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心理應(yīng)激誘發(fā)抑郁大鼠前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5 DAT表達(dá)的mi-RNA調(diào)控機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2018-01-01 16:14

  本文關(guān)鍵詞:心理應(yīng)激誘發(fā)抑郁大鼠前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5 DAT表達(dá)的mi-RNA調(diào)控機(jī)制 出處:《中南大學(xué)》2013年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:目的:研究早期母愛(ài)剝奪應(yīng)激和成年慢性不可預(yù)知性應(yīng)激對(duì)SD大鼠行為、前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5mRNA,DATmRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響及mi-RNA的調(diào)控機(jī)制。 方法:將新生SD雄性大鼠隨機(jī)分為母愛(ài)剝奪應(yīng)激組(MD)、慢性不可預(yù)知性應(yīng)激組(CUS)和正常對(duì)照組(C)。MD組大鼠接受母愛(ài)剝奪應(yīng)激,CUS組大鼠在成年后接受慢性不可預(yù)知性應(yīng)激,對(duì)照組不接受任何實(shí)驗(yàn)處理。采用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)試驗(yàn)評(píng)估大鼠焦慮、抑郁樣行為。采用實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)前額葉皮質(zhì)內(nèi)DRD1-DRD5, DATmRNA和miR-16、miR-200a、miR-207、miR-22、 miR-122、miR-96的表達(dá)水平;采用免疫印跡法檢測(cè)前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5, DAT蛋白質(zhì)表達(dá)水平。 結(jié)果:1.行為學(xué)結(jié)果:與對(duì)照組比較,MD及CUS組大鼠靜止漂浮時(shí)間增加,糖水偏愛(ài)率降低,直立次數(shù)減少、大便顆粒數(shù)增加(P0.05);與CUS組比,MD組大鼠靜止漂浮時(shí)間長(zhǎng),糖水偏愛(ài)率降低(P0.05)。2.蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果:與C組比較,MD組的DRD1、 DRD5、DRD3、DRD4、DAT及CUS組的DRD1、DRD5、DAT、DRD2蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)(P0.05)。與CUS組比較,DRD5蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào),D2樣受體及DAT蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)(P0.05)。3.基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果:與C組比較,MD組DRD1、DRD5mRNA、DRD3、DRD4、DATmRNA及CUS組的DRD1、DRD5、DRD2、DATmRNA表達(dá)上調(diào),與CUS比較,D1樣受體、D2樣受體及DAT蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)。4.mi-RNA表達(dá)檢測(cè)結(jié)果:與C組比較,MD組的miR-207,miR-96的表達(dá)降低(P0.05),CUS組的miR-122、miR-22,miR-207表達(dá)增加(P0.05)。miR-22、miR-122、miR-96表達(dá)水平分別與DRD、DRD5、DAT蛋白表達(dá)水平明顯相關(guān)(P0.05)。5.生物學(xué)指標(biāo)與行為學(xué)指標(biāo)相關(guān)結(jié)果:DRD1蛋白表達(dá)水平與糖水偏愛(ài)率相關(guān)顯著(P0.05); DRD1、 DRD5,DAT蛋白表達(dá)水平與靜止漂浮時(shí)間明顯相關(guān)(P0.01);DRD5、DAT與直立次數(shù)相關(guān)(P0.05);DRD1、DRD5, DAT蛋白表達(dá)水平與中央格比例相關(guān)(P0.01)。 結(jié)論:1.不同應(yīng)激范式可誘發(fā)大鼠不同的抑郁樣表型。2.不同抑郁表型大鼠前額葉皮質(zhì)內(nèi)多巴胺受體、轉(zhuǎn)運(yùn)體發(fā)生差異性的改變。3.miRNA可能參與不同抑郁亞型的發(fā)生機(jī)制。
[Abstract]:Objective: To study the effects of early maternal stress and adult chronic unpredictable stress on the behavior of SD rats, the expression of DRD1-DRD5mRNA, DATmRNA and protein in prefrontal cortex, and the regulation mechanism of mi-RNA.
Methods: male SD rats were randomly divided into maternal deprivation group (MD), chronic unpredictable stress group (CUS) and normal control group (group C).MD rats received maternal deprivation, CUS group rats received chronic unpredictable stress in adulthood, the control group did not meet by any experimental treatment. The forced swimming test, sucrose preference test and open field test to evaluate rat anxiety, depression like behavior. Detected by real-time quantitative PCR in prefrontal cortex DRD1-DRD5, DATmRNA and miR-16, miR-200a, miR-207, miR-22, miR-122, miR-96 expression; Western blot was used to detect DRD1-DRD5 in prefrontal cortex. The level of DAT protein expression.
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本文編號(hào):1365238

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