SVF及ADSCs對乳鼠背根神經(jīng)節(jié)生長影響的實驗研究
發(fā)布時間:2017-06-09 00:01
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【摘要】:背景:周圍神經(jīng)修復一直是臨床醫(yī)生不得不面對的難題。近年來,國內(nèi)國外科研工作者都對作為自體神經(jīng)移植替代材料的組織工程神經(jīng)進行了深入研究。脂肪血管基質(zhì)成分(Stromal vascular fraction,SVF)是脂肪組織中一團富含前體脂肪細胞(Preadipocytes)、骨髓基質(zhì)細胞(Bone marrow derived mesenchymal stromal cells,MSC)、內(nèi)皮祖細胞(Endothelial progenitor cell)、T細胞、B細胞、肥大細胞和脂肪組織巨噬細胞的細胞集群組織。其來源豐富,容易培養(yǎng)擴增,具有極好的分化增殖能力、促進血管化能力以及不會增加炎癥感染的風險。SVF的作用相關研究在臨床及科研中逐漸增加。目的:SVF因含有大量干細胞及基質(zhì)細胞,應用于多領域的治療,但尚未有文章指出SVF對周圍神經(jīng)損傷修復的促進作用。本實驗旨在研究SVF及ADSCs對周圍神經(jīng)損傷修復是否具有促進作用。方法:取200g雄性SD大鼠4只,提取兩側(cè)腹股溝脂肪組織,離心得SVF,經(jīng)體外培養(yǎng)擴增ADSCs。按照變量不同將實驗分為3組,A組SVF組(1×106cells/20ul)、B組ADSCs組(1×106 cells/20ul)、C組空白對照組。A、B兩組加入12小時內(nèi)SD乳鼠背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)共培養(yǎng)。48h后通過形態(tài)學觀察,神經(jīng)絲蛋白200免疫熒光染色,對SD乳鼠DRG軸突生長長度、雪旺細胞遷移距離和軸突面積指數(shù)進行定量評價。結(jié)果:1.DRG培養(yǎng)48h后,A、B兩組DRG軸突生長長度和雪旺遷移距離相比均具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。2.A、B兩組DRG軸突生長長度和雪旺遷移距離均大于C組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.A、B、C三組DRG軸突面積指數(shù)具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。結(jié)論:1.SVF及ADSCs成分都可以促進背根神經(jīng)節(jié)軸突生長及雪旺細胞的遷移。2.SVF在促進背根神經(jīng)節(jié)軸突生長的方面比ADSCs更加有效。3.SVF可以應用于修復周圍神經(jīng)損傷。4.使用生物蛋白膠包被爬片可以成功制成并簡化乳鼠DRG模型制作程序。
【關鍵詞】:脂肪血管基質(zhì)成分 背根神經(jīng)節(jié)培養(yǎng) 神經(jīng)再生 組織工程神經(jīng) 乳鼠
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R745
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-11
- 英文縮寫詞表11-12
- 第1章 緒論12-13
- 第2章 綜述13-20
- 2.1 干細胞研究歷史13
- 2.2 骨髓間充質(zhì)干細胞13
- 2.3 脂肪血管基質(zhì)成分和脂肪基質(zhì)細胞的研究背景13-14
- 2.4 脂肪組織中分離SVF14
- 2.5 SVF應用于組織移植14
- 2.6 SVF應用于治療勃起功能障礙14-15
- 2.7 ADSCS及SVF進行細胞治療的優(yōu)劣15
- 2.8 SVF注射治療改善移植脂肪組織的血管化15
- 2.9 SVF注射治療肌腱損傷15-16
- 2.10 SVF關節(jié)腔注射緩解膝關節(jié)骨性關節(jié)炎16
- 2.11 SVF治療跖距骨骨軟骨病16-17
- 2.12 SVF注射治療髖關節(jié)發(fā)育不良17
- 2.13 SVF注射治療修復大面積組織缺損17-18
- 2.14 SVF治療難愈性創(chuàng)面18
- 2.15 小結(jié)18-20
- 第3章 材料與方法20-29
- 3.1 脂肪干細胞原代培養(yǎng)20-23
- 3.1.1 實驗名稱20
- 3.1.2 實驗目的20
- 3.1.3 實驗材料20
- 3.1.4 實驗動物20
- 3.1.5 試劑的配置20-21
- 3.1.6 實驗方法21-22
- 3.1.7 實驗圖片22-23
- 3.2 背根神經(jīng)節(jié)的獲取及培養(yǎng)23-25
- 3.2.1 實驗名稱23
- 3.2.2 實驗目的23
- 3.2.3 實驗材料23
- 3.2.4 實驗動物23
- 3.2.5 實驗步驟23-25
- 3.2.6 實驗照片25
- 3.3 12孔板生物蛋白膠包被25-26
- 3.3.1 實驗名稱25
- 3.3.2 實驗目的25-26
- 3.3.3 實驗材料26
- 3.3.4 實驗過程26
- 3.4 背根神經(jīng)節(jié)免疫熒光染色26-27
- 3.4.1 實驗名稱26
- 3.4.2 實驗目的26
- 3.4.3 實驗材料26-27
- 3.4.4 實驗過程27
- 3.5 不同數(shù)量SVF/ADSCS制備及分組27-28
- 3.6 觀測指標28
- 3.7 統(tǒng)計學方法28-29
- 第4章 結(jié)果29-32
- 4.1 DRG及ADSCS細胞形態(tài)學觀察29
- 4.2 免疫熒光染色觀察29
- 4.3 DRG軸突生長長度和雪旺細胞遷移距離測量29-30
- 4.4 DRG培養(yǎng)光鏡及免疫熒光染色照片30-32
- 第5章 討論32-36
- 第6章 結(jié)論36-37
- 參考文獻37-41
- 作者簡介及在學期間所取得的科研成果41-42
- 致謝42
【相似文獻】
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1 強環(huán);王國華;;乳鼠對不同奶食~(75)硒吸收的比較研究[J];地方病譯叢;1988年06期
2 于曉風,曲紹春,呂忠智,范志剛;乳鼠灌胃給藥方法[J];白求恩醫(yī)科大學學報;1993年06期
3 張滿新,,姚楚錚;被動免疫母鼠對乳鼠腎綜合癥出血熱病毒致死感染的作用[J];中華微生物學和免疫學雜志;1994年04期
4 鄭劍寧,裘炯良,蔡高宏,蔣伯敏;多乳鼠——拉沙熱的傳播媒介[J];中國媒介生物學及控制雜志;2005年02期
5 朱寄天;馮志強;曾f扇
本文編號:433976
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