本文關(guān)鍵詞：家蠅抗真菌肽MAF-1原核表達(dá)條件優(yōu)化及活性驗證　出處：《中國公共衛(wèi)生》2015年11期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的優(yōu)化家蠅抗真菌肽(MAF-1)原核表達(dá)條件及重組蛋白的活性驗證。方法利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和Quantity One凝膠電泳圖像分析系統(tǒng)研究不同的誘導(dǎo)溫度、異丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)濃度和誘導(dǎo)時間對融合蛋白表達(dá)的影響;融合蛋白用鎳離子金屬螯合劑親和層析柱進行蛋白純化,切除His標(biāo)簽后進行活性驗證。結(jié)果在加入濃度為25μmol/L的IPTG,34℃誘導(dǎo)18 h,融合蛋白的表達(dá)量最高;融合蛋白純化后濃度為0.706 mg/m L,其最低抑殺白色念珠菌的濃度為70μg/m L。結(jié)論成功獲得重組融合蛋白的最佳表達(dá)條件,并純化目的蛋白,切除His標(biāo)簽后的目的蛋白具有抗真菌活性。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;皖北煤電集團總醫(yī)院;貴州省疾病預(yù)防控制中心;
【基金】：國家科技支撐計劃(2011BAC06B12) 國家自然科學(xué)基金(81360254) 貴州省科學(xué)技術(shù)基金(黔科合J字[2012]2038號)
【分類號】：R3411
【正文快照】： 抗菌肽(antimicrobial peptides,AMP)是生物免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一類抵抗外界病原體感染的小分子多肽[1-3],具有抗菌、抗病毒、抗寄生蟲、抑制腫瘤細(xì)胞及免疫調(diào)節(jié)活性[4-7]。其作用機制獨特、理化性質(zhì)穩(wěn)定,僅作用于病原微生物,對人正常細(xì)胞無副作用[8-9]。AMP這種選擇性特點在抗病

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本文編號：1308208