本文關(guān)鍵詞：大鼠毛囊干細(xì)胞的鑒定及選擇其最適培養(yǎng)液的研究

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【摘要】：目的：對(duì)所培養(yǎng)的毛囊干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,并比較3種不同培養(yǎng)基對(duì)于大鼠毛囊干細(xì)胞增殖情況的影響。方法：取潔凈SD大鼠乳鼠觸須部組織,聯(lián)合使用顯微分離技術(shù)+中性蛋白酶Ⅱ消化+胰蛋白酶和乙二胺四乙酸混合液消化法獲得細(xì)胞懸液,使用Ⅳ型膠原差速貼壁法篩選毛囊干細(xì)胞。通過(guò)倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)特征,吉姆薩染色、流式細(xì)胞儀CD34、β1-整合素(CD29)及CK15檢測(cè),成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色、成脂誘導(dǎo)后油紅O檢測(cè)聯(lián)合用于鑒定所獲得細(xì)胞為具有多向分化能力的毛囊干細(xì)胞。之后取顯微分離法+二部酶消化法所得細(xì)胞懸液計(jì)數(shù)后按細(xì)胞量平均分為3組,分別使用DMEM/F12培養(yǎng)+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清、角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基以及角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清分三組進(jìn)行培養(yǎng),從細(xì)胞活率、生長(zhǎng)曲線、流式細(xì)胞儀鑒定標(biāo)記物幾個(gè)方面對(duì)三組培養(yǎng)后的干細(xì)胞進(jìn)行比較,從而間接判斷三種不同培養(yǎng)基對(duì)于毛囊干細(xì)胞增殖所產(chǎn)生的影響。結(jié)果：大鼠毛囊干細(xì)胞生長(zhǎng)狀況良好,CK15、CD34、β1-整合素(CD29)表達(dá)陽(yáng)性,成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色陽(yáng)性、成脂誘導(dǎo)后油紅O陽(yáng)性,此3組間細(xì)胞活率差異無(wú)顯著性意義(P0.05)。生長(zhǎng)曲線顯示：生長(zhǎng)速度角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清DMEM/F12培養(yǎng)+體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基(P0.05)。DMEM/F12+10%胎牛血清組中CK15、CD34、β1-整合素(CD29)表達(dá)均低于其他2組(P0.05),角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基組CD34的表達(dá)高于角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基+10%胎牛血清組(P0.05),β1-整合素(CD29)及CK15則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論：使用上述方法培養(yǎng)的大鼠毛囊干細(xì)胞生長(zhǎng)狀況良好,具有毛囊干細(xì)胞表面標(biāo)志物,并具有多向分化能力。角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基較DMEM/F12+10%胎牛血清能培養(yǎng)出純度更高的毛囊干細(xì)胞,且在此培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加入胎牛血清,能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：大鼠 毛囊干細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 增殖
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-7
• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 前言10-13
• 研究?jī)?nèi)容與方法13-24
• 結(jié)果24-30
• 討論30-39
• 小結(jié)39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述45-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文52-53
• 導(dǎo)師評(píng)閱表53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1110780