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抗MATSA單克隆抗體的制備與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2018-05-15 10:34

  本文選題:馬立克氏病腫瘤相關(guān)表面抗原 + 單克隆抗體 ; 參考:《西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2009年06期


【摘要】:【目的】制備抗雞馬立克氏病腫瘤相關(guān)表面抗原(Marek's disease tumor-associated surface antigen,MATSA)的單克隆抗體(Monoclonal antibodies,McAb),為馬立克氏病的相關(guān)研究及研制以MATSA單克隆抗體為載體的抗腫瘤藥物提供材料。【方法】用純化的MATSA免疫Balb/c小鼠,取其脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合,采用間接ELISA法篩選陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株,并對(duì)其染色體進(jìn)行分析。將陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株接種Balb/c小鼠,制備McAb腹水,采用硫酸銨鹽析法粗提McAb,并鑒定其所屬亞類。【結(jié)果】獲得了3株能穩(wěn)定分泌MATSA McAb的雜交瘤細(xì)胞株B3、H6和D6,其培養(yǎng)上清液抗體效價(jià)為26~27,Balb/c小鼠接種細(xì)胞制得的腹水效價(jià)為210~211。染色體分析結(jié)果顯示,3株雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)目均為52±2對(duì)。3株雜交瘤細(xì)胞株所分泌的McAb均為IgG 2b亞類,可與MSB1細(xì)胞反應(yīng)!窘Y(jié)論】獲得了MATSA的McAb。
[Abstract]:[objective] to prepare Monoclonal antibodies-McAbs, a monoclonal antibody against Marekhos disease tumor-associated surface antigenmata, in order to provide materials for the study of Marek's disease and the development of anti-tumor drugs with MATSA monoclonal antibody as carrier. Methods] Balb/c mice were immunized with purified MATSA. The spleen cells were fused with SP2/0 myeloma cells and the positive hybridoma cell lines were screened by indirect ELISA method and their chromosomes were analyzed. Balb/c mice were inoculated with positive hybridoma cell lines to prepare McAb ascites. McAbs were extracted by ammonium sulfate salting-out method and their subclasses were identified. [results] three hybridoma cell lines B _ 3H _ 6 and D _ 6 with stable secretion of MATSA McAb were obtained. The titer of antibody in the supernatant was 210211. the titer of antibody in the supernatant was 210211by inoculating cells into Balb / c mice. The results of chromosome analysis showed that the McAb secreted by the three hybridoma cell lines were all IgG 2b subclasses and could react with MSB1 cells. [conclusion] McAbs of MATSA were obtained.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30371067) 西北農(nóng)林科技大學(xué)青年學(xué)術(shù)骨干支持計(jì)劃項(xiàng)目(11241)
【分類號(hào)】:S858.31

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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5 李t,

本文編號(hào):1892100


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