本文關(guān)鍵詞：維生素C提高體外培養(yǎng)的去分化脂肪細胞心肌分化效率

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【摘要】：目的:采用維生素C處理體外培養(yǎng)的去分化脂肪(dedifferentiated fat,DFAT)細胞,以期進一步提高DFAT細胞的心肌分化效率。方法:用天花板貼壁培養(yǎng)法使大鼠成熟脂肪細胞去分化為DFAT細胞,并體外培養(yǎng)增殖至第3代,然后在培養(yǎng)基中添加維生素C或(和)乳鼠心臟細胞裂解液誘導DFAT細胞心肌分化。3周后,用倒置相差顯微鏡觀察DFAT細胞的形態(tài)變化,用real-time PCR、免疫熒光和Western blot檢測DFAT細胞的心肌特異性標志物c Tn T、GATA-4及NKx2.5 mRNA和蛋白的表達。結(jié)果:大鼠脂肪細胞經(jīng)天花板貼壁培養(yǎng)后形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槌衫w維細胞樣的DFAT細胞。DFAT細胞在普通培養(yǎng)條件下可自發(fā)表達少量心肌特異性標志物。經(jīng)乳鼠心臟細胞裂解液誘導后,DFAT細胞體積增大、變長,可見肌管樣結(jié)構(gòu),c Tn T、GATA-4及NKx2.5 mRNA和蛋白的表達水平較普通培養(yǎng)的DFAT細胞顯著升高。在維生素C的作用下,DFAT細胞c Tn T、GATA-4及NKx2.5的表達水平進一步升高。未觀察到自發(fā)性搏動細胞。結(jié)論:維生素C可促進DFAT細胞分化為心肌樣細胞。
【作者單位】： 貴州省心血管病研究所;貴州省人民醫(yī)院心內(nèi)科;貴州省人民醫(yī)院病理科;
【基金】：貴州省科技廳科學技術(shù)基金資助項目(No.黔科合J字[2014]2112) 貴州省衛(wèi)生廳科學技術(shù)基金資助項目(No.gzwkj2013-1-006)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 急性心肌梗死已成為嚴重危害我國人民生命健康的重要疾病[1]。雖然藥物及介入治療有了長足進 展[2],但這些方法不能再生心肌以代償損失心肌的培養(yǎng)瓶,將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)倒置于細胞培養(yǎng)箱中進行天收縮力,限制了心功能的恢復。因此,心肌梗死患者花板培養(yǎng)(37℃、5%CO2、飽和濕度)。用

【參考文獻】

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1 呂學祥;曾秋棠;;心肌細胞裂解液誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞的分化作用[J];臨床心血管病雜志;2008年03期

2 陳家歡;魏育蕾;彭莎;王華巖;;豬羊水干細胞特異向跳動心肌細胞誘導分化[J];生物工程學報;2011年08期

3 黃榕，

本文編號：1196867