本文選題：間充質(zhì)干細(xì)胞 + 內(nèi)皮前體細(xì)胞��； 參考：《解剖學(xué)報》2015年02期

【摘要】：目的探索同時從小鼠骨髓分離培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)與內(nèi)皮前體細(xì)胞(EPCs)及對其鑒定的方法。方法小鼠骨髓細(xì)胞經(jīng)改良差時貼壁法分離,以48h為時間點,48h內(nèi)貼壁細(xì)胞傳至3代后行成骨、成軟骨、成脂分化誘導(dǎo)實驗,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測其表面標(biāo)記;48h后收集未貼壁細(xì)胞,傳至3代后行血管形成實驗,傳至5代后行CD31免疫熒光細(xì)胞染色實驗,FCM檢測其表面標(biāo)記。結(jié)果第3代48h內(nèi)貼壁細(xì)胞可誘導(dǎo)分化為骨、軟骨和脂肪細(xì)胞,FCM檢測Sca-1、CD29、CD45、CD11b陽性率分別為(98.30±0.75)%,(97.47±1.32)%,(1.87±0.15)%,(1.03±0.71)%;第3代48h后貼壁細(xì)胞在基質(zhì)膠上可形成血管樣結(jié)構(gòu),第5代48h后貼壁細(xì)胞特異性表面抗原CD31呈陽性表達(dá),FCM檢測CD34、CD133、血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFR2)陽性率分別為(88.90±1.18)%,(92.73±2.90)%,(87.63±1.79)%。結(jié)論采用改良差時貼壁法可同時分離培養(yǎng)擴(kuò)增小鼠骨髓MSCs和EPCs,且簡便高效穩(wěn)定可重復(fù)。
[Abstract]:Objective to explore the method of simultaneous isolation and identification of mesenchymal stem cells (MSCs) and endothelial precursor cells (EPCs) from mouse bone marrow. Methods the bone marrow cells of mice were separated by modified delayed adhesion method. The adherent cells were transferred to the third passage within 48 h for osteogenesis, cartilage formation and adipogenic induction. Flow cytometry (FCM) was used to detect the surface labeling of the cells and collect the unadherent cells after 48 h. Angiogenesis was performed after 3 passages and CD31 immunofluorescence staining was performed on the surface of the cells after 5 passages. Results the adherent cells were induced to differentiate into bone within 48 h of the third generation. The positive rates of Sca-1G CD29 CD45 + CD11b in cartilage and adipocytes were 98.30 鹵0.75, 97.47 鹵1.32, 1.87 鹵0.71 and 1.03 鹵0.71, respectively. After 48 h of passage 3, the adherent cells formed vascular-like structure on the matrix glue. 48 h after the fifth passage, the positive expression of specific surface antigen (CD31) of adherent cells was detected by FCM. The positive rates of VEGF receptor VEGFR2 were 88.90 鹵1.18 and 92.73 鹵2.90 respectively. The positive rates of CD34 and CD133 were 92.73 鹵2.90 鹵87.63 鹵1.79, respectively. Conclusion the modified differential time adherence method can be used to isolate and amplify mouse bone marrow MSCs and EPCs simultaneously, and it is simple, efficient, stable and repeatable.
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院普外科;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31271458) 人力資源和社會保障部留學(xué)回國人員科技活動資助項目(RSLX201201) 兵團(tuán)科技援疆資助項目(2014AB047)
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1887832