本文關鍵詞：轉染CX3CR1基因對小鼠骨髓間充質干細胞向Fractalkine趨化能力的影響

  更多相關文章： 骨髓間充質干細胞 趨化因子Fractalkine 趨化因子受體CXCR 慢病毒載體 基因轉染 細胞遷移

【摘要】：目的:研究在Transwell共培養(yǎng)體系中,轉染CX3CR1基因對小鼠骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向趨化因子Fractalkine(FKN)趨化能力的影響。方法:采用差速貼壁法分離純化小鼠MSCs,體外培養(yǎng)、傳代擴增,流式細胞術檢測細胞表面抗原標志和細胞周期;將攜帶有趨化因子受體CX3CR1基因及綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒(LV-CX3CR1-EGFP)及空載體病毒(LV-CON-EGFP)轉染小鼠MSCs細胞,RT-PCR法分別檢測空白對照組、實驗組、陰性對照組細胞中CX3CR1 mRNA表達情況,Western blot印記法檢測CX3CR1蛋白的表達水平,并通過Transwell共培養(yǎng)體系觀察不同轉染組細胞向趨化因子FKN的遷移情況。結果:成功獲得了細胞形態(tài)均一,生長狀態(tài)良好的MSCs;細胞CD29、CD44、CD34有陽性表達;陰性對照組和空白對照組小鼠MSCs不表達CX3CR1基因;構建的慢病毒過表達載體pUbi-MSC-CX3CR1-EGFP能成功轉染至小鼠MSCs中,并使轉染后的MSCs表達CX3CR1 mRNA及蛋白。在Transwell共培養(yǎng)體系中,轉染CX3CR1基因的小鼠MSCs向趨化因子FKN趨化能力明顯強于各對照組(P=0.000),其中陰性對照組浸潤至下室的細胞數為:(13.80±2.17)個每高倍鏡視野(n=5)。實驗組浸潤至下室的細胞數為:(35.80±3.34)個每高倍鏡視野(n=5)。FKN抗體阻斷組浸潤至下室的細胞數為(14.80±1.92)個每高倍鏡視野(n=5)。結論:轉染CX3CR1基因能有效增加小鼠MSCs向趨化因子FKN趨化的能力。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院老年科;
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是心血管系統(tǒng)疾病中常見的疾病,也是危害人類健康的疾病,其發(fā)病機制和治療方法的研究一直是心血管疾病研究領域的熱點。血管內皮損傷及炎癥反應是AS發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié),因此保護血管內皮功能和抑制炎癥反應在AS的治療中顯得尤為重要。在AS病

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 李水仙,賈文祥,趙連三,唐紅,劉麗,王松;磷酸鈣法轉染哺乳動物非貼壁細胞[J];山西大學學報(自然科學版);1998年02期

2 金丹 ,裴國獻 ,齊鳳菊 ,胡罷生 ,魏寬海 ,王珂 ,陳濱;hBMP_7基因轉染對兔骨髓間充質干細胞增殖及膠原合成的影響[J];解放軍醫(yī)學雜志;2002年06期

3 張新華,鐘翠平;樹突狀細胞與移植免疫的研究進展[J];解剖科學進展;2003年01期

4 楊健,王躍祥,官孝群,馬春姑,陶賢梅,宋后燕;人纖溶酶原K5區(qū)基因真核表達載體的構建和活性鑒定[J];復旦學報(醫(yī)學版);2003年05期

5 趙君,劉彬,任文陟,張守峰,宇麗,李元平,喬貴林,扈榮良,殷震;體內精原干細胞轉染法建立轉基因小鼠[J];實驗生物學報;2003年03期

6 劉希民,葛林阜,馬煥文;高滴度逆轉錄病毒載體的4種方法轉染小鼠T淋巴細胞轉染率比較[J];青島大學醫(yī)學院學報;2004年02期

7 王耿,何國祥,徐曉輝,冉擘力,景濤,陳渝;gax基因對血管平滑肌細胞中p21基因表達的影響[J];醫(yī)學研究生學報;2005年07期

8 羅浩;江洪;蔡軍;曾彬;;綠色熒光蛋白標記的小鼠胚胎干細胞系的建立及向心肌細胞分化[J];心臟雜志;2006年04期

9 劉殿峰;張嘉保;張守峰;姚偉;李雪;扈榮良;;蚓激酶重組逆轉錄病毒載體的構建及其在牛乳腺中的表達[J];中國獸醫(yī)學報;2006年05期

10 袁成福;楊俊霞;魏麗麗;石華;陳濟;易發(fā)平;馬永平;宋方洲;;人黑色素濃集激素1型受體真核表達載體的構建及穩(wěn)定轉染CHO細胞系的建立[J];解放軍醫(yī)學雜志;2007年01期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 劉顏顏;武軍駐;何春燕;李小明;;人a-保護素1在細胞氧化低密度脂蛋白中的作用[A];湖北省暨武漢市生物化學與分子生物學學會第八屆第十七次學術年會論文匯編[C];2007年

2 張夢杰;楊云龍;祝建;陳平;李昂;賀美蘭;李風知;;轉錄因子AP-2(α、β和γ)對Hela細胞中survivin基因表達的影響[A];華東六省一市生物化學與分子生物學學會2006年學術交流會論文集[C];2006年

3 羅嬋;陸鳳花;陳施蓓;李楠;任艷萍;李輝;劉慶友;石德順;;電轉染水牛胎兒成纖維細胞方法的建立[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文摘要集[C];2011年

4 薛世偉;林艷麗;熊福銀;吳曉潔;周艷榮;郭虹敏;陳紅星;陳樹林;;人Nanog基因的克隆及其在CHO-K1細胞中的表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十六次學術研討會論文集[C];2010年

5 李蕾;王潤田;王兆源;楊永杰;葛錫銳;王蕙芬;;模擬mIL—18天然生成的真核表達體系的構建3—A—W5—78—P及其生物學活性的初步研究[A];中國免疫學會第四屆學術大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

6 劉志坤;祝淑釵;蘇景偉;王玉祥;楊潔;李娟;沈文斌;;MDC1基因shRNA慢病毒載體構建及穩(wěn)定轉染食管癌細胞株的建立及鑒定[A];中華醫(yī)學會放射腫瘤治療學分會六屆二次暨中國抗癌協(xié)會腫瘤放療專業(yè)委員會二屆二次學術會議論文集[C];2009年

7 祝淑釵;劉志坤;楊潔;蘇景偉;王玉祥;沈文斌;李娟;;53BP1基因shRNA慢病毒表達載體構建及穩(wěn)定轉染食管癌細胞株的建立及鑒定[A];中華醫(yī)學會放射腫瘤治療學分會六屆二次暨中國抗癌協(xié)會腫瘤放療專業(yè)委員會二屆二次學術會議論文集[C];2009年

8 尚德淑;陳譽華;;經ibeB基因轉染的鼠胚胎干細胞分化的研究[A];中國細胞生物學學會第八屆會員代表大會暨學術大會論文摘要集[C];2003年

9 張玉成;王雅麗;杜珍武;張桂珍;;重組核心蛋白聚糖轉染對HepG2細胞周期以及P21表達的影響[A];第十二屆中國體視學與圖像分析學術會議論文集[C];2008年

10 孫瑋;葛海良;王穎;張惠珍;張笑人;周光炎;;轉染MHCⅡ類反式激活蛋白調節(jié)抗腫瘤免疫應答的研究[A];中國免疫學會第四屆學術大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

中國重要報紙全文數據庫 前2條

1 中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所 勞為德;哺乳動物的遺傳改造[N];科技日報;2001年

2 記者 李秀萍;石河子大學轉基因克隆綿羊研究取得突破[N];兵團日報(漢);2011年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 高宏飛;Myod1和Myog真核共表達載體構建及轉染真皮成纖維細胞的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2013年

2 唐七義;犬腺病毒1型疫苗株DNA末端序列與結構分析及其E3區(qū)缺失載體的構建[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1996年

3 卜秀娟;蚓激酶表達產物活性在動物體內的檢測[D];吉林大學;2007年

4 邱亞峰;表達MDV gB CTL表位與雞HSP108融合蛋白基因的重組CVI988病毒的構建及免疫保護試驗[D];南京農業(yè)大學;2006年

5 黃清玲;乙型肝炎病毒全基因水平對HepG2細胞的影響及其機制的初步研究[D];福建醫(yī)科大學;2008年

6 關鈞;ODC反義RNA真核表達質粒的構建及人肺鱗癌細胞惡性表型的逆轉[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1995年

7 耿利英;脂質體介導抑制素基因轉染對牛卵泡細胞及胚胎發(fā)育的影響及機制研究[D];華中農業(yè)大學;2008年

8 張貴星;光誘導表達載體的構建及其在鹽藻除草劑抗性轉化中的應用[D];鄭州大學;2003年

9 張淼濤;豬瘟病毒C-株全長cDNA感染性的恢復及其標記疫苗的構建[D];西北農林科技大學;2005年

10 鄭喜邦;穩(wěn)定表達牛Nanog基因的成纖維細胞制作、多能性分析及轉基因克隆胚胎構建[D];西北農林科技大學;2008年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 何小寧;人溶菌酶基因乳腺特異性表達載體的構建及其在小鼠乳腺癌細胞中的表達[D];西北農林科技大學;2006年

2 劉萍;口蹄疫病毒3C基因的真核表達及其誘導宿主細胞凋亡的研究[D];甘肅農業(yè)大學;2007年

3 陳幸德;豬干擾素-γ基因的克隆及其表達[D];中國農業(yè)大學;2003年

4 侯穎;綠色熒光蛋白在哺乳動物細胞中表達的研究[D];新疆大學;2005年

5 馮穎;人端粒酶反轉錄酶基因（hTERT）構建永生化軟骨細胞可行性的研究[D];吉林大學;2007年

6 彭玉穎;大鼠膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子克隆及表達的研究[D];吉林農業(yè)大學;2007年

7 王巧俠;丙型肝炎病毒核心蛋白對基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1表達的影響[D];蘭州大學;2006年

8 遇紅梅;穩(wěn)定表達BDNF星形膠質細胞系的建立及其鑒定[D];吉林大學;2005年

9 楊娜娜;小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表達及維持雞胚胎干細胞未分化狀態(tài)的研究[D];山東農業(yè)大學;2005年

10 張陽;SPAP2在小鼠組織中的分布以及在Hela細胞中的表達[D];吉林大學;2006年

，

本文編號：1227510