發(fā)布時間：2017-12-29 18:06

  本文關鍵詞：家兔延髓腹側呼吸組中段疑核內P2X受體在機體低氧呼吸反應中的作用　出處：《山東大學》2008年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】： 目的:(1)觀察向家兔NA內微量注射P2X受體內源激動劑ATP,P2X受體拮抗劑PPADS(pyridoxal-5'-phosphate-6'-azophenyl-2',4'-disulphonic acid)對常氧呼吸和低氧呼吸反應的影響,探討P2X受體在低氧呼吸反應中的作用;(2)進一步應用免疫組織化學的方法,觀察P2X受體在NA內表達的數(shù)量變化,探索P2X受體在介導低氧呼吸中的作用及其可能的機制。 方法:1.電生理學實驗:實驗在麻醉、肌松、人工通氣的成年家兔上進行。常氧通氣為醫(yī)用空氣(20%O_2-80%N_2),低氧通氣為10%O_2-90%N_2混合氣體。以膈神經(jīng)放電為呼吸觀察指標。實驗在56只健康成年家兔上進行,通過解剖定位和引導呼吸神經(jīng)元放電定位NA。微量注射:向NA內微量注射P2X受體內源激動劑ATP,觀察注射前后,常氧和低氧通氣對膈神經(jīng)放電以及動脈血pH值的變化;為了檢驗向NA內注射ATP引起的呼吸效應是否呈現(xiàn)劑量依賴性,向NA內注射4個劑量的ATP(0.1,0.3,0.5,0.7μl)。每次注射之間至少間隔1小時;向NA內微量注射廣譜P2X受體拮抗劑PPADS(吡多醛衍生物),5分鐘后在同一位點注射ATP 0.3μl,觀察注射前后常氧和低氧通氣對膈神經(jīng)放電的影響。 2.免疫組織化學實驗:健康成年家兔32只,隨機分為4組:A組(n=8):注射生理鹽水;B組(n=8):注射ATP;C組(n=8):注射PPADS;D組(n=8):不注射。A、B、C組動物急性缺氧后快速處死,D組動物直接處死,迅速取出腦干,以10%福爾馬林PBS溶液浸泡固定腦組織。石蠟包埋后進行切片。采用免疫組織化學方法SP法觀察P2X受體在NA內的表達情況。 結果:1.電生理學實驗結果:低氧通氣開始后,動物膈神經(jīng)放電幅度和呼吸頻率迅速增加,在低氧通氣2分鐘左右時達到高峰,隨后有逐漸衰減的趨勢,但在整個5分鐘的低氧通氣過程中,始終高于常氧通氣狀態(tài)下的放電幅度和呼吸頻率;向NA內微量注射ATP對常氧通氣下的膈神經(jīng)放電沒有明顯影響,但能顯著性增強膈神經(jīng)放電對低氧呼吸的反應以及降低動脈血pH值;4種劑量的ATP在NA內引起的呼吸興奮效應呈現(xiàn)顯著的劑量依賴性,微量注射大劑量ATP對膈神經(jīng)放電的興奮效應明顯大于小劑量ATP;向NA內微量注射PPADS對常氧通氣下的膈神經(jīng)放電沒有明顯影響但削弱ATP引起的低氧呼吸反應。 2.免疫組織化學實驗:(1)各組均在NA處觀察到P2X受體的表達。(2)統(tǒng)計分析顯示低氧通氣組動物P2X受體數(shù)目比常氧組顯著增多,即A、B、C三組P2X受體數(shù)目比D組表達明顯增加(P＜0.01)。 結論:在常氧通氣即生理狀態(tài)下,腦干NA的P2X受體在呼吸調控中無明顯作用,但均參與了低氧呼吸反應的形成,增強低氧呼吸反應,而P2X受體阻斷劑PPADS削弱ATP引起的低氧呼吸反應效應。 在免疫組織化學實驗中發(fā)現(xiàn),P2X受體在家兔NA中有表達,且在低氧通氣后表達顯著增強。 意義:P2X受體在低氧通氣后的家兔延髓NA區(qū)的明顯表達,為ATP對呼吸節(jié)律的調節(jié)提供了功能結合位點,為進一步深入研究在通氣反應中,機體感受Po_2、Pco_2和氫離子濃度變化后,如何將信息傳入呼吸中樞提供了一條新途徑。
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【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R332

【參考文獻】

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1 谷啟海,李之望,樊友珍;緩激肽對大鼠背根神經(jīng)節(jié)分離神經(jīng)元ATP激活電流的調制作用[J];生理學報;1998年01期

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本文編號：1351265