本文關(guān)鍵詞：人臍帶血間充質(zhì)干細胞移植改善大鼠缺血性腦梗死免疫炎性反應(yīng)的研究

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【摘要】：目的研究人臍帶血間充質(zhì)干細胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,h UCB-MSCs)移植對大鼠腦梗死炎性因子表達和調(diào)節(jié)性T細胞(Regulatory T cell,Treg)數(shù)量及神經(jīng)功能缺損的影響。方法40只健康雄性SD大鼠,隨機分成四組,分別是(1)假手術(shù)組(n=10)(2)缺血再灌注組(n=10)(3)MSC組(n=10)(4)生理鹽水組(n=10)。假手術(shù)組大鼠只分離出頸部動脈,其余三組均采用改良Longa線栓法制作大鼠右側(cè)大腦中動脈缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)。無菌條件下采集臍帶血100ml,體外分離h UCB-MSCs并傳代培養(yǎng),選擇第6代培養(yǎng)的干細胞做治療移植用。內(nèi)含1ml 1×106個h UCB-MSCs的懸液經(jīng)尾靜脈注射入MSC組,將等量的生理鹽水采用同樣的方式注射到生理鹽水組。分別于缺血前、缺血后30min、缺血再灌注2h、3h、6h測定各組實驗動物血清中的白細胞介素-6(interleukin IL-6)、γ干擾素(interferon IFN-γ)、IL-10、轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor TGF-β)水平變化,評價h UCB-MSCs移植調(diào)節(jié)大鼠腦梗死后炎性反應(yīng)的效果。于1、3、7、14d對大鼠神經(jīng)功能進行評分,并檢測外周血中Treg細胞表達,評價h UCB-MSCs移植對實驗動物的神經(jīng)保護機制。結(jié)果MSC組、缺血再灌注組和生理鹽水組缺血后IL-6、IFN-γ水平升高,分別在缺血再灌注2h、缺血后30min達高峰,MSC組顯著小于缺血再灌注組和生理鹽水組;缺血后IL-10、TGF-β水平缺血再灌注組和生理鹽水組降低,MSC組升高。在缺血再灌注3、7、14d,缺血再灌注組和生理鹽水組的神經(jīng)功能缺損評分顯著高于MSC組(P0.05)。缺血后7、14d缺血再灌注組和生理鹽水組Treg細胞表達較假手術(shù)組明顯升高(P0.05);MSC組3、7、14d Treg細胞表達明顯高于缺血再灌注組和生理鹽水組(P0.05)。結(jié)論h UCB-MSCs移植可誘導CD4+CD25+Treg細胞增殖,促炎性因子IL-6、IFN-γ的水平下降,抗炎性因子IL-10、TGF-β的水平升高,減輕免疫炎性反應(yīng),促進缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能缺損的恢復,從而減輕大鼠的缺血性腦損傷,具有神經(jīng)保護作用。
【關(guān)鍵詞】：臍血間充質(zhì)干細胞 缺血再灌注 炎性因子 調(diào)節(jié)性T細胞 免疫炎性反應(yīng)
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R743.3
【目錄】：

• 中英文縮略詞表6-8
• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-12
• 1.前言12-16
• 2.材料與方法16-19
• 2.1 主要儀器和試劑16
• 2.2 動物模型制備及分組16-17
• 2.3 實驗方法17-18
• 2.4 統(tǒng)計學方法18-19
• 3.結(jié)果19-25
• 3.1 h UCB-MSCs分離及鑒定19-21
• 3.2 各組神經(jīng)功能缺損評分比較21-22
• 3.3 各組血清炎性因子水平比較22-24
• 3.4 各組外周血中CD4+CD25+Treg細胞占CD4+T細胞百分比24-25
• 4.討論25-30
• 4.1 動物模型的選擇及設(shè)計25-26
• 4.2 h UCB-MSCs移植治療缺血性腦梗死的可能機制26-27
• 4.3 h UCB-MSCs移植調(diào)節(jié)大鼠腦缺血再灌注損傷的免疫炎性反應(yīng)27-28
• 4.4 h UCB-MSCs移植后外周血中CD4+CD25+Treg細胞的表達變化28-29
• 4.5 小結(jié)29-30
• 5.結(jié)論30-31
• 參考文獻31-36
• 附錄36-37
• 致謝37-38
• 綜述38-51
• 參考文獻46-51

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本文編號：761988