本文關(guān)鍵詞：柯薩奇病毒A組16型不同純化方法的比較研究

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【摘要】：目的評價不同方法純化柯薩奇病毒A組16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的可行性和有效性。方法將CA16病毒收獲液經(jīng)切向流超濾濃縮后,分別進行離心、氯仿抽提、分子篩和蔗糖墊層/梯度離心,按《中國藥典》(三部)(2010版)的檢定要求檢測不同純化方法得到的樣品,檢測指標包括:感染性滴度、抗原含量、蛋白含量、比活性、HPLC純度、殘余牛血清白蛋白、殘余抗生素、免疫原性。結(jié)果從比活性來看,分子篩純化法是其他方法的2~21倍,明顯優(yōu)于其他工藝;經(jīng)HPLC檢測,分子篩純化樣品純度98%,而其他工藝均在50%以下;分子篩法所得純化樣品中牛血清白蛋白殘留量符合《中國藥典》要求(50ng/劑),去除率達99.97%;分子篩法和蔗糖墊層/梯度離心法所得純化樣品中抗生素殘留量符合《中國藥典》要求(50ng/劑),分子篩法去除率在80%以上;從免疫小鼠后的抗體陽轉(zhuǎn)率來看,離心和氯仿抽提樣品組陽轉(zhuǎn)率為100%,分子篩組為80%,蔗糖離心組為50%;從抗體幾何平均滴度(geometric mean titer,GMT)來看,氯仿抽提組最高,為1∶912。結(jié)論以Sepharose 6Fast Flow作為層析介質(zhì)的分子篩法可得到高純度的CA16病毒,綜合分析,該法是CA16較為理想的純化方法
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 柯薩奇病毒A組型 純化方法 質(zhì)量控制
【基金】：云南省科技計劃項目(2013FZ134,2012BC006)
【分類號】：R373.23
【正文快照】： 腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯薩奇病毒A組16型(Coxsackievirus A16)是手足口病的兩類主要病原體。EV71全病毒滅活疫苗已經(jīng)完成臨床研究[1],而CA16疫苗的研發(fā)相對滯后。病毒的純化工藝研究是疫苗研究的重要方面,也是疫苗質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)。病毒純化方法有蔗糖/氯化

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本文編號：1003532