本文關鍵詞：ASIC3在癢覺感受中的作用

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【摘要】：酸敏感離子通道(acid-sensing ion channels,ASICs)是廣泛分布于中樞和外周神經系統(tǒng)的一類由細胞外質子和非質子配體激活的非選擇性陽離子通道。哺乳類動物目前已知有四種ASIC基因,編碼至少六種亞基,以同源或異源三聚體形式組成功能性通道。ASIC3主要在外周感覺神經元和非神經細胞表達,在機械感受、痛覺感受中發(fā)揮重要作用,但其是否參與癢覺感受尚不清楚。利用ASIC3基因敲除小鼠模型和行為學分析,我們發(fā)現ASIC3在酸性條件下可增強多肽致癢劑SL-NH_2導致的癢覺行為。電生理研究顯示SL-NH_2可減慢ASIC3通道激活后的脫敏過程,從而增強通道的活性。SL-NH_2對ASIC的調控作用具有亞基選擇性,只對ASIC3組成的同聚體或異聚體有調控作用。多肽合成與結構-活性分析結果表明SL-NH_2多肽鏈上的精氨酸殘基以及ASIC3通道上非質子配體感受域中Glu-79和Glu-423對該調控作用至關重要,替代其中任一氨基酸殘基都幾乎完全取消SL-NH_2對ASIC3脫敏的作用。小鼠對具有不同SL-NH_2受體活性和ASIC3脫敏作用的多肽的致癢反應結果表明酸性條件下SL-NH_2的致癢作用的增強依賴于ASIC3,與SL-NH_2受體無關。我們的研究證實了ASIC3參與酸性條件下對SL-NH_2的致癢作用的調控,提出SL-NH_2通過減慢ASIC3通道的脫敏,從而增強酸性條件下SL-NH_2的致癢作用的新型癢覺感受調控機制。我們的研究成果將有助于尋找新的控制癢覺的臨床方案。
【關鍵詞】：酸敏感離子通道 癢覺 SL-NH_2 脫敏 非質子配體感受域
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R339.1
【目錄】：

• 摘要5-6
• abstract6-11
• 總論11-13
• 本文擬解決的科學問題11
• 研究目的和意義11-12
• 研究內容12-13
• 第一章 ASIC3調控小鼠癢覺感受13-54
• 1.1 摘要13
• 1.2 緒論13-25
• 1.2.1 癢覺的分類與癢覺信號的產生13-14
• 1.2.2 致癢劑與癢覺受體14-19
• 1.2.3 癢覺和痛覺信號的區(qū)分19-21
• 1.2.4 癢覺信號在中樞神經系統(tǒng)中的傳導21-24
• 1.2.5 痛覺感受器在癢覺感受中的作用24-25
• 1.3 實驗材料和方法25-28
• 1.3.1 實驗動物和癢覺行為實驗25
• 1.3.2 小鼠DRG神經元的分離和培養(yǎng)25-26
• 1.3.2.1 蓋玻片的處理和包被25-26
• 1.3.2.2 背根神經節(jié)細胞的分離和培養(yǎng)26
• 1.3.3 細胞培養(yǎng)與轉染26-27
• 1.3.4 電生理記錄27-28
• 1.3.4.1 溶液的配制27
• 1.3.4.2 給藥系統(tǒng)27
• 1.3.4.3 膜片鉗記錄27-28
• 1.3.5 試劑和數據分析28
• 1.4 實驗結果28-37
• 1.4.1 致癢劑對ASIC3的直接作用28-30
• 1.4.2 致癢劑對ASIC3的調控作用30-33
• 1.4.3 ASIC3介導酸性條件下SL-NH_2誘導的癢覺增強33-35
• 1.4.4 SL-NH_2誘導的癢覺依賴于TRPA1通道的開放35-37
• 1.5 討論37-39
• 1.6 參考文獻39-54
• 第二章 SL-NH_2結合到ASIC3非質子配體感受域調控通道脫敏54-102
• 2.1 摘要54
• 2.2 緒論54-61
• 2.2.1 ASICs的分布與功能55-56
• 2.2.2 ASICs結構與門控56-60
• 2.2.3 ASICs脫敏及調控60-61
• 2.3 實驗材料和方法61-63
• 2.3.1 小鼠DRG神經元的分離和培養(yǎng)61
• 2.3.2 細胞培養(yǎng)與轉染61
• 2.3.3 突變體質粒構建61-62
• 2.3.4 電生理記錄62-63
• 2.3.5 試劑和數據分析63
• 2.4 實驗結果63-87
• 2.4.1 SL-NH_2調控ASIC3脫敏的濃度依賴性63-66
• 2.4.2 SL-NH_2調控ASIC3脫敏的p H依賴性66-69
• 2.4.3 持續(xù)酸化條件下SL-NH_2對ASIC3的調控69-71
• 2.4.4 SL-NH_2對ASIC3的調控不依賴于胞內信號通路71-73
• 2.4.5 非質子配體感受域介導SL-NH_2對ASIC3的調控73-76
• 2.4.6 SL-NH_2調控ASIC3脫敏的關鍵氨基酸76-81
• 2.4.7 SL-NH_2對ASICs的調控具有亞基選擇性81-84
• 2.4.8 SL-NH_2調控DRG神經元上酸誘導的電流的脫敏84-87
• 2.5 討論87-90
• 2.6 參考文獻90-102
• 第三章 ASIC3的調控對癢覺感受的影響102-126
• 3.1 摘要102
• 3.2 緒論102-107
• 3.2.1 ASICs功能調控102-104
• 3.2.2 ASICs在外周神經系統(tǒng)中的功能104-105
• 3.2.3 ASICs在中樞神經系統(tǒng)中的功能105-107
• 3.3 實驗材料和方法107-108
• 3.3.1 實驗動物和癢覺行為實驗107
• 3.3.2 小鼠DRG神經元的分離和培養(yǎng)107
• 3.3.3 細胞培養(yǎng)與轉染107
• 3.3.4 電生理記錄107
• 3.3.5 試劑和數據分析107-108
• 3.4 實驗結果108-114
• 3.4.1 ASIC3脫敏的調控影響癢覺感受108-110
• 3.4.2 對ASIC3的調控影響致癢劑誘導的癢覺感受110-112
• 3.4.3 ASIC3調控SL-NH_2誘導的癢覺依賴于ASIC3的激活112-114
• 3.5 討論114-115
• 3.6 參考文獻115-126
• 第四章 全文總結與研究展望126-130
• 4.1 全文總結126-128
• 4.2 研究展望128-130
• 附錄130-137
• 縮略詞表130-135
• 儀器設備135-137
• 致謝137-139
• 在讀期間發(fā)表的學術論文與取得的研究成果139
• 學術論文139
• 會議摘要139

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 ;Oxidative stress induces itch via activation of transient receptor potential subtype ankyrin 1 in mice[J];Neuroscience Bulletin;2012年02期

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本文編號：1085901