本文選題：線粒體自噬受體Bnip + 載體構(gòu)建��； 參考：《生物技術(shù)》2015年04期

【摘要】：[目的]獲得可用于蛋白晶體篩選的高純度Bnip3蛋白。[方法]將Bnip3截?cái)嗷驑?gòu)建到原核表達(dá)載體上并轉(zhuǎn)化大腸桿菌。IPTG誘導(dǎo)表達(dá)后通過GST柱純化目標(biāo)蛋白。TEV酶切除GST標(biāo)簽后采用凝膠過濾層析純化Bnip3蛋白。[結(jié)果]Bnip3截?cái)嗷蛑亟M體成功構(gòu)建并誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。通過GST親和層析得到可溶性的攜帶GST標(biāo)簽的Bnip3(1~111)和Bnip3(1~152)蛋白。切除GST標(biāo)簽的Bnip3(1~152)通過凝膠過濾層析得到構(gòu)象均一的二聚體蛋白。[結(jié)論]采用原核表達(dá)、親和層析和凝膠過濾層析可獲得構(gòu)象均一的高純度二聚體Bnip3蛋白。
[Abstract]:[objective] to obtain high purity Bnip3 protein for protein crystal screening. [methods] the Bnip3 truncated gene was constructed into the prokaryotic expression vector and transformed into E. coli. IPTG induced expression. The target protein was purified by GST column and the GST label was removed. The Bnip3 protein was purified by gel filtration chromatography. [results] the recombinant Bnip3 truncated gene was successfully constructed and induced to express the target protein. GST affinity chromatography was used to obtain soluble GST labeled Bnip3G (1 / 111) and Bnip3n (1 / 152) proteins. The conformational dimer protein was obtained by gel filtration chromatography. [conclusion] High purity Bnip3 protein with homogeneous conformation can be obtained by prokaryotic expression, affinity chromatography and gel filtration chromatography.
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科;
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.S2013040012902) 國家自然科學(xué)青年基金項(xiàng)目(No.31300602)資助~~
【分類號】：R363;Q786

【參考文獻(xiàn)】

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1 楊輝;左O;劉雯;;Parkin、PINK1、DJ-1和線粒體功能障礙與帕金森病[J];生命科學(xué);2010年10期

2 謝洪;李艷君;陳英玉;;線粒體自噬[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2011年12期

【共引文獻(xiàn)】

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1 張星亮;譚建新;;β-Ogg1與H-Ras可溶性原核表達(dá)純化及其相互作用的鑒定[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年04期

2 熊英環(huán);林千文;吳湘濤;張星亮;;線粒體自噬受體Nix蛋白的原核表達(dá)及其純化[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年04期

3 林劍霞;潘瑤;李妍;;帕金森病的研究進(jìn)展[J];吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào);2015年02期

4 張淑香;田偉;任燕冬;李玉萍;劉樹民;;帕金森病動物模型評價(jià)及發(fā)病機(jī)制探討[J];中國臨床保健雜志;2015年04期

5 許美芬;何軼群;管敏鑫;;線粒體融合、分裂與神經(jīng)變性疾病[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年12期

6 董明;陳小婉;席克虎;王有虎;桂巖;張福宏;馬春霞;洪浩;劉翔毅;江英;馬毅;楊貴軍;張小兵;;18β-甘草次酸對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞線粒體的影響[J];山東大學(xué)耳鼻喉眼學(xué)報(bào);2014年03期

7 原陽;潘珊珊;;活性氧介導(dǎo)氧化應(yīng)激在心血管應(yīng)激及運(yùn)動中對心肌線粒體和自噬作用的新進(jìn)展[J];體育科學(xué);2015年05期

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1 鄧增欽;張星亮;張琦;劉揚(yáng);王崢;吳瑋;龍加福;陳忠周;;脫落酸受體PYL3復(fù)合物結(jié)構(gòu)和功能研究[A];中國晶體學(xué)會第五屆全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)大會（大分子分會場）論文摘要集[C];2012年

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本文編號：1892463