本文關(guān)鍵詞： 調(diào)節(jié)性γδT細胞 TGF-β CD27 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 Vδ1細胞　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學院》2010年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：γδT細胞是不同于αβT細胞的一群T淋巴細胞,其表面表達由γ鏈和δ鏈組成的T細胞受體(T cell receptor, TCR),在抗原識別和免疫應(yīng)答中處于特殊的地位。由于γδTCR的有限多樣性及其抗原識別的MHC非限制性,γδT細胞一直被視為固有免疫細胞。γδT細胞處于抗腫瘤和感染的第一線,參與了機體對腫瘤的免疫監(jiān)視和對病原體侵襲的防御反應(yīng)。然而,除了抗感染和抗腫瘤的作用外,越來越多的證據(jù)表明,γδT細胞可能也存在免疫調(diào)節(jié)作用。為了全面了解γδT細胞的生物學功能,探索γδT細胞調(diào)節(jié)亞群的存在形式、作用方式和臨床意義,本研究以自身免疫性疾病為研究模型,通過體外誘導的方式對γδT細胞的調(diào)節(jié)功能進行了研究。 自身免疫性疾病是與免疫系統(tǒng)自身免疫耐受和平衡密切相關(guān)的一類疾病,根據(jù)疾病累及的范圍可被分為局部性疾病和全身性疾病,但臨床上以全身性疾病為主,多器官多系統(tǒng)均會受累。目前對自身免疫性疾病的治療缺乏針對性,且毒副作用顯著,因此,探尋疾病發(fā)生的免疫學相關(guān)機制,進而找到針對病因的有效治療方案,是多數(shù)自身免疫性疾病治療面臨的首要問題。 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus, SLE)是臨床上常見的一種自身免疫性疾病,以免疫系統(tǒng)自身紊亂和多系統(tǒng)受累為主要表現(xiàn)。 首先,本研究以SLE患者與健康志愿者外周血中γδT細胞數(shù)量、亞群組成和功能分布的差異等方面為切入點,初步探討了γδT細胞在SLE患者發(fā)病過程中所發(fā)揮的作用。與健康志愿者相比,SLE患者外周血中γδT細胞的比例顯著下降,其中以Vδ2亞群的減少為主,而V8l和Vδ3兩群細胞無明顯變化；另外,在γδT細胞按照CD27和CD45RA表達情況進行分類后,產(chǎn)生的四個功能亞群中,表型為CD27+CD45RA的中心性記憶細胞亞群明顯減少,提示了該群細胞與SLE的相關(guān)性。 隨后,為了證明人類調(diào)節(jié)性γδT細胞的存在并研究其功能及作用機制,我們依照CD4調(diào)節(jié)性T細胞(Regulatory T cells, Tregs)的體外誘導條件,進行了對人外周血γδT細胞的體外誘導。在重組的人白細胞介素-2(Interleukin 2, IL-2)以及轉(zhuǎn)化生長因子-β(Transforming growth factorβ, TGF-β)(?)/或白細胞介索-10(Interleukin 10, IL-10)存在的條件下,以抗TCRyδ抗體刺激對人外周血γδT細胞進行了體外誘導。誘導后的γδT細胞與經(jīng)典的CD4 Treg相似,可表達Treg標志性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3,表現(xiàn)出對CD4 T細胞增殖的抑制作用,其中Vδ1細胞是發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)活性的主要細胞亞群。為進一步研究該群細胞的表型和作用機制,尋找到理想的調(diào)節(jié)性γδT細胞的分子標志物,我們以胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達為標準,檢測與Foxp3表達相匹配的細胞表面分子。通過對細胞表面多個調(diào)節(jié)功能相關(guān)的分子表達水平的分析,發(fā)現(xiàn)Foxp3主要表達于CD27+Vδ1細胞中,且CD27+細胞較CD27-細胞具有更明顯的抑制CD4 T細胞增殖的作用。盡管如此,部分CD27+細胞并不表達Foxp3,即CD27表達并不完全等同于Foxp3的表達,因此,我們進一步研究了經(jīng)典的調(diào)節(jié)性T細胞的標志分子CD25在Vδ1細胞中與Foxp3兩者以及CD25、CD27和Foxp3三者表達的相關(guān)性。最終,我們確定調(diào)節(jié)性γδT細胞具有Vδ1+CD27+CD25+的表型,且其對CD4T細胞增殖的抑制作用主要是通過細胞直接接觸的方式實現(xiàn)的。 綜上所述,本研究初步探討了γδT細胞在自身免疫性疾病中可能發(fā)揮的調(diào)節(jié)作用,建立并優(yōu)化了調(diào)節(jié)性γδT細胞體外誘導的技術(shù)策略,并闡明了其調(diào)節(jié)功能的作用機制,揭示了γδT細胞的新功能,并為自身免疫性疾病中基于γδT細胞的免疫治療策略提供了理論依據(jù)。
[Abstract]:緯未T cells are a group of T lymphocytes which are different from 偽尾T cells , and their surface expresses the T cell receptor ( TCR ) composed of 緯 - chain and 未 - chain . 緯未T cells are regarded as innate immune cells . The autoimmune disease is a kind of disease which is closely related to the immune tolerance and balance of the immune system , and can be divided into local diseases and systemic diseases according to the range of disease progression . Systemic lupus erythematosus ( SLE ) is a common autoimmune disease in clinic . In this study , the number of 緯未T cells in peripheral blood of patients with SLE and healthy volunteers were studied , and the effect of 緯未T cells in the pathogenesis of SLE was preliminarily discussed . In comparison with healthy volunteers , the proportion of 緯未T cells in peripheral blood of patients with SLE was decreased significantly , while V8l and V未3 cells were not changed significantly . In order to prove the existence of human regulatory 緯未T cells and to study its function and mechanism , we have carried out in vitro induction of 緯未T cells in human peripheral blood by anti - TCRy 未 antibody stimulation in the presence of recombinant human interleukin - 2 ( IL - 2 ) and transforming growth factor - 尾 ( TGF - 尾 ) ( ? ) / or interleukin - 10 ( IL - 10 ) . In conclusion , the regulation of 緯未T cells in autoimmune diseases is preliminarily discussed , and the mechanism of regulating 緯未T cell in vitro is established , and the new function of 緯未T cells is revealed , and the theoretical basis is provided for the immune therapy strategy based on 緯未T cells in autoimmune diseases .

【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R392

【共引文獻】

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本文編號：1534521