應(yīng)用變性高效液相色譜法對蜱傳立克次體的鑒定和分型
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【摘要】:目的建立PCR-DHPLC檢測法,對5種蜱傳人類致病性立克次體進行準(zhǔn)確、快速的分型檢測。方法針對蜱傳5種致病性立克次體的Osp A為靶基因進行PCR擴增,本研究所用目的片段為合成片段,連接于18-T載體,選用1對特異性通用引物擴增此片段。擴增產(chǎn)物長度分別為513 bp、533 bp、533 bp、533 bp、533 bp。應(yīng)用42株菌株進行特異性實驗,建立PCR-DHPLC反應(yīng)體系,并將此方法應(yīng)用到實際樣本檢測。結(jié)果應(yīng)用PCR-DHPLC技術(shù)可很好的區(qū)分5種致病菌,在核酸水平上達0.01 pg/μl。實際樣本的峰型與標(biāo)準(zhǔn)峰型有較好對應(yīng)性。結(jié)論 PCR-DHPLC法在實際樣本檢測中具有靈敏性和特異性。
【作者單位】: 吉林出入境檢驗檢疫局;吉林大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 南非立克次體 西伯利亞立克次體 立氏立克次體 康氏立克次體 黑龍江立克次體 變性高效液相色譜
【基金】:吉林省科技發(fā)展計劃項目(201105024)
【分類號】:R376
【正文快照】: 立克次氏體(Rickettsia)為革蘭陰性菌,主要在細胞內(nèi)繁殖,是一類專性寄生于真核細胞內(nèi)介于細菌與病毒之間而接近于細菌的一類原核生物,主要寄生于節(jié)肢動物,通過蜱媒傳播引起人畜共患疾病,引起斑疹傷寒、戰(zhàn)壕熱等疾病,在世界范圍分布。由于立克次體病的多樣性和復(fù)雜性,呈現(xiàn)了臨
【相似文獻】
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,本文編號:1020758
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