miR-122對乙型肝炎病毒抗原表達的影響
本文選題:微RNAs/治療應用 + 肝炎e抗原 ; 參考:《浙江大學學報(醫(yī)學版)》2011年06期
【摘要】:目的:探討miR-122對乙型肝炎病毒HBsAg、HBeAg表達的影響。方法:設計合成2條miR-122的反義寡核苷酸(anti-miR-122,LNA-antimiR-122)、hsa-miR-122以及陰性對照anti-GFP,脂質體介導轉染HepG2.2.15細胞。取細胞轉染24 h、48 h后的培養(yǎng)液,時間分辨熒光免疫法檢測anti-miR-122組、LNA-antimiR-122組、hsa-miR-122組以及anti-GFP組HBsAg和HBeAg的表達,定量PCR檢測各組HBV DNA的表達。轉染48 h后,提取細胞內總RNA,Taqman技術實時熒光定量PCR檢測各組miR-122的表達。結果:①轉染48 h后anti-miR-122組、LNA-antimiR-122組miR-122表達明顯受抑制,低于陰性對照組(P0.001)。hsa-miR-122組miR-122水平較陰性對照組升高(P0.001)。②hsa-miR-122組HBsAg、HBeAg表達均低于陰性對照組(P0.001);anti-miR-122組、LNA-antimiR-122組HBsAg、HBeAg表達均高于陰性對照組(P0.001)。③轉染24 h與48 h后各組HBV DNA表達與陰性對照組比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:miR-122可調節(jié)乙型肝炎病毒抗原表達。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of miR-122 on the expression of hepatitis B virus HBsAg HBeAg. Methods: two antisense oligodeoxynucleotides (miR-122) anti-miR-122 (LNA-antimiR-122) and negative control (anti-GFP) were designed and synthesized and transfected into HepG2.2.15 cells by liposome. The expression of LNA-antimiR-122 HBsAg and HBeAg in anti-miR-122 group and anti-GFP group were detected by time-resolved fluorescence immunoassay. The expression of HBV DNA in each group was detected by quantitative PCR. After 48 hours of transfection, the miR-122 expression in each group was detected by real-time fluorescent quantitative PCR with Taqman technique. Results the expression of LNA-antimiR-122 miR-122 was inhibited in anti-miR-122 group 48 h after transfection. Compared with the negative control group, the level of miR-122 in the HBeAg group was significantly higher than that in the negative control group (P 0.001). 2hsa-miR-122 group was significantly lower than that in the negative control group (P 0.001) anti-miR-122 group. The expression of HBsAg HBeAg in the LNA-antimiR-122 group was higher than that in the negative control group at 24 h and 48 h after transfection, and the expression of HBsAg HBeAg in all groups was higher than that in the negative control group at 24 h and 48 h after transfection. There was no significant difference between the two groups (P 0.05). Conclusion: miR-122 can regulate the expression of hepatitis B virus antigen.
【作者單位】: 浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院傳染病診治國家重點實驗室;浙江大學免疫研究所;
【基金】:十二五傳染病重大專項(2012ZX10002-007) 國家重點基礎研究項目(2007CB512905,2007CB513001) 浙江省自然科學基金項目(Y207534,Y2080428)
【分類號】:R512.62
【共引文獻】
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,本文編號:1826751
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