。細(xì)胞損傷釋放的危險信號分子可以激活抗原呈遞細(xì)胞(Antigen Presenting Cells,APCs)進而有效的激活T/B細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答。這也就表明受損細(xì)胞釋放的危險信號分子具有潛在的免疫佐劑效應(yīng)。內(nèi)源性危險信號具有交叉遞呈抗原,誘導(dǎo)細(xì)胞免疫的特性,提示內(nèi)源性危險信號可作為治療性疫苗佐劑誘導(dǎo)特異性的細(xì)胞免疫應(yīng)答。 本研究首次選用內(nèi)源性危險信號—細(xì)胞外基質(zhì)降解產(chǎn)物低分子量透明質(zhì)酸作為新型疫苗佐劑,低分子量透明質(zhì)酸是指分子量為＜10~6;分別與HAV抗原和HBV抗原混合后免疫ICR小鼠;并設(shè)HAV,HBV單獨抗原免疫組和Al(OH)_3佐劑組為對照組。經(jīng)ELISA法和LDH法分別檢測抗HAV-IgG,抗HBV-IgG抗體滴度和CTL細(xì)胞免疫效應(yīng),得到不同時間的抗HAV-IgG,抗HBV-IgG的抗體滴度和CTL細(xì)胞殺傷活性。此外,我們還選用了2.0mg低分子量透明質(zhì)酸+HBV抗原免疫組并設(shè)鋁佐劑為對照組,在免疫后第七天采血檢測抗-HBV抗體滴度,其特異性抗HBV IgG水平分別為1:30.84±1.43,而常規(guī)鋁佐劑組為1:9.46±3.99兩者相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。本研究初步獲得內(nèi)源性危險信號分子低分子量透明質(zhì)酸能顯著增強HAV抗原和HBV抗原的抗體水平及HBV抗原的CTL細(xì)胞免疫效應(yīng)的結(jié)果。并證實內(nèi)源性危險信號分子低分子量透明質(zhì)酸產(chǎn)生的抗HAV IgG和抗HBV IgG的抗體水平顯著高于鋁佐劑組(P＜0.05)。此外低分子量透明質(zhì)酸產(chǎn)生的抗體水平比鋁佐劑要早。 此外,我們用低分子量透明質(zhì)酸制備成納米微球,并包被HBV抗原免疫ICR小鼠。初步探索了其免疫增強效應(yīng),結(jié)果發(fā)現(xiàn)與非納米微球?qū)嶒灲M及常規(guī)鋁佐劑組相比,低分子量透明質(zhì)酸納米微球顯著增強抗HBV-IgG的水平(P＜0.05)。 我們在佐劑的安全試驗中還發(fā)現(xiàn),常規(guī)鋁佐劑組的小鼠出現(xiàn)毛發(fā)脫落,病理結(jié)果顯示,腦實質(zhì)有一小膠質(zhì)細(xì)胞小結(jié),提示鋁佐劑有可能對于神經(jīng)系統(tǒng)有損傷,肝腎未見異常;而低分子量透明質(zhì)酸實驗組和包被有HBsAg的低分子量透明質(zhì)酸納米微球?qū)嶒灲M的毒性實驗和過敏反應(yīng)實驗中均未觀察到異常反應(yīng)。肝、腦、腎病理結(jié)果均未見異常。這就提示:低分子量透明質(zhì)酸安全無毒,可適合應(yīng)有于人。 總之,本實驗中,我們發(fā)現(xiàn)低分子量透明質(zhì)酸作為免疫佐劑,既能有效增強特異性體液免疫應(yīng)答,又能顯著誘導(dǎo)CTL細(xì)胞免疫效應(yīng);另外,用其制備的納米微球也能顯著誘導(dǎo)產(chǎn)生強的免疫效應(yīng)。
[Abstract]:Infectious diseases such as HBV, HCV, HIV and tumor are the world's most widespread, most infected people, important diseases that seriously harm human health. Vaccination is the most effective and economical means to prevent and treat infectious diseases and tumors. Vaccines include preventive vaccines and therapeutic vaccines. The main problem of the unit vaccine, the main problem of the synthetic peptide antigen vaccine is the poor immunogenicity and the poor targeting of the vaccine. It is necessary to add adjuvant to the vaccine, especially the therapeutic vaccine, to enhance the specific humoral immune response of the vaccine antigen and the immune response of the CTL (cytotoxic T lymphocyte) cells, thus preventing and treating the virus infection, The vaccine adjuvant can selectively stimulate the immune response and improve the immune response. But most of the vaccine adjuvant can only induce the humoral immune response, and the cell immune effect is weak or not. Therefore, it is urgent to develop a new human vaccine adjuvant, so that it can effectively improve the antigen immunogen. In addition, the processing of exogenous antigens enhanced the cellular immune response through cross presentation.
In order to better explain the immune recognition mechanism, Polly Matzinger proposed the dangerous signal model theory in 1994, in which the function of the immune system is to identify the dangerous signal molecules and non dangerous signal molecules. The dangerous signal molecules of the release of cell damage can activate the Antigen Presenting Cells (APCs). Effective activation of T/B cells to produce a corresponding immune response. This also indicates that the dangerous signal molecules released by the damaged cells have a potential immune adjuvant effect. Endogenous risk signals have cross presenting antigen, inducing the characteristics of cellular immunity, suggesting that endogenous risk signals can be used as a therapeutic vaccine adjuvant to induce specific cellular immunity. A pestilence response.
This study first selected endogenous risk signals - low molecular weight hyaluronic acid from extracellular matrix degradation products as a new vaccine adjuvant. Low molecular weight hyaluronic acid was the molecular weight of < 10~6; ICR mice were immunized with HAV antigen and HBV antigen respectively, and HAV, HBV independent antigen immunization group and Al (OH) _3 adjuvant group as control group. SA and LDH methods were used to detect anti HAV-IgG, anti HBV-IgG antibody titer and CTL cell immune effect, and to obtain anti HAV-IgG, anti HBV-IgG antibody titer and CTL cell killing activity at different time. Besides, we also selected 2.0mg low molecular weight hyaluronic acid +HBV antigen immunization group and set aluminum adjuvant as control group. Blood samples were collected seventh days after immunization. The level of anti -HBV antibody titer, its specific anti HBV IgG level was 1:30.84 + 1.43, while the conventional aluminum adjuvant group was 1:9.46 + 3.99 (P < 0.05). This study preliminarily obtained the low molecular weight hyaluronic acid of endogenous risk molecules can significantly enhance the antibody level of HAV antigenic and HBV antigen and the CTL fine of HBV antigen. The results of cellular immune effect showed that the level of anti HAV IgG and anti HBV IgG produced by the low molecular weight hyaluronic acid of endogenous risk molecules was significantly higher than that of the aluminum adjuvant group (P < 0.05).
In addition, we prepared nanospheres with low molecular weight hyaluronic acid and immunized ICR mice with HBV antigen. The immune enhancement effect was preliminarily explored. The results showed that the low molecular weight hyaluronic acid nanospheres significantly increased the level of anti HBV-IgG (P < 0.05) compared with the non nanospheres experimental group and the conventional aluminum adjuvant group.
In the safety test of adjuvant, we also found that the mice in the routine aluminum adjuvant group appeared hair loss. The pathological results showed that there was a microglial nodule in the brain parenchyma, suggesting that the aluminum adjuvant might have damage to the nervous system and the liver and kidney were not abnormal, while the low molecular weight hyaluronic acid experimental group and the package were HBsAg with low molecular weight hyaluronic acid. The abnormal reaction was not observed in both the toxicity test and the allergic reaction test in the experimental group. The pathological results of liver, brain and kidney were not abnormal. This suggests that low molecular weight hyaluronic acid is safe and nontoxic, and it can be suitable for people.
In this experiment, we found that the low molecular weight hyaluronic acid, as an immune adjuvant, can not only enhance the specific humoral immune response, but also significantly induce the immune effect of CTL cells. In addition, the nanospheres prepared by it can also significantly induce strong immune effects.

【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王亞麗;王振華;曾憲垠;;疫苗佐劑胞嘧啶-鳥嘌呤寡脫氧核苷酸的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2011年06期

2 陳鰲;余云舟;王文斌;龐曉斌;王雙;俞煒源;孫志偉;;不同佐劑條件下Aβ多肽B細(xì)胞表位疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體的免疫反應(yīng)特性分析[J];中國生物工程雜志;2011年08期

3 覃明;王宜峰;孫萬邦;杜聯(lián)峰;徐崗村;羅軍敏;姚新生;;空腸彎曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A誘導(dǎo)的T細(xì)胞活化增殖研究[J];免疫學(xué)雜志;2011年10期

4 張立霞;于在江;周劍芳;舒躍龍;;流感病毒樣顆粒疫苗研究進展[J];病毒學(xué)報;2011年04期

5 趙莉;張壯志;石保新;古努爾·吐爾遜;米曉云;吐爾洪·依米提;王進成;馬正海;張文寶;;監(jiān)測重組蛋白EgM9免疫犬的特異性抗體變化[J];新疆農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年06期

6 黃金貴;李運娜;宮鵬濤;楊舉;李赫;李淑紅;張國才;張西臣;李建華;;弓形蟲親環(huán)蛋白亞單位疫苗的免疫保護性研究[J];中國病原生物學(xué)雜志;2011年07期

7 蘭天;;味精味道好,使用要得當(dāng)[J];食品與健康;2002年11期

8 雷寧;張遠(yuǎn);肖海波;曾慶樂;;鄰苯二甲醛(OPA)法檢測鋁吸附疫苗中抗原含量[J];中國生物工程雜志;2011年07期

9 羅四維;周秦;;血吸蟲疫苗的研究進展[J];微量元素與健康研究;2011年04期

10 王捷;尉杰忠;郭敏芳;紀(jì)寧;孫永勝;梁麗云;馬存根;;他汀類藥物對EAE小鼠RhoA表達(dá)的影響[J];中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2010年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 樂敏;陳煥春;;免疫佐劑-疫苗研究新亮點[A];全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

2 頓燦;孫招金;薛素強;李敏;王玉;謝運冰;張婧;張東霞;黃永亮;郭霄峰;;新型佐劑狂犬病滅活疫苗的研制[A];2010全國狂犬病防控高層論壇論文集[C];2010年

3 頓燦;孫招金;范靜文;薛素強;李敏;王玉;謝運冰;張婧;張東霞;黃永亮;郭霄峰;;新型佐劑狂犬病滅活疫苗的研制[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會第二次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

4 頓燦;孫招金;薛素強;李敏;王玉;謝運冰;張婧;張東霞;黃永亮;郭霄峰;;新型佐劑狂犬病滅活疫苗的研制[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會生物制品學(xué)分會中國微生物學(xué)會獸醫(yī)微生物學(xué)專業(yè)委員會2010年學(xué)術(shù)年會（第三屆中國獸藥大會學(xué)術(shù)論壇）論文集[C];2010年

5 楊忠東;王石磊;許文婷;李冬梅;;禽流感H5N1滅活疫苗與不同納米化佐劑聯(lián)合免疫研究[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2011年

6 ;《新型脂質(zhì)體復(fù)合物佐劑(DLDC)》項目簡介[A];新型疫苗研發(fā)及基因工程疫苗應(yīng)用研討會論文集[C];2010年

7 楊晨濤;馬翠卿;張玲;楊建嶺;馮惠東;魏林;;IL-27作為佐劑對A族鏈球菌免疫效應(yīng)的影響[A];河北省免疫學(xué)會第六次免疫學(xué)大會資料匯編[C];2010年

8 陳賀;簡紀(jì)常;魯義善;黃郁蔥;王蓓;;無乳鏈球菌滅活疫苗對羅非魚免疫效果的研究[A];漁業(yè)科技創(chuàng)新與發(fā)展方式轉(zhuǎn)變——2011年中國水產(chǎn)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2011年

9 岳華;魏煒;岳占國;呂丕平;王連艷;馬光輝;蘇志國;;納微球粒徑大小對免疫學(xué)效應(yīng)的影響[A];生物顆粒與粉體制備、應(yīng)用技術(shù)研討會論文集[C];2010年

10 J.Aucouturier;V.Ganne;A.Laval;;用于豬病疫苗的佐劑[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集（下）[C];2003年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 北京獸藥研究所 蔣桃珍;脂質(zhì)體佐劑的應(yīng)用前景[N];中國畜牧水產(chǎn)報;2000年

2 沈蘭;佐劑：疫苗的“加速器”[N];健康報;2007年

3 趙瑩;成大生物成功開發(fā)無佐劑狂犬疫苗[N];中國醫(yī)藥報;2005年

4 記者 李彬;我國生產(chǎn)出無佐劑人用狂犬病疫[N];科技日報;2005年

5 記者 陳云芬;云南沃森公司獲863計劃課題資助[N];云南日報;2006年

6 記者　施曉慧;英研制出人用高效低劑量禽流感疫苗[N];人民日報;2006年

7 河北遠(yuǎn)征藥業(yè) 秦建華;豬細(xì)小病毒病診斷與預(yù)防[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2006年

8 殷澤;疫苗危情下的利潤方程式[N];經(jīng)濟視點報;2007年

9 特約記者 李政;狂犬疫苗全國告急 近期難緩解[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2007年

10 方劍春;企業(yè)涉足疫苗生產(chǎn)須三思而行[N];中國醫(yī)藥報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 任繼玲;動物特異性CpG ODN的設(shè)計、篩選及對疫苗的增效作用[D];吉林大學(xué);2010年

2 許道軍;弗氏佐劑和Al(OH)_3佐劑對小鼠脾臟Tregs及CD4~+T細(xì)胞相關(guān)基因的影響研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 劉野;新型納米材料佐劑和新型免疫原改造策略在HIV DNA疫苗研究中的應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

4 周向陽;新型熱休克蛋白HSP-DC激活樹突狀細(xì)胞及其佐劑效應(yīng)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 金昕曄;脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白疫苗預(yù)防高脂喂養(yǎng)小鼠胰島素抵抗及動脈粥樣硬化的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

6 吳庭才;豫西地區(qū)IBD流行毒株不同佐劑滅活苗的研制及應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

7 靳彥文;核酸疫苗的基因佐劑研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

8 鄭燕;優(yōu)化密碼沙眼衣原體主要外膜蛋白DNA疫苗免疫效果的研究[D];山東大學(xué);2007年

9 吳國華;豬繁殖與呼吸綜合征病毒分子診斷與分子疫苗研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2009年

10 宋毓民;SW-BSA人工合成抗原疫苗的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 侯娟;Th17/Treg失衡在EAE小鼠模型免疫學(xué)發(fā)病機制中的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

2 楊超;一種新的基因工程免疫增強因子（ICEM）及其功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 劉開云;幽門螺桿菌治療性疫苗的動物實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 謝成彬;雙歧桿菌完整肽聚糖對重組乙肝表面抗原佐劑效應(yīng)的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

5 張術(shù);偽狂犬病核酸疫苗及其佐劑的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 張俊才;不同佐劑對卡介苗的特異性體液免疫與非特異性細(xì)胞免疫的免疫增強作用的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

7 曾巖;雞γ-干擾素基因克隆、表達(dá)及對禽流感滅活苗的免疫增強作用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 張水華;脂質(zhì)體流感亞單位疫苗的研究[D];上海交通大學(xué);2009年

9 張鋒鋼;豬肺炎支原體的分離及蜂膠佐劑滅活苗研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

10 秦衛(wèi)兵;CpG ODN對免疫力低下小鼠及人臍血淋巴細(xì)胞的免疫刺激作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2003年

，

本文編號：1897035