CRMP4慢病毒載體的構(gòu)建及其對神經(jīng)元突起生長的影響
本文關鍵詞:CRMP4慢病毒載體的構(gòu)建及其對神經(jīng)元突起生長的影響
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【摘要】:目的探討CRMP4對海馬神經(jīng)元突起生長的影響。方法利用PCR技術擴增CRMP4目的基因片段,與病毒載體連接,經(jīng)過PCR、酶切和鑒定后與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)293T細胞,制備慢病毒載體,之后感染海馬神經(jīng)元,觀察神經(jīng)元突起生長的變化,并進行定量分析。結(jié)果擴增出CRMP4目的基因,成功構(gòu)建CRMP4慢病毒載體,病毒滴度為1.0×107~1.0×108U/ml;對照細胞轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒后見GFP表達,分布于神經(jīng)元的胞體和突起,細胞隨著發(fā)育不斷極化,分化出樹突和軸突,突起不斷延長;過表達CRMP4后,可見神經(jīng)元的突起延長,分支較對照組增多;定量結(jié)果顯示,神經(jīng)元突起總長度包括樹突和軸突均較對照組增多,分支數(shù)目亦較對照組增多,差異顯著(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建了攜帶大鼠CRMP4基因的慢病毒表達載體;過表達CRMP4基因可以促進神經(jīng)元突起的生長。
【作者單位】: 暨南大學醫(yī)學院解剖學系;暨南大學醫(yī)學院中西醫(yī)結(jié)合博士后流動站;暨南大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;暨南大學醫(yī)學院病理生理學系;
【基金】:國家自然科學基金(31170941) 廣東省自然科學基金項目(S2013010014191) 中國博士后基金(2014M562252) 廣東省醫(yī)學科研基金(A2014382)
【分類號】:R373
【正文快照】: 神經(jīng)元外觀上區(qū)別于其他組織細胞的一個顯著特征是具有長短不一的突起,它們借助突觸構(gòu)建出一個相互聯(lián)系又分工協(xié)作的神經(jīng)網(wǎng)絡,完成感覺和運動信息的傳遞、學習和記憶、認知和情緒等不同的功能。急性創(chuàng)傷切斷這些突起,如脊髓橫斷損傷,或者一些退行性疾病,如帕金森病黑質(zhì)神經(jīng)元
【共引文獻】
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