目的:膠質(zhì)母細胞瘤(glioblastoma,GBM)是惡性程度最高的原發(fā)性腦膠質(zhì)瘤。手術(shù)切除及放化療等常規(guī)治療手段療效有限,患者死亡率高,預后極差。隨著分子生物學研究的日益深入,分子靶向治療開啟了腫瘤治療的新時代。程序性死亡配體1(Programmed death ligand 1,PD-L1)作為B7家族分子成員,在腫瘤免疫逃逸過程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),GBM腫瘤組織和細胞可以特異性表達PD-L1,但炎癥調(diào)控PD-L1在GBM中的研究較少。因此,本文以GBM細胞株及GBM患者原代腫瘤細胞為研究對象,分析炎性介質(zhì)干擾素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)對GBM細胞PD-L1表達水平的影響,探索IFN-γ調(diào)控GBM細胞PD-L1表達的具體機制及PD-L1在GBM發(fā)生發(fā)展過程中的作用。旨在為靶向PD-L1的GBM治療策略提供基礎(chǔ)依據(jù)。方法:(1)應用蛋白印跡(Western blot)及流式細胞學方法,檢測GBM細胞株及GBM原代腫瘤細胞PD-L1的表達水平。(2)給予IFN-γ(50 ng/m L)刺激GBM細胞,應用實時熒光定量聚合酶鏈鎖反應(Quantitative R...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1Westernblot檢測GBM細胞PD-L1總蛋白表達水平

結(jié)果11結(jié)果1IFN-γ上調(diào)GBM細胞PD-L1的表達應用Westernblot、流式細胞學方法檢測U251、TG905、A172、PT-1、PT-2細胞PD-L1的總蛋白表達水平，結(jié)果顯示U251、TG905、A172、PT-1、PT-2均高表達PD-L1（圖1，2）。給予IF....

圖2Westernblot檢測給予IFN-γ（50ng/mL）刺激后的GBM細胞PD-L1總蛋白表達水平

結(jié)果11結(jié)果1IFN-γ上調(diào)GBM細胞PD-L1的表達應用Westernblot、流式細胞學方法檢測U251、TG905、A172、PT-1、PT-2細胞PD-L1的總蛋白表達水平，結(jié)果顯示U251、TG905、A172、PT-1、PT-2均高表達PD-L1（圖1，2）。給予IF....

圖3流式細胞學檢測給予IFN-γ（50ng/mL）刺激后GBM細胞PD-L1膜蛋白表達水平

結(jié)果11結(jié)果1IFN-γ上調(diào)GBM細胞PD-L1的表達應用Westernblot、流式細胞學方法檢測U251、TG905、A172、PT-1、PT-2細胞PD-L1的總蛋白表達水平，結(jié)果顯示U251、TG905、A172、PT-1、PT-2均高表達PD-L1（圖1，2）。給予IF....

圖5qRT-PCR方法驗證PD-L1的敲低效率及給予IFN-γ（50ng/mL）刺激24h后GBM細胞PD-L1mRNA表達水平（***p<0.001，**p<0.01）

青島大學碩士學位論文12結(jié)果顯示U251、TG905、PT-2中ERK的磷酸化水平顯著增高；同時我們使用ERK信號通路抑制劑U0126（10μM）后，給予IFN-γ（50ng/mL）刺激，結(jié)果顯示，ERK的磷酸化被抑制，同時U251、TG905、PT-2細胞PD-L1的表達水平降....

本文編號：4028022