發(fā)布時(shí)間：2017-10-16 13:17

  本文關(guān)鍵詞：維生素C對(duì)TNF-α及血清剝奪誘導(dǎo)的人髓核細(xì)胞凋亡的作用

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【摘要】：目的探討維生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剝奪誘導(dǎo)人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制。方法取脊柱矯形手術(shù)患者的髓核組織,消化法獲得正常髓核細(xì)胞,取第3代細(xì)胞按不同處理因素分為Vit C作用組(A組)、TNF-α誘導(dǎo)組(B組)和血清剝奪組(C組),每組再分為以下亞組:A組分為A1組(基礎(chǔ)培養(yǎng)液)、A2組(100μg/m L Vit C)、A3組(200μg/m L Vit C);B組分為B0組(對(duì)照組)、B1組(100 ng/m L TNF-α)、B2組(100μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α)、B3組(200μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α);C組分為C0組(對(duì)照組)、C1組(FBS濃度由8%降低為2%)、C2組(2%FBS+100μg/m L Vit C)、C3組(2%FBS+200μg/m L Vit C)。各組作用24 h后,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組膜聯(lián)蛋白V、碘化丙啶雙染后髓核細(xì)胞凋亡率;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)p53(基因編碼相對(duì)分子質(zhì)量為53×103的蛋白質(zhì))、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、Sox9和糖胺多糖(Aggrecan)m RNA表達(dá)。結(jié)果 A組:與A1組比較,A2、A3組的Vit C均能降低髓核細(xì)胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表達(dá)(P0.05),但A2、A3組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);A2、A3組的Vit C可促進(jìn)髓核細(xì)胞Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、Aggrecan、Sox9 m RNA表達(dá),且A3組促進(jìn)作用顯著大于A2組(P0.05)。B組:與B0組比較,B1組TNF-α促進(jìn)了髓核細(xì)胞凋亡,增加了髓核細(xì)胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表達(dá)(P0.05);與B1組比較,B3組的Vit C能降低髓核細(xì)胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表達(dá),而B(niǎo)2組的Vit C則增加其凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表達(dá),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C組:與C0組比較,C1組2%FBS能誘導(dǎo)髓核細(xì)胞凋亡,但降低了髓核細(xì)胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表達(dá)(P0.05);與C1組比較,C3組的Vit C能降低髓核細(xì)胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表達(dá),而C2組的Vit C則增加其凋亡及p53、FAS m RNA表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 Vit C能延緩或降低髓核細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成與分泌,200μg/m L Vit C可延緩或降低100 ng/m L TNF-α和2%FBS誘導(dǎo)的凋亡,而100μg/m L Vit C則促進(jìn)其誘導(dǎo)的凋亡。
【作者單位】： 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院第四附屬醫(yī)院;廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院廣州市創(chuàng)傷外科研究所;廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院骨科;廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院;西澳大利亞大學(xué)外科學(xué)院病理學(xué)和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 維生素C 髓核細(xì)胞 TNF-α 血清剝奪 細(xì)胞凋亡 椎間盤(pán)退變
【基金】：廣東省科技廳一般引導(dǎo)項(xiàng)目(2012B031800338、2013B021800042、2013B021800070) 廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013J4100099、2013J4100100、2014J4100075) 廣州市醫(yī)藥科技一般引導(dǎo)項(xiàng)目(20121A011046、20131A010007) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81272222、81228013) 廣東省自然科學(xué)基金(S2013010015184)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 椎間盤(pán)是人體最大的無(wú)血運(yùn)組織,主要靠其上下的軟骨終板滲透等被動(dòng)擴(kuò)散方式獲得營(yíng)養(yǎng),營(yíng)養(yǎng)相對(duì)缺乏,且髓核細(xì)胞自我修復(fù)能力低。目前研究表明[1],椎間盤(pán)退變是多種因素協(xié)同作用的結(jié)果,多因素作用下髓核細(xì)胞的過(guò)度凋亡使得細(xì)胞外基質(zhì)合成減少和成分改變,從而導(dǎo)致椎間盤(pán)發(fā)生退行

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9 陳，

本文編號(hào)：1042883