本文關(guān)鍵詞：酪氨酸激酶2（DDR2）和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： 人腦膠質(zhì)瘤 DDR2 VEGF 免疫組化 Western blot

【摘要】：目的:通過(guò)對(duì)不同級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組織及正常腦組織中的酪氨酸激酶2及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子蛋白表達(dá)含量的測(cè)定,探討膠質(zhì)瘤中酪氨酸激酶2和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)意義及兩者的相關(guān)性。方法:收集自2013年5月-2014年10月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科腦膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本85例,其中WHO分級(jí)I級(jí)腦膠質(zhì)瘤14例,II級(jí)腦膠質(zhì)瘤27例,III級(jí)腦膠質(zhì)瘤25例,IV級(jí)腦膠質(zhì)瘤19例。所取病例標(biāo)本病理診斷均由河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院病理科按照WHO腦腫瘤分級(jí)診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。正常腦組織標(biāo)本取自因腦外傷或者腦出血患者需做顱內(nèi)減壓術(shù)所取的腦組織標(biāo)本,共取15例作為對(duì)照組。本實(shí)驗(yàn)所取腦膠質(zhì)瘤病理均為入院后初次診斷,手術(shù)前均未經(jīng)過(guò)任何放化療等抗腫瘤治療。所有實(shí)驗(yàn)用標(biāo)本,均于術(shù)中切下病理組織后立即取材,10%的福爾馬林固定及液氮罐-80℃保存。將以上標(biāo)本分為五組:正常腦組織組,I級(jí)膠質(zhì)瘤組,II級(jí)膠質(zhì)瘤組,III級(jí)膠質(zhì)瘤組,IV級(jí)膠質(zhì)瘤組。采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)VEGF和DDR2在上述五組病理組織切片中的表達(dá)情況,并用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0分析其表達(dá)特點(diǎn)及相關(guān)性,采用免疫熒光法檢測(cè)VEGF和DDR2在同一切片中表達(dá)情況并觀測(cè)兩種因子表達(dá)特點(diǎn)。應(yīng)用Western Blot法同測(cè)定上述五組標(biāo)本VEGF和DDR2的蛋白條帶,并應(yīng)用相關(guān)軟件檢測(cè)五組條帶的灰度值,應(yīng)用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1免疫組化果顯示:VEGF在正常腦組織、I級(jí)腦膠質(zhì)瘤、II級(jí)腦膠質(zhì)瘤、III級(jí)腦膠質(zhì)瘤、IV級(jí)腦膠質(zhì)瘤表達(dá)陽(yáng)性率分別為6.67%、71.43%、88.89%、100.00%、100.00%,隨著腫瘤惡性程度增高,VEGF表達(dá)量增加,Spearman等級(jí)相關(guān)得出相關(guān)系數(shù)r=0.698,P0.01,VEGF表達(dá)與腫瘤分級(jí)呈正相關(guān),即腫瘤分級(jí)越高,VEGF表達(dá)陽(yáng)性率越高,圖片見(jiàn):Fig1。統(tǒng)計(jì)圖表詳見(jiàn)Table 1、Table 3;2免疫組化結(jié)果顯示:DDR2在正常腦組織、I級(jí)腦膠質(zhì)瘤、II級(jí)腦膠質(zhì)瘤、III級(jí)腦膠質(zhì)瘤、IV級(jí)腦膠質(zhì)瘤表達(dá)陽(yáng)性率分別為33.33%、78.57%、88.89%、96.00%、100.00%,隨著腫瘤惡性程度增高,DDR2表達(dá)量增加,Spearman等級(jí)相關(guān)得出相關(guān)系數(shù)r=0.588,P0.01,DDR2表達(dá)與腫瘤分級(jí)呈正相關(guān),即腫瘤分級(jí)越高,DDR2表達(dá)陽(yáng)性率越高。圖片見(jiàn):Fig2詳見(jiàn)Table 2、Table 4;3對(duì)VEGF、DDR2的表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)性分析。Spearman等級(jí)相關(guān)得出相關(guān)系數(shù)r=0.928,P0.01,即VEGF表達(dá)與DDR2表達(dá)呈高度正相關(guān),即VEGF表達(dá)陽(yáng)性等級(jí)越高,DDR2表達(dá)陽(yáng)性等級(jí)越高,詳見(jiàn)Table 5;4采用免疫熒光雙標(biāo)法觀察同一病理組織中兩種因子分布情況。紅色熒光為VEGF因子,綠色熒光為DDR2因子,藍(lán)色熒光為細(xì)胞核�？梢�(jiàn)在同一組織中兩種因子的分布有聚集性。詳見(jiàn)Fig3、Fig4、Fig5;5蛋白含量:采用western blot方法對(duì)標(biāo)本的蛋白含量進(jìn)行測(cè)定。觀察DDR2、VEGF及action在正常腦組織、I級(jí)腦膠質(zhì)瘤、II級(jí)腦膠質(zhì)瘤、III級(jí)腦膠質(zhì)瘤、IV級(jí)腦膠質(zhì)瘤中的蛋白表達(dá)情況,結(jié)果以測(cè)定的灰度值為準(zhǔn)。分析VEGF、DDR2的相對(duì)表達(dá)量,VEGF的相對(duì)表達(dá)量逐漸升高,DDR2的相對(duì)表達(dá)量逐漸增高。各級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組分別與正常腦組織組向比較,采用單因素方差分析。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,P0.05,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見(jiàn)Table 6、Fig 6、Fig 7、Fig 8。結(jié)論:1與正常腦組織的對(duì)照組相比,各腦膠質(zhì)瘤組中的DDR2表達(dá)及VEGF表達(dá)明顯增高,且隨著腦膠質(zhì)瘤的級(jí)別增加表達(dá)增高越明顯,存在顯著性差異(P0.01)。2與正常腦組織的對(duì)照組相比,各腦膠質(zhì)瘤組中的DDR2及VEGF蛋白含量明顯增高,且隨著腦膠質(zhì)瘤級(jí)別增高,兩種因子所表達(dá)的蛋白表達(dá)越高。蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤級(jí)別存在正相關(guān)性。提示腫瘤的惡性水平在一定程度上可以影響著DDR2的蛋白含量的表達(dá)。3在免疫熒光圖片中可以見(jiàn)到,在多組標(biāo)本中,DDR2蛋白表達(dá)部位與VEGF蛋白表達(dá)部位是重合的。結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果,DDR2與VEGF存在一定的相關(guān)性。4通過(guò)對(duì)正常腦組織及不同級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組內(nèi)免疫組化結(jié)果進(jìn)行Spearman等級(jí)相關(guān)性分析,P0.01,VEGF表達(dá)與DDR2表達(dá)呈高度正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：人腦膠質(zhì)瘤 DDR2 VEGF 免疫組化 Western blot
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-23
• 結(jié)果23-25
• 附圖25-33
• 附表33-37
• 討論37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 綜述DDR2 和VEGF在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義及相關(guān)性43-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 致謝53-54
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 姜華;孫成法;褚榮濤;葉凱;黃煒;趙富文;丘佳明;王君祥;;人腦膠質(zhì)瘤MMP2/TIMP2與腫瘤血管的相關(guān)性分析[J];臨床神經(jīng)外科雜志;2014年06期

2 段澤星;謝立群;;VEGF在腫瘤生長(zhǎng)和血管生成中的作用[J];世界華人消化雜志;2010年27期

，

本文編號(hào)：724355