本文關鍵詞：腦紅蛋白對小鼠神經母細胞瘤細胞系生長速度的影響

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【摘要】：背景與目的腦紅蛋白(neuroglobin,Ngb)過去被認為在神經元細胞的特異性表達,然而現在在多種腫瘤細胞中也被發(fā)現存在表達。這說明Ngb除了參與低氧調節(jié)和保護神經元及腦組織免于缺血缺氧性損傷外,可能在腫瘤的發(fā)生、形成和代謝中也發(fā)揮了作用。迄今為止,揭露Ngb和腫瘤發(fā)生之間直接聯系的文章很少。然而,另兩個球蛋白家族的成員,肌紅蛋白(myoglobin,Mb)和細胞紅蛋白(cytoglobin,Cygb)已被多次報道參與了腫瘤的形成。其可能機制包括清除氧氮自由基,通過調節(jié)低氧誘導因子(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)表達,參與低氧環(huán)境下的適應,以及增加線粒體膜的穩(wěn)定性。這些過程說明球蛋白家族或多或少通過和細胞色素c之間的某種聯系,參與干擾細胞凋亡途徑。之前有研究通過人類免疫缺陷病毒1型反式激活因子(transactivator of transcription,TAT)蛋白轉導技術,使大分子Ngb蛋白成功穿過血腦屏障(blood-brain barrier,BBB)進入腦內,解決了Ngb進入腦內細胞發(fā)揮腦保護作用的瓶頸問題,使臨床應用成為可能。因此,實現臨床應用之前,去探索Ngb對腦腫瘤發(fā)生、發(fā)展的潛在影響具有重要意義。本研究擬通過探討Ngb是否在腦腫瘤細胞系中存在表達,并結合慢病毒載體介導,上調小鼠神經母細胞瘤細胞系N2a內Ngb的表達,來研究Ngb過表達狀態(tài)下細胞的生長和增殖情況,為將來深入其機制的研究奠定基礎,為Ngb在腦血管病的神經保護治療中的應用提供保障。方法1.通過逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、細胞免疫熒光、Western Blot的方法,檢查Ngb在小鼠神經母細胞瘤細胞系(N2a)、人類星形膠質細胞瘤細胞系(U251)、大鼠神經膠質瘤細胞系(C6)中的表達情況。2.將包裝好的Ngb過表達慢病毒導入N2a細胞,上調其表達。表達產物通過Western Blot鑒定,并進行進一步實驗去觀察處理組和對照組之間細胞的增殖情況,包括細胞活力檢測和克隆形成試驗。結果1.通過RT-PCR、免疫熒光檢查和Western Blot,表明Ngb在神經母細胞瘤細胞系(N2a)與腦膠質瘤細胞系(U251、C6)均有表達。2.感染Lenti-Ngb-GFP組的Ngb表達較對照組和Lenti-GFP組顯著升高。3.Lenti-Ngb-GFP感染組從第六天起細胞增值速度明顯快于其他組(P0.01)。在相同環(huán)境培養(yǎng)14天后,慢病毒感染組和對照組在克隆數量上未見差異。然而Lenti-Ngb-GFP組形成的細胞克隆平均大于Lenti-GFP組和對照組(P0.05)。結論1.通過RT-PCR、細胞免疫熒光的方法證實Ngb在多種腦腫瘤細胞系中存在表達。2.通過使用Lenti-Ngb-GFP感染N2a細胞,成功上調了N2a細胞內Ngb的表達。3.通過細胞增殖試驗和平板克隆形成試驗,證實Ngb表達上調可以加速腫瘤細胞的生長。
【關鍵詞】：腦紅蛋白 腦腫瘤 細胞增殖
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-25
• 1. 主要實驗材料、試劑及儀器12-15
• 1.1 實驗材料與試劑12-13
• 1.2 主要儀器設備13-14
• 1.3 常用試劑配制14-15
• 2. 實驗方法15-24
• 3. 統(tǒng)計方法及數據庫24
• 4. 數據庫24-25
• 結果25-31
• 1. Ngb在多種腫瘤細胞系中的表達情況25-26
• 2. 慢病毒感染N2a情況26-28
• 3. Ngb表達對N2a細胞生長的影響28-31
• 討論31-33
• 結論33-34
• 參考文獻34-39
• 綜述39-47
• 參考文獻44-47
• 致謝47

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1 李紅巖;孫善全;;腦紅蛋白與腦保護[J];醫(yī)學教育探索;2008年09期

2 劉娟,姚國恩,蔣曉江;腦紅蛋白[J];國外醫(yī)學(腦血管疾病分冊);2004年06期

3 劉昊;;腦紅蛋白的研究進展[J];華北煤炭醫(yī)學院學報;2006年06期

4 高貴山;于曉軍;徐小虎;;腦紅蛋白與腦損傷研究現狀[J];實用醫(yī)學雜志;2007年05期

5 劉振芳;張曉;張鏞;;腦紅蛋白及其在神經疾病中的作用[J];臨床神經病學雜志;2007年02期

6 秦力維;郭建巍;;腦紅蛋白-高原性眼疾診治的新方向[J];國際眼科雜志;2007年04期

7 陳秀蓮;陳瑞;高春錦;徐世明;張麗娟;王宏娟;;短暫前腦缺血小鼠海馬腦紅蛋白表達的動態(tài)變化[J];動物學雜志;2008年01期

8 張莉;李麗華;屈藝;母得志;;腦紅蛋白和缺氧缺血性腦損傷[J];中國當代兒科雜志;2008年02期

9 劉娟;姚國恩;蔣曉江;陳星云;;腦紅蛋白對大鼠局灶性腦缺血組織的保護作用[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年23期

10 黃飚;王德林;;腦紅蛋白的最新研究進展[J];廣東醫(yī)學;2010年11期

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1 陳婷方;張成崗;;腦紅蛋白轉錄調控的初步研究[A];中國神經科學學會第六屆學術會議暨學會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

2 徐佳;王艷麗;張兵兵;杜為紅;;遠端殘基突變對腦紅蛋白血紅素位移的影響[A];中國化學會第十五屆全國化學熱力學和熱分析學術會議論文摘要[C];2010年

3 蔡斌;林毅;王檸;;腦紅蛋白的神經保護機制研究進展[A];第十一屆全國神經病學學術會議論文匯編[C];2008年

4 劉超;閔蘇;;內毒素性腦損傷過程中腦紅蛋白的表達及意義[A];第十五次長江流域麻醉學學術年會暨2010年中南六省麻醉學學術年會暨2010年湖北省麻醉學學術年會論文集[C];2010年

5 周芯羽;陳曉釬;;腦紅蛋白對抗過氧化氫誘導的細胞損傷作用及其機制[A];湖北省暨武漢市病理生理學會第十四屆學術年會論文匯編[C];2008年

6 顧潔;金玉;尹梅;李玉梅;;亞低溫對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷腦紅蛋白表達的研究[A];西北五�。▍^(qū)）第六屆兒科學術交流大會論文匯編[C];2008年

7 劉超;孫善全;楊美;陳海;;內毒素導致的腦損傷過程中腦紅蛋白的表達上調[A];實驗動物與藥理學、毒理學研究學術交流會論文匯編[C];2009年

8 劉超;;在內毒素腦損傷大鼠模型中內毒素劑量和作用時間對腦紅蛋白表達的影響[A];第九屆中國生物毒素學術研討會論文摘要[C];2009年

9 尚愛加;周定標;張成崗;王利紅;;腦缺血再灌注損傷后腦紅蛋白的腦內表達變化及血清學變化[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經外科醫(yī)師分會首屆全國代表大會論文匯編[C];2005年

10 陳宣維;林建華;林文平;陳飛;韋超;;兔脊髓損傷后腦紅蛋白的表達變化及其意義[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復學術年會論文選集[C];2011年

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1 陳婷方;腦紅蛋白神經保護功能及其機制的初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2008年

2 章俊;腦紅蛋白在肝細胞肝癌中的表達、功能及機制的研究[D];華中科技大學;2012年

3 文圣梅;腦紅蛋白與胞紅蛋白抗氧化損傷的分子機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2007年

4 徐文琳;腦紅蛋白（NGB）作用的分子基礎及其在腦缺氧損傷防護中的意義[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2003年

5 鄒小明;深低溫停循環(huán)中腦紅蛋白表達及其腦損傷防護意義實驗研究[D];第一軍醫(yī)大學;2007年

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1 王瑞霞;Aβ_（1-42）對大鼠基底前腦膽堿能神經元腦紅蛋白表達影響研究[D];山東大學;2009年

2 鄧美玉;腦紅蛋白及趨化因子在缺氧缺血性腦損傷時的表達及其機制的探討[D];軍醫(yī)進修學院;2001年

3 尹梅;低體積分數氧預處理對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦組織腦紅蛋白變化的影響[D];蘭州大學;2009年

4 王法紅;腦紅蛋白在阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征和急性腦梗死患者的表達及相關性研究[D];蘭州大學;2010年

5 杜顯剛;腦紅蛋白在大鼠全身組織的分布及大鼠外傷性腦損傷后腦紅蛋白表達的實驗研究[D];四川大學;2004年

6 顧潔;亞低溫對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷腦紅蛋白表達的研究[D];蘭州大學;2008年

7 李偉光;腦紅蛋白抗自由基損傷機制的初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2010年

8 胡婧婧;腦紅蛋白對小鼠神經母細胞瘤細胞系生長速度的影響[D];福建醫(yī)科大學;2015年

9 陳雪梅;大鼠腦外傷后神經細胞凋亡及腦紅蛋白表達的實驗研究[D];四川大學;2006年

10 王萍;腦紅蛋白基因在缺氧缺血性腦損傷多臟器中的表達及其機制的探討[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2005年

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