本文關鍵詞：一種高產(chǎn)組織芯片制作方法的建立、應用與轉化

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【摘要】：第一部分一種高產(chǎn)組織芯片技術的建立背景 組織芯片(tissue chip),又稱組織微陣列(tissue microarray,TMA)是一種高通量、多樣本的分析工具。然而傳統(tǒng)組織芯片受原始蠟塊厚度的限制,產(chǎn)量有限。因此,我們致力于建立一種高產(chǎn)的組織芯片制作方法。目的建立一種高產(chǎn)的組織芯片技術。材料和方法 1)選擇復旦大學附屬中山醫(yī)院病理科2001年1月-2012年7月胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)標本150例。 2)利用我們建立的組織芯片制作技術分別制作了含70例GSIT的組織芯片蠟塊和GIST耐藥標本組織芯片蠟塊,并進行CD117免疫組織化學染色和c-KIT、PDGFRα基因檢測。 3)利用我們建立的方法和傳統(tǒng)組織芯片制作技術制作一混合組織芯片,連續(xù)切片并記錄各芯條脫失時的芯條張數(shù)。 結果 1)在70例GIST組織芯片中,組織芯條排列整齊,無移位,無缺失,組織代表性好,蛋白保存完整,基因信息未丟失。 2)在20例GIST混合組織芯片中,傳統(tǒng)組織芯片技術制作區(qū)域產(chǎn)量(100張)；而新方法制作的組織芯片區(qū)域產(chǎn)量可達1500張。 3)在GIST耐藥標本組織芯片中,高產(chǎn)組織芯片技術可以實現(xiàn)再次向組織芯片蠟塊中增加樣本,二次成型,甚至多次成型。 4)在高產(chǎn)組織芯片制作中,我們申請了相關專利8項,己授權5項。 結論 1)高產(chǎn)組織芯片制作方法步驟簡單,摒棄了昂貴的組織芯片點樣儀設備和繁瑣的接種步驟。 2)高產(chǎn)組織芯片蠟塊可完好保存蛋白和基因等信息。 3)相對于傳統(tǒng)組織芯片制作方法,本方法能夠獲得更大的組織芯片產(chǎn)量。 第二部分高產(chǎn)組織芯片技術的應用 一、應用高產(chǎn)組織芯片技術研究甲狀腺轉錄因子-1在乳腺癌中的表達及意義 目的 甲狀腺轉錄因子-1(thyroid transcription factor-1, TTF-1)主要表達于甲狀腺癌和肺腺癌,常作為發(fā)生在這些部位腫瘤的輔助診斷指標。本研究篩查TTF-1在乳腺癌中的表達狀況,討論其病理診斷及鑒別診斷意義。 方法 制備含70例乳腺癌標本的組織芯片,用免疫組織化學方法檢測TTF-1的表達狀況。 結果 70例乳腺癌組織芯片標本中,2例表達TTF-1,陽性率為2.9%,陽性定位于細胞核,均為彌漫強陽性。其中1例為浸潤性導管癌2級,1例為浸潤性小葉癌。結論 乳腺癌中可出現(xiàn)TTF-1的表達,雖然發(fā)生率低,但是在腫瘤中出現(xiàn)TTF-1陽性表達并不能除外乳腺癌的可能,在日常病理工作中尤其是在判斷轉移性腫瘤原發(fā)部位時,需要引起注意。 二、應用高產(chǎn)組織芯片技術進行原發(fā)性食管神經(jīng)內(nèi)分泌癌的免疫組織化學研究 目的 探索新的食管神經(jīng)內(nèi)分泌癌(neuroendocrine carcinoma, NEC)輔助診斷指標。 方法 用高產(chǎn)組織芯片技術制作食管NEC組織芯片,同時制作食管鱗狀細胞癌組織芯片用作對照,然后進行免疫組織化學指標P63、HCK、CHG、CD56、SYN、 TTF-1、SSR2、SSR5、P16、CD117等的檢測。 結果 1)P16均為100%彌漫強陽性表達。 2)TTF1-只在神經(jīng)內(nèi)分泌癌中表達(60%),而CDl17在SCC伴NED和SCC中可有表達(40%,5.3%),但在陽性率及陽性范圍、陽性強度均不及NEC(95%)。 3)SSR2在食管NEC、SCC伴NED、SCC三組中的陽性率分別為40%、40% 和19.3%,SSR5在食管NEC、SCC伴NED、SCC三組中的陽性率分別為70%、70%、15.8%。 結論 1) P16均為100%彌漫強陽性表達,無鑒別診斷價值。 2) TTF-1、CD117可作為食管SCC及食管NEC的鑒別診斷指標。 3) SSR2、SSR5在食管NEC、SCC伴NED、SCC三組中均有一定的陽性表達率,為進一步研究生長抑素在食管癌中的抗腫瘤作用提供了理論依據(jù)。 第三部分高產(chǎn)組織芯片技術的轉化與推廣
【關鍵詞】：組織芯片 高產(chǎn)量 腫瘤研究 乳腺腫瘤 食管腫瘤 甲狀腺轉錄因子-1 神經(jīng)內(nèi)分泌癌
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R361.2
【目錄】：

• 英文縮略語注釋3-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-13
• 第一部分 高產(chǎn)組織芯片的建立13-24
• 一、高產(chǎn)組織芯片技術的發(fā)明13
• 二、高產(chǎn)組織芯片有效性的驗證13-18
• 三、高產(chǎn)組織芯片與傳統(tǒng)組織芯片的比較18-21
• 四、高產(chǎn)組織芯片多次接種的研究21-23
• 五、申請專利23-24
• 第二部分 高產(chǎn)組織芯片技術的應用24-38
• 一、高產(chǎn)組織芯片技術研究甲狀腺轉錄因子-1在乳腺癌中的表達及意義24-28
• 背景24
• 材料與方法24-25
• 結果25-26
• 討論26-28
• 小結28
• 二、高產(chǎn)組織芯片技術在原發(fā)性食管神經(jīng)內(nèi)分泌癌的免疫組織化學研究28-38
• 背景28
• 材料和方法28-30
• 結果30-34
• 討論34-37
• 小結37-38
• 第三部分 高產(chǎn)組織芯片技術的轉化與推廣38-39
• 全文總結39
• 參考文獻39-42
• 綜述42-51
• 參考文獻47-51
• 碩士期間研究成果51-54
• 致謝54-56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 Laurine Verset;Marianna Arvanitakis;Patricia Loi;Jean Closset;Myriam Delhaye;Myriam Remmelink;Pieter Demetter;;TTF-1 positive small cell cancers:Don't think they're always primary pulmonary![J];World Journal of Gastrointestinal Oncology;2011年10期

2 張寶燕;李向紅;崔海宏;;CD56、嗜鉻蛋白A和突觸素在小細胞肺癌中的表達及其臨床診斷價值[J];診斷病理學雜志;2009年05期

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本文編號：1004936