本文關(guān)鍵詞：聚乙烯亞胺-蛋白納米復(fù)合體轉(zhuǎn)染蛋白進(jìn)入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的應(yīng)用研究

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【摘要】：目的:探索納米材料聚乙烯亞胺(PEI)攜載不同分子量的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(h BMSCs)的作用及優(yōu)化其最佳配比條件。方法:利用物理化學(xué)作用構(gòu)建6組PEI-DNase I(DNA酶I)復(fù)合體,運(yùn)用激光散射技術(shù)初步摸索其最佳摩爾比,用透射電鏡直觀復(fù)原納米-蛋白復(fù)合體外貌;同時,原代分離培養(yǎng)健康人的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并進(jìn)行體外擴(kuò)增,通過構(gòu)建成功的4組PEI-GFP(綠色熒光蛋白)納米蛋白復(fù)合體對h BMSCs進(jìn)行轉(zhuǎn)染,共聚焦熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)情況,再通過MTT法檢測該復(fù)合體對細(xì)胞增殖的毒性影響,并用β-半乳糖苷酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其轉(zhuǎn)入蛋白的活性表現(xiàn)。結(jié)果:當(dāng)PEI與蛋白質(zhì)的摩爾比為4∶1時,形成的復(fù)合體轉(zhuǎn)染效率最高,β-半乳糖苷酶實(shí)驗(yàn)細(xì)胞染色變藍(lán)。結(jié)論:PEI能與蛋白質(zhì)形成納米復(fù)合體,并能轉(zhuǎn)染多種蛋白質(zhì)進(jìn)入人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,所轉(zhuǎn)染的蛋白質(zhì)分子仍具有活性,為細(xì)胞重編程技術(shù)提供了新途徑。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué);廣東省人民醫(yī)院/廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 廣東省心血管病研究所;廣東省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科;
【關(guān)鍵詞】： 聚乙烯亞胺 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目(No.81120108003;No.81330007)
【分類號】：R3411
【正文快照】： 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染技術(shù)是一門新興的轉(zhuǎn)染技術(shù),是直接把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)入活細(xì)胞的過程。目標(biāo)蛋白質(zhì)一般要在載體的幫助下,與載體形成復(fù)合體而被轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞有非常重要的科研價值和應(yīng)用前景,主要研究有:(1)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;(2)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)

【共引文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 關(guān)秀文;基因和藥物共傳遞體系的制備與研究[D];長春理工大學(xué);2014年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 盧雪梅;黃演婷;金小寶;汪潔;朱家勇;;肝靶向穿膜肽與家蠅天蠶素基因的融合及其分子特征分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2012年03期

3 盧雪梅;黃演婷;金小寶;汪潔;朱家勇;;HTPP-MDC原核表達(dá)載體的構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)[J];化學(xué)與生物工程;2012年05期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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4 李經(jīng)忠,王青青,余海,沈芬平,吳萍萍;聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)基因影響因素的測定及其優(yōu)化[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2004年02期

5 徐松琳;金拓;;新型聚乙烯亞胺衍生物體內(nèi)轉(zhuǎn)染活性的研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年12期

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7 陳曉愛;鄧宇斌;;納米載體多聚乙烯亞胺介導(dǎo)基因治療的研究進(jìn)展[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2011年01期

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9 唐秋莎;張東生;顧寧;叢小明;萬美玲;金立強(qiáng);;聚乙烯亞胺在錳鋅鐵氧體納米粒子表面定量吸附[J];東南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2007年05期

10 陳，

本文編號：1091931