本文關(guān)鍵詞：氮6-環(huán)戊基腺苷對大鼠腎缺血—再灌注損傷延遲性保護作用的實驗研究　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 腎 再灌注損傷 氮6-環(huán)戊基腺苷 8-環(huán)戊基-1 3-二丙基黃嘌呤 細胞凋亡

【摘要】： 目的:腎缺血-再灌注損傷(RIRI)是臨床工作中經(jīng)常遇到的問題,在一些腎臟手術(shù)如腎實質(zhì)切開取石、腎部分切除、腎蒂損傷修復(fù)等手術(shù)中,暫時阻斷腎臟血流是必要的。作為一名麻醉工作者臨床上也經(jīng)常會遇到急性腎缺血、急性腎功能衰竭等情況。如何減輕和防治腎缺血-再灌注損傷,一直是人們對腎臟損傷保護的主要研究課題。腎缺血-再灌注損傷的發(fā)主要機制為:氧自由基增多、細胞內(nèi)鈣超載和鈣震蕩、細胞內(nèi)PH和滲透壓的改變、內(nèi)皮細胞的激活、中性粒細胞介導(dǎo)的損傷、微血管損傷、細胞因子和核因子-KB(NF-KB)等所引起的損傷以及腎臟組織細胞的凋亡。目前關(guān)于如何減輕或防治腎缺血-再灌注損傷的研究甚多,但其臨床實用價值均不大。為尋求更大的臨床實用價值,近年來關(guān)于如何啟動內(nèi)源性抗損傷機制成為研究的熱點,關(guān)于腺苷A1受體激動劑的研究就是其中的熱點之一。目前國內(nèi)關(guān)于腺苷A1受體在心臟、腦等器官缺血-再灌注損傷保護作用的研究已有大量報道,但目前國內(nèi)尚無關(guān)于腺苷A1受體激動劑在腎缺血-再灌注損傷中作用的報道。本實驗通過建立大鼠腎缺血-再灌注損傷模型,探討氮6-環(huán)戊基腺苷(N 6 - Cyclopentyl adenosine,CPA)對大鼠腎缺血-再灌注損傷的保護作用,為尋找防治腎缺血-再灌注損傷有效的藥物提供實驗依據(jù)。 方法:32只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,體重250-300g,隨機分為4組,每組8只,①假手術(shù)組(S組),②缺血-再灌注組(I/R組),③CPA預(yù)先給藥+缺血-再灌注組(C組),④CPA+8-環(huán)戊基-1,3-二丙基黃嘌呤(8-Cyclopentyl-1,3- 2-propyl xanthine ,DPCPX)預(yù)先給藥+缺血-再灌注(CD組)。 10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉,一側(cè)頸內(nèi)靜脈穿刺,0.9%生理鹽水8ml/kg·h持續(xù)泵入。采用夾閉雙側(cè)腎蒂45min,再灌注24h制備腎缺血-再灌注損傷模型。用無創(chuàng)動脈夾夾閉雙側(cè)腎蒂,腎臟顏色由紅變?yōu)樽霞t色即可確認腎血流被阻斷,造成腎缺血45min后,松開動脈夾,腎臟由紫紅色恢復(fù)為紅色即可確認血流恢復(fù)。①假手術(shù)組(S組):僅行開腹,游離雙側(cè)腎臟,分離雙側(cè)腎蒂但不夾閉,傷口用生理鹽水紗布覆蓋,暴露45min不做腎缺血處理;②缺血-再灌注組(I/R):暴露腎臟后夾閉雙側(cè)腎蒂,缺血45min后開放動脈夾,再灌注24h;③CPA+缺血45min再灌注24h組(C組):CPA 1.0 mg/kg在夾閉腎蒂前15 min腹腔內(nèi)注射,余操作同I/R組④:CPA+DPCPX預(yù)先給藥+缺血45min再灌注24h組(CD組);CPA 1.0 mg/kg DPCPX 1.0 mg/kg在夾閉腎蒂前15 min腹腔內(nèi)注射,余操作同I/R組。 所有動物均于再灌注24h時處死。酶法測定血清肌酐(creatinine,Cr)水平、苦味酸不除外蛋白法測定血清尿素氮(usea nitrogen,BUN)水平;比色法測定腎組織丙二醛(malondidehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD)活性、髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量;腎組織制備腎臟單細胞懸液,經(jīng)碘化丙啶(propidine iodide,PI)染色后用流式細胞分析法測定腎臟細胞凋亡率。蘇木素-伊紅(hematoxylin -eosin,HE)染色觀察腎組織病理學(xué)變化。 結(jié)果: 1血清Cr和BUN濃度變化 與S組比較,再灌注24h時,I/R組、C組、CD組血清Cr和BUN濃度明顯升高(P㩳0.05)。與I/R,CD組比較,C組Cr和BUN濃度明顯降低(P㩳0.05); I/R組和CD組之間比較差別不大(P㧐0.05)。 2腎組織的SOD活性和MDA含量MPO含量的變化 與S組相比,I/R組、C組、CD組腎組織SOD活性均降低,MDA,MPO含量均升高(P㩳0.05); 與I/R,CD組比較,C組SOD活性升高,MDA,MPO含量均減少(P㩳0.05)。 I/R組和CD組之間比較差別不大(P㧐0.05)。 3光鏡下觀察腎組織的病理改變 S組腎小球、腎小管未發(fā)現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)改變。 I/R組腎小球細胞數(shù)量減少,部分腎小球局部有壞死,球叢毛細血管擴張充血,內(nèi)有炎細胞浸潤,腎小管上皮細胞嚴重水腫、壞死、脫落,管腔狹窄,部分腎小管腔內(nèi)可見蛋白管型。間質(zhì)內(nèi)血管擴張充血,有炎細胞浸潤。 C組球從毛細血管擴展充血比I/R組減輕,少量炎細胞浸潤,腎小管上皮水腫減輕部分腎小管腔內(nèi)可見少量蛋白管型。 CD組與I/R組相比無明顯變化。 4腎組織細胞凋亡率的變化與S組相比,I/R組、C組和CD組腎組織細胞凋亡率明顯升高(P0.05)。 與I/R組相比C組腎組織細胞凋亡率明顯降低(P0.05)。與CD組比較C組腎組織細胞凋亡率明顯降低(P0.05)。I/R組與CD組比較差別不大(P0.05)。 結(jié)論: 1氮6-環(huán)戊基腺苷可減輕大鼠腎缺血-再灌注損傷,改善腎功能。其主要機制可能與通過激活腺苷A1受體,清除氧自由基,增強SOD活性,減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng),抑制細胞凋亡有關(guān)。 2氮6-環(huán)戊基腺苷對大鼠腎缺血-再灌注損傷有一定的保護作用。
[Abstract]:Objective: renal ischemia reperfusion injury (RIRI) is frequently encountered in clinical work, in some renal surgery such as renal parenchyma lithotomy, partial nephrectomy, renal pedicle injury repair surgery, temporarily blocking the renal blood flow is necessary. As a clinical anesthesia workers often encounter acute kidney ischemia, acute renal failure and so on. How to reduce and prevent renal ischemia-reperfusion injury, has been the main research subject of protecting kidney injury. Renal ischemia-reperfusion injury of the main mechanism is that the increasing of oxygen free radicals, calcium overload and calcium oscillations, intracellular PH and osmotic pressure changes in endothelial cell activation, neutrophil mediated injury and microvascular injury, cytokines and nuclear factor -KB (NF-KB) caused by injury and renal cell apoptosis. At present on how to reduce or prevent renal ischemia-reperfusion There are many studies on the reperfusion injury, but its clinical value was small. The quest for greater clinical value in recent years on how to activate the endogenous anti damage mechanism has become a hot research topic, the research of adenosine A1 receptor agonist is one of the hot spots in our country. About of adenosine A1 receptors in the heart, a lot of research reports the protective effect of brain and other organ ischemia reperfusion injury has been, but at present there is no domestic of adenosine A1 receptor agonist on renal ischemia reperfusion injury effects were reported. The renal ischemia-reperfusion injury in rat model of nitrogen 6- cyclopentyladenosine (N 6 - Cyclopentyl adenosine, CPA) the protective effect on renal ischemia-reperfusion injury in rats, for the prevention and treatment of renal ischemia reperfusion injury and effective drugs to provide experimental basis.
Methods: 32 Sprague-Dawley (SD) body weight in male 250-300g rats, were randomly divided into 4 groups, 8 rats in each group, sham operation group (S group), the ischemia-reperfusion group (I/R group), CPA pretreatment + ischemia reperfusion group (C group), the CPA+8- ring amyl -1,3- two propyl xanthine (8-Cyclopentyl-1,3- 2-propyl, xanthine, DPCPX) pretreatment + ischemia reperfusion (group CD).
Anesthesia with 10% chloral hydrate intraperitoneal injection of 3ml/kg, one side of internal jugular vein puncture, 0.9% saline 8ml/kg h continuous infusion. The bilateral renal artery clamping 45min, reperfusion 24h preparation model of renal ischemia reperfusion injury. Noninvasive artery clipping of bilateral renal artery, renal color changed from red to purple red you can confirm the renal blood flow is blocked, causing kidney ischemia after 45min, renal artery clamp release, a purple red red recovery can confirm the recovery of blood flow. The sham operation group (group S): only laparotomy, free bilateral kidney, bilateral renal pedicle without clipping, wound covered with saline gauze, exposure to 45min do renal ischemia treatment; the ischemia-reperfusion group (I/R): after exposure to the kidney by clamping bilateral renal pedicle, open the artery clip after 45min ischemia reperfusion 24h, CPA+ and 45min; ischemia reperfusion 24h group (group C): CPA 1 mg/kg in renal pedicle clamping before 15 min intraperitoneal injection. I operate with I/R Group IV: CPA+DPCPX was given in advance + ischemia 45min reperfusion group 24h (group CD); CPA 1 mg/kg DPCPX 1 mg/kg was injected intraperitoneally in 15 min before clamping the renal pedicle, and the rest operation was same with I/R group.
All animal were sacrificed at 24h of reperfusion. Serum creatinine enzyme (creatinine, Cr) level, protein method except picric acid to measure the serum urea nitrogen (usea nitrogen, BUN) level; Determination of renal tissue MDA Colorimetry (malondidehyde, MDA) content, superoxide dismutase (superoxide dismutase, SOD) the activity of myeloperoxidase (myeloperoxidase, MPO) content; kidney kidney preparation of single cell suspension by propidium iodide (propidine iodide, PI) after staining with flow cytometry analysis of renal cell apoptosis rate. Hematoxylin eosin (hematoxylin -eosin, HE) staining to observe the pathological changes in renal tissues.
Result:
1 Changes of serum concentration of Cr and BUN
Compared with group S, the concentration of serum Cr and BUN increased significantly in group I/R, group C and group CD (P? 0.05) after reperfusion of 24h. Compared with I/R and CD group, the concentration of C and I/R in the C group was significantly decreased (0.05?); there was little difference between group a and group C. (0.05).
Changes of SOD activity and MDA content MPO content in 2 renal tissues
Compared with the S group, the SOD activity of renal tissue in group I/R, C and CD decreased, and the content of MDA and MPO increased (P? 0.05).
Compared with group I/R and CD, the activity of SOD in C group increased and the content of MDA and MPO decreased (P? 0.05).
There was little difference between the I/R group and the CD group (P? 0.05).
Pathological changes of renal tissue under 3 light microscopy
In group S, no obvious morphological changes were found in renal tubules.
The number of I/R group reduced glomerular cells, partial glomerular local necrosis, bundle of capillary dilatation and congestion, inflammatory infiltration in renal tubular epithelial cells, edema, necrosis, shedding, stenosis, tube visible protein in the renal tubules. Interstitial blood vessel dilation filling, the infiltration of inflammatory cells.
The hyperemia of the C group was less than that of the I/R group, a small amount of inflammatory cells infiltrated, and the renal tubule epithelia was reduced to a small amount of protein tube in the renal tubule.
There was no significant change in group CD compared with group I/R.
4 the apoptosis rate of renal tissue cells was significantly higher than that in the S group, and the rate of apoptosis in the I/R group, the C group and the CD group increased significantly (P0.05).
Compared with group I/R, the apoptosis rate of renal tissue in group C was significantly lower than that in group P0.05 (P0.05). Compared with group CD, the apoptotic rate of renal tissue in C group was significantly decreased (P0.05), and there was little difference between.I/R group and CD group (P0.05).
Conclusion:
1 nitrogen 6- cyclic adenosine can alleviate renal ischemia-reperfusion injury and improve renal function in rats. The main mechanism may be related to the activation of adenosine A1 receptor, the elimination of oxygen free radicals, the enhancement of SOD activity, the reduction of lipid peroxidation and the inhibition of apoptosis.
2 nitrogen 6- cyclic amyl adenosine has protective effect on renal ischemia-reperfusion injury in rats.

【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R363

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 段重高,王莉,李宏偉,成桂仁;三七皂甙對大鼠腦微循環(huán)的影響[J];中國病理生理雜志;1992年05期

2 陳楓;鄧存良;王明勇;史小玲;李萬平;肖順漢;;靈芪蠲肝液對大鼠急性肝損傷保護作用的研究[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;2006年10期

3 蘇建華;章莉萍;陳玉芳;唐金榮;肖杭;;前列地爾對SD大鼠坐骨神經(jīng)損害后背根神經(jīng)元的保護作用[J];長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年05期

4 黃月玲;劉奕生;董曉先;劉凌釗;;天麻對大鼠缺血再灌注時腎臟的保護作用研究[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2007年02期

5 肖桂林;張春虎;覃雙全;劉發(fā)益;肖宮;胡隨瑜;;大黃素對急性氧化樂果中毒血漿ChE、GSH-PX、MDA影響及肺保護作用的研究[J];湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2008年06期

6 萬小莜;;缺血預(yù)處理對大鼠缺血再灌注肺損傷保護作用的研究[J];山東醫(yī)藥;2009年52期

7 李勇;張培建;郎潔;馮敏;金成;周斌;陶立德;劉新顏;;低氧預(yù)處理對大鼠自體肝移植后胰腺的保護作用[J];肝膽胰外科雜志;2010年04期

8 蔡玲民;;免疫接種預(yù)防大鼠慢性綠膿桿菌肺部感染[J];國際生物制品學(xué)雜志;1984年03期

9 王延紅;;一氧化氮在大鼠嚴重創(chuàng)傷時早期對腸道的保護作用[J];中國誤診學(xué)雜志;2007年28期

10 劉演波,劉苗苗,毛飛鵬,趙樹進;牛磺酸對氯化鈣引起的大鼠心律失常的保護作用[J];廣東藥學(xué)院學(xué)報;1998年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 欒麗菊;王珂;楊立元;張艷;張衛(wèi)光;秦麗華;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白7對大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧性損傷保護作用的研究[A];中國解剖學(xué)會2011年年會論文文摘匯編[C];2011年

2 曾靖;黃志華;李良東;肖海;黎曉;曾雪亮;;3′-大豆苷元磺酸鈉對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及其機制[A];中國藥理學(xué)會第十一次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2011年

3 孫琳;郭春妮;趙永波;;BM6在Aβ致大鼠海馬神經(jīng)元損害中保護作用的研究[A];2011全國老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

4 黃曉穎;樊榮;盧圓圓;林乾頂;;紅景天苷對常壓肺心病大鼠保護作用的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2011（第十二次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

5 趙誠;廖梅;張曉潔;陳鷺姍;張英東;王楠;劉惠君;文志斌;管茶香;;加味黃芪合劑對被動吸煙大鼠肺損傷的保護作用[A];湖南省生理科學(xué)會2006年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2007年

6 付守芝;李孝全;田林;劉勇;王家良;王家寧;張友恩;;還原型谷胱甘肽對毒鼠強中毒大鼠心腦的保護作用[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會第十三次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會大會論文集[C];2010年

7 雷鵬彭;龍鋒;張興超;;促紅細胞生成素對伴有休克大鼠顱腦傷的保護作用[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

8 李娟;裴建明;;U50,488H對低氧性肺動脈高壓大鼠的血管保護作用:Akt-激活NO生成的作用[A];中國生理學(xué)會消化內(nèi)分泌生殖代謝生理專業(yè)委員會2011年消化內(nèi)分泌生殖學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2011年

9 龐慶豐;;二氯甲烷對CLP誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷的保護作用[A];中國病理生理學(xué)會第九屆全國代表大會及學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2010年

10 徐浩;孟祥忠;孫星星;周揚;唐君;徐禮鮮;張惠;;靜脈輸注高氧液對急性一氧化碳中毒大鼠多臟器損傷保護作用的研究[A];第一屆全國麻醉藥理專業(yè)委員會第二次學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 張中橋;益氣活血中藥對缺血心肌有保護作用[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

2 吳一福;人參對心血管作用藥理學(xué)研究新進展[N];中國醫(yī)藥報;2006年

3 ;關(guān)木通對大鼠致癌性的實驗研究[N];中國醫(yī)藥報;2003年

4 劉霞;誘導(dǎo)多功能干細胞讓小鼠長出大鼠胰腺[N];科技日報;2011年

5 ;丹參能加快放創(chuàng)復(fù)合傷大鼠創(chuàng)面愈合[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

6 鄭健剛；杜元灝；石學(xué)敏;針刺能增加腦缺血大鼠腦血流量[N];中國醫(yī)藥報;2005年

7 ;新抗病毒抗生素17997在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)和組織分布研究[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 ;刺五加皂甙對大鼠血管性癡呆有防治作用[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

9 ;中藥復(fù)方能逆轉(zhuǎn)腹主動脈縮窄大鼠心肌肥大[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

10 孫忻;人類首次獲得克隆大鼠[N];科技日報;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 杜津;硫化氫后處理對大鼠肝缺血再灌注損傷的保護作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

2 朱國貞;上調(diào)Intermedin基因?qū)Υ笫竽I臟缺血再灌注保護作用及機制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

3 趙舒武;缺氧對神經(jīng)干細胞的損傷及EPO、葡萄糖對其保護作用的實驗研究[D];山東大學(xué);2006年

4 高輝;聯(lián)合應(yīng)用雷洛昔芬和雌激素對去勢大鼠血栓前狀態(tài)的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

5 楊玉波;L-Arg對大鼠肝臟缺血再灌注損傷保護作用的研究[D];吉林大學(xué);2003年

6 梁啟明;刺五加皂苷B對大鼠心肌缺血再灌注和過氧化氫損傷心肌細胞凋亡的影響及機制[D];吉林大學(xué);2010年

7 楊麗娟;雌激素對腦缺血再灌注損傷神經(jīng)元的保護作用及機制探討[D];中南大學(xué);2012年

8 陳舒晨;缺血后適應(yīng)基礎(chǔ)上骨髓間充質(zhì)干細胞移植對大鼠移植肺缺血再灌注損傷的保護作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

9 唐勇;大鼠急性脊髓損傷后肺水腫的機制及黃芪多糖對肺水腫的保護作用的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

10 顧蓓蓓;視黃醇對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠乳腺炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)及機制研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李長賢;甲狀腺激素對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護作用[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 陳晏林;丹參酮IIA對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

3 陳群;反式白藜蘆醇對Aβ_（25-35）致癡呆大鼠的保護作用及機制研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

4 張虹;白介素-18融合蛋白對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用及其增效作用[D];吉林大學(xué);2012年

5 高傳長;丹參對大鼠移植肝血紅素氧合酶-1表達的影響[D];南昌大學(xué);2011年

6 侯攀;二丙烯三硫化物（DATS）對大鼠急性肺損傷保護作用的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

7 孫丕健;維生素C對大鼠酒精性腦和肝損傷的保護作用研究[D];蘇州大學(xué);2011年

8 羅雯;COX-2shRNA對實驗性大鼠肝纖維化的影響[D];南華大學(xué);2012年

9 鐘小燕;MCT在大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的定位分布及其在缺血缺氧性腦損傷中的作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

10 向芳;圍產(chǎn)期大鼠血脂組成與乳腺炎癥相關(guān)基因的表達變化研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

，

本文編號：1365149