本文關(guān)鍵詞：脂多糖干預(yù)氣道上皮細(xì)胞細(xì)胞因子及蛋白激酶C表達的研究

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【摘要】：目的： 脂多糖（Lipopolysaccharide LPS）能夠干預(yù)氣道上皮細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子。目前研究較多的參與LPS干預(yù)氣道上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的信號通路主要為p38絲裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase MAPK)、c-Jun N端蛋白激酶（c-Jun N-terminal protein kinase JNK）及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2ERK1/2）。蛋白激酶C(protein kinase CPKC)信號通路也是一種常見的細(xì)胞信號通路，有研究證明PKC參與II型肺泡上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的過程，而且能夠影響血腦屏障以及腸上皮屏障功能，那么PKC是否也參與LPS干預(yù)氣道上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的過程，目前尚缺乏相關(guān)研究。本實驗主要檢測不同時相不同濃度LPS干預(yù)氣道上皮細(xì)胞后細(xì)胞因子（IL-1、IL-6、IL-8、IL-11）分泌量的變化以及PKC表達量的變化，從而探索PKC在脂多糖干預(yù)氣道上皮細(xì)胞細(xì)胞因子分泌中的作用。 方法： 用培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的方法培養(yǎng)具有氣道上皮細(xì)胞特性的A549細(xì)胞株，用不同濃度的LPS干預(yù)饑餓24h后的同等數(shù)量的A549細(xì)胞，分為對照組（LPS干預(yù)濃度為0μg/ml）和實驗組（LPS干預(yù)濃度為0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、50μg/ml和100μg/ml），分別在刺激2h、4h、8h、24h、30h和48h以后收集細(xì)胞上清液及細(xì)胞總蛋白，用ELISA方法檢測A549細(xì)胞IL-1、IL-6、IL-8和IL-11的分泌量，用western blotting方法檢測相應(yīng)的PKC的表達量。 結(jié)果： 1、不同濃度LPS干預(yù)A549細(xì)胞相同時間后細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-8和IL-11的分泌量及PKC的表達量之間的差異均有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.001）；在所有時相點，IL-1的分泌量及PKC的表達量達到最大時與空白對照組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）；在某些時相點，IL-6(2h、4h、24h、48h)、IL-8（2h、4h、8h、24h、30h）和IL-11（2h、8h、24h、30h、48h）的分泌量達到最大時與空白對照組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001)，而IL-6的分泌量在8h和30h表現(xiàn)為下降趨勢。 2、PKC蛋白的表達量和IL-11的分泌量之間具有相關(guān)性（R=0.127），，相關(guān)性分析具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.049）。 結(jié)論： 1、LPS可以干預(yù)細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-8和IL-11的分泌及PKC的表達；在某些時相點，LPS能夠使氣道上皮細(xì)胞細(xì)胞因子IL-1（2h、4h、8h、24h、30h、48h）、IL-8（2h、4h、8h、24h、30h）、IL-11（2h、8h、24h、30h、48h）的分泌量及PKC的表達量增加；而IL-6的分泌量和LPS干預(yù)濃度之間無明顯的濃度依賴關(guān)系。 2、PKC的表達量和IL-11的分泌量呈正相關(guān)，提示LPS干預(yù)細(xì)胞因子IL-11的分泌過程可能和PKC信號通路有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：1212211