本文關鍵詞：Notch1在BMP9誘導iMEF細胞成骨分化中的作用

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【摘要】：目的研究Notch信號中Notch1受體在骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)誘導的永生化小鼠胚胎成纖維細胞(immortalized mouse embryonic fibroblasts,i MEF)成骨分化中的作用。方法利用Notch1受體顯性負性突變體(dominant negative mutant,dn Notch1)處理i MEF細胞,首先分別采用細胞化學染色、活性測定和RT-PCR了解Notch1對早期成骨指標堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和晚期成骨指標骨橋蛋白(osteopontin,OPN)、骨鈣素(osteocalcin,OCN)的影響;其次用Western blot、熒光素酶和RT-PCR檢測Notch1對BMP9經(jīng)典信號通路中Smad1/5/8磷酸化和Smad結合元件(smad-binding element,SBE)活性影響;最后用結晶紫染色和流式細胞儀分析其對細胞增殖、周期及凋亡的影響。結果與對照組相比,dn Notch1處理i MEF第3、5、7天后,ALP活性均降低(P0.05),并呈劑量依賴性,11 d時OPN和OCN表達量也下調(P0.05);BMP9經(jīng)典通路中Smad1/5/8蛋白量沒有明顯變化,而p-Smad1/5/8蛋白及SBE活性受到了抑制(P0.05);結晶紫染色及流式細胞儀分析結果顯示dn Notch1能夠抑制BMP9誘導的i MEF早期細胞增殖,但對細胞凋亡無影響。結論 dn Notch1競爭抑制Notch1信號,使BMP9誘導i MEF的成骨分化能力顯著下降,其可能通過抑制BMP信號通路的活化和i MEF早期增殖兩方面來實現(xiàn)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室;
【基金】：重慶市自然科學基金(CSTC2012jj A10004) 重慶市教委科學技術研究項目(KJ130305)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一種具有很強自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,在一定的誘導條件下,其可向成骨、成肌、成脂等多種細胞分化[1-2],因此,在再生醫(yī)學領域,MSCs一直被作為理想種子細胞用于多種組織的修復[3],也被用于骨質疏松、難治性骨折等

【相似文獻】

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本文編號：1219477